Summary

Granulocyte निर्भर त्वचा autoantibody प्रेरित blistering

Published: October 12, 2012
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Summary

हमारे वर्तमान काम में वर्णित है, 200 कोलेजन सातवीं के अमीनो एसिड (757-967 आ) के एक खंड के खिलाफ आईजीजी शुद्ध पशु मॉडल में बार – बार blistering के रूप में के रूप में अच्छी तरह से phenotype histo और immunopathological मानव के लक्षण सुविधाओं reproducing चूहों में इंजेक्ट कर रहे हैं बाह्यत्वचालयन bullosa acquisita (EBA)<sup> 1</sup>.

Abstract

Autoimmune घटना स्वस्थ व्यक्तियों में पाए जाते हैं, लेकिन जब आत्म सहिष्णुता में विफल रहता है, autoimmune प्रतिक्रिया विशिष्ट विकृति में परिणाम हो सकता है. के अनुसार Witebsky postulates, एक autoimmune के रूप में एक रोग निदान में मापदंड के autoantibodies के निष्क्रिय हस्तांतरण द्वारा प्रायोगिक पशुओं में रोग के प्रजनन है. बाह्यत्वचालयन लिए bullosa (EBA) acquisita, एक मूलादर्शीय त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के अंग विशेष autoimmune रोग, कई प्रयोगात्मक मॉडल हाल ही में स्थापित किए गए थे. हमारे वर्तमान काम में वर्णित है, 200 कोलेजन सातवीं के अमीनो एसिड (757-967 आ) के एक खंड के खिलाफ आईजीजी शुद्ध पशु मॉडल में बार – बार blistering के रूप में के रूप में अच्छी तरह से phenotype histo और immunopathological मानव के लक्षण सुविधाओं reproducing चूहों में इंजेक्ट कर रहे हैं 1 EBA. पूर्ण विकसित व्यापक रोग आमतौर पर 5-6 दिनों पहले इंजेक्शन के बाद देखा जाता है और बीमारी की हद तक प्रशासित ग की खुराक के साथ संबद्धollagen आईजीजी सातवीं – विशिष्ट. प्रयोगात्मक EBA (छाला गठन) में ऊतकों को नुकसान और granulocytes की भर्ती सक्रियण पर बाध्य ऊतक 2 autoantibodies, -4 से निर्भर करता है. इसलिए, इस मॉडल granulocyte निर्भर सूजन autoimmune ऊतकों को नुकसान में शामिल मार्ग के विच्छेदन के लिए अनुमति देता है, मॉडल के रूप में केवल अपवाही autoimmune प्रतिक्रिया की टी सेल स्वतंत्र चरण reproduces. इसके अलावा, अपने मूल्य autoantibodies के vivo में फफोला उत्प्रेरण संभावित प्रदर्शन और 1,3 EBA, -6 में छाला गठन की व्यवस्था की जांच के अध्ययन का एक नंबर से रेखांकित किया है. अंत में, इस मॉडल बहुत autoantibody प्रेरित रोगों में नए विरोधी भड़काऊ के उपचारों के विकास की सुविधा होगी. कुल मिलाकर, EBA के निष्क्रिय हस्तांतरण पशु मॉडल एक सुलभ और शिक्षाप्रद रोग मॉडल है और शोधकर्ताओं ने न केवल EBA रोगजनन का विश्लेषण करने के लिए, लेकिन मौलिक biologically और नैदानिक ​​जवाब में मदद मिलेगीआवश्यक autoimmunity सवालों.

Protocol

1. रोगजनक एंटीबॉडी तैयार नोट: शोधन और एंटीबॉडी के एकाग्रता उसी दिन पर किया जाना चाहिए, क्योंकि एंटीबॉडी 0.1 एम ग्लाइसिन 2.5-3 पीएच (क्षालन बफर) रात खत्म (ON) में संग्रहीत किया जा नहीं कर रहे हैं. <p class="jove_c…

Representative Results

प्रतिजन चूहों में एक पूर्ण विकसित रोग में विशिष्ट एंटीबॉडी परिणाम, नैदानिक, histological और immunopathological स्तरों पर मानव EBA जैसी निष्क्रिय हस्तांतरण. फफोले, crusts, erosions और खालित्य कान, थूथन, पंजे, पैर, पीठ और चूहों की आंखों क?…

Discussion

autoantibodies की प्रायोगिक पशुओं में निष्क्रिय हस्तांतरण उनके 7 pathogenicity, -12 के प्रदर्शन के लिए एक प्रमुख दृष्टिकोण है. इस पद्धति के माध्यम से प्राप्त पशु मॉडल, 13 autoimmunity के लिए अप्रत्यक्ष सबूत होने के अलावा, रो?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

लेखकों Freiburg विश्वविद्यालय (सीएस) के मेडिकल संकाय से ड्यूश Forschungsgemeinschaft SI-1281/4-1 और BIOSS से अनुदान द्वारा समर्थन को स्वीकार करते हैं.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
recombinant antigen The plasmids encoding for the recombinant forms of murine collagen VII are available from the corresponding author.
immune rabbit serum www.eurogentec.com We had New Zealand White rabbits immunized with 200 μg of antigen, 3 times at 2 week intervals. For this purpose we have used the services of Eurogentec S.A., Belgium.
Protein G agarose Roche Applied Science 11243233001
Balb/c mice Charles River Laboratories
OCT compound, Tissue-Tek Sakura Finetek 4583 OCT, optimal cutting temperature
Cryomold standard Sakura Finetek 4557 25 mm × 20 mm × 5 mm
Cryomold intermediate Sakura Finetek 4566 15 mm × 15 mm × 5 mm
Uni-Link-Einbettkassette R. Langenbrinck 09-0503 Histology processing and embedding cassettes
Spezial-Tatowierfarbe Schwarz H. Hauptnerund & Richard Herberholz GmbH & Co. KG 71492000 tattooing paste
Tatowierzange TZ1 EBECO E. Becker & Co GmbH tattooing device
Heparin Carl Roth GmbH & Co. 7692.1
Formaldehyde 37% Carl Roth GmbH & Co. 7386
Ketamine hydrochloride Sigma-Aldrich Chemie GmbH K2753-1G
Xylazine hydrochloride Sigma-Aldrich Chemie GmbH X1251-1G
sterile PBS Biochrom L182-50
digital camera Nikon Coolpix 5400
Syringe driven filter unit 0.45 μm Millipore
Caliper Mitutoyo 7309 1667338 Farnell (distributor)
disease scoring sheet example enclosed

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Cite This Article
Csorba, K., Sitaru, S., Sitaru, C. Granulocyte-dependent Autoantibody-induced Skin Blistering. J. Vis. Exp. (68), e4250, doi:10.3791/4250 (2012).

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