धमनी चिकनी पेशी Kv7 पोटेशियम चैनल फंक्शन तलाश पैच दबाना इलैक्ट्रोफिजियोलॉजी और दबाव Myography का उपयोग
Summary
/ कंस्ट्रिकटर फैलनेवाली (दबाव myography) प्रतिक्रियाओं के माप के साथ समानांतर में अलग धमनी myocytes (पैच electrophysiological तकनीकों दबाना का उपयोग) में Kv7 (KCNQ) पोटेशियम चैनल गतिविधि की माप संवहनी चिकनी मांसपेशी शरीर क्रिया विज्ञान में Kv7 चैनलों की भूमिका के बारे में महत्वपूर्ण जानकारी प्रकट कर सकते हैं और औषध.
Abstract
या प्रतिरोध धमनियों की दीवारों के भीतर चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं का संकुचन और विश्राम धमनी व्यास निर्धारित करता है और जिससे पोत के माध्यम से रक्त के प्रवाह को नियंत्रित करता है और प्रणालीगत रक्तचाप के लिए योगदान देता है. संकुचन प्रक्रिया साइटोसोलिक कैल्शियम ([2 Ca +] CYT) एकाग्रता, जो आयन ट्रांसपोर्टरों और चैनलों की एक किस्म के द्वारा नियंत्रित बारी में मुख्य रूप से नियंत्रित किया जाता है. आयन चैनलों संकेत पारगमन रास्ते में आम मध्यवर्ती vasoactive हार्मोन द्वारा सक्रिय वाहिकासंकीर्णन या vasodilation प्रभाव हैं. और आयन चैनल अक्सर चिकित्सकीय या तो जानबूझकर एजेंट या अनजाने (अवांछित हृदय दुष्प्रभाव पैदा करने के लिए जैसे) (जैसे कैल्शियम चैनल ब्लॉकर्स vasodilation और निम्न रक्तचाप के लिए प्रेरित करने के लिए प्रयोग किया जाता है) द्वारा लक्षित कर रहे हैं.
Kv7 (KCNQ) वोल्टेज सक्रिय पोटेशियम चैनलों हाल ही में महत्वपूर्ण शारीरिक और चिकित्सकीय targ के रूप में फंसाया गया हैचिकनी मांसपेशी संकुचन के विनियमन के लिए टिकट. दोनों शारीरिक संकेत पारगमन में और चिकित्सीय एजेंटों की कार्रवाई में Kv7 चैनलों की विशिष्ट भूमिका स्पष्ट करने के लिए, हम अध्ययन कैसे उनकी गतिविधि सेलुलर स्तर पर संग्राहक के रूप में अच्छी तरह के रूप में बरकरार धमनी के संदर्भ में उनके योगदान का मूल्यांकन करने की जरूरत है.
चूहे mesenteric धमनियों एक उपयोगी मॉडल प्रणाली प्रदान करते हैं. धमनियों आसानी से हो सकता है, dissected संयोजी ऊतक के साफ, और पैच दबाना इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी के लिए पृथक धमनी myocytes को तैयार करने के लिए प्रयोग किया जाता है, या cannulated और vasoconstrictor / vasodilator प्रतिक्रियाओं की परिस्थितियों में अपेक्षाकृत शारीरिक माप के लिए दबाव डाला. यहाँ हम माप के दोनों प्रकार के लिए इस्तेमाल किया विधियों का वर्णन और कैसे प्रयोगात्मक डिजाइन संवहनी टोन के नियमन में इन आयन चैनल की भूमिका की एक स्पष्ट समझ प्रदान करने के लिए एकीकृत किया जा सकता है के कुछ उदाहरण प्रदान करते हैं.
Protocol
Discussion
तरीकों और प्रयोगात्मक दृष्टिकोण यहाँ वर्णित काफी मजबूत हैं और स्पष्ट और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणामों का उत्पादन जब विस्तार करने के लिए सावधानीपूर्वक ध्यान के साथ लागू किया जा सकता है. अच्?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस काम KLB और अमेरिकन हार्ट एसोसिएशन (09PRE2260209) और आर्थर जे Schmitt BKM फाउंडेशन से पूर्व डॉक्टरेट फैलोशिप राष्ट्रीय हृदय, फेफड़े और रक्त संस्थान (एनआईएच R01 HL089564) से एक अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया गया था.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sodium Chloride | Sigma | S5886 | Dissecting Solution: 145 Bath solution for Electrophysiology*: 140 Internal solution for electrophysiology: 10 Isolation solution for myocytes*: 140 Bath solution for pressure myography: 145 Lumen solution for pressure myography: 145 |
| Potassium chloride | Sigma | P5405 | Dissecting Solution: 4.7 Bath solution for Electrophysiology*: 5.36 Internal solution for electrophysiology: 135 Isolation solution for myocytes*: 5.36 Bath solution for pressure myography: 4.7 Lumen solution for pressure myography: 4.7 |
| Potassium EGTA | Sigma | E4378 | Internal solution for electrophysiology: 0.05 |
| HEPES | Sigma | H9136 | Bath solution for Electrophysiology*: 10 Internal solution for electrophysiology: 10 Isolation solution for myocytes*: 10 |
| Disodium hydrogen phosphate | Sigma | S5136 | Isolation solution for myocytes*: 0.34 |
| Potassium hydrogen phosphate | Sigma | P5655 | Isolation solution for myocytes*: 0.44 |
| Magnesium Chloride | Sigma | M2393 | Bath solution for Electrophysiology*: 1.2 Internal solution for electrophysiology: 1 Isolation solution for myocytes*: 1.2 |
| Calcium Chloride | Sigma | C7902 | Bath solution for Electrophysiology*: 2 Isolation solution for myocytes*: 0.05 |
| Sodium phosphate | Fisher Scientific | BP331-1 | Dissecting Solution: 1.2 Bath solution for pressure myography: 1.2 Lumen solution for pressure myography: 1.2 |
| Magnesium Sulfate | Sigma | M2643 | Dissecting Solution: 1.17 Bath solution for pressure myography: 1.17 Lumen solution for pressure myography: 1.17 |
| MOPS | Fisher Scientific | BP308 | Dissecting Solution: 3 Bath solution for pressure myography: 3 Lumen solution for pressure myography: 3 |
| Pyruvic acid | Sigma | P4562 | Dissecting Solution: 2 Bath solution for pressure myography: 2 Lumen solution for pressure myography: 2 |
| EDTA dihydrate | Research Organics | 9572E | Dissecting Solution: 0.02 Bath solution for pressure myography: 0.02 Lumen solution for pressure myography: 0.02 |
| D-Glucose | Sigma | G7021 | Dissecting Solution: 5 Bath solution for Electrophysiology*: 10 Internal solution for electrophysiology: 20 Isolation solution for myocytes*: 10 Bath solution for pressure myography: 5 Lumen solution for pressure myography: 5 |
| Bovine serum albumin | Sigma | A3912 | Dissecting Solution: 1% Lumen solution for pressure myography: 1% |
| pH | Dissecting Solution: 7.4 Bath solution for Electrophysiology*: 7.3 Internal solution for electrophysiology: 7.2 Isolation solution for myocytes*: 7.2 Bath solution for pressure myography: 7.4 Lumen solution for pressure myography: 7.4 |
||
| Osmolarity | Dissecting Solution: 300 Bath solution for Electrophysiology*: 298 Internal solution for electrophysiology: 298 Isolation solution for myocytes*: 298 Bath solution for pressure myography: 300 Lumen solution for pressure myography: 300 |
||
*11 |
|||
Table 1. Components of solutions used in the experiment. |
References
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