<em> 체외에서</em의 생리적 운동과 수유 모터 프로그램을 도출하도록 의도하고 녹음> 준비<em> Aplysia californica</em
Summary
우리는 extracellularly 기록하고 신경, 근육, 및 개인 식별 뉴런에서 자극 할 수있는 기술을 설명<em> 체외에서</em> 도출하도록 의도 및 공급 장치에서 동작을 공급 다른 종류의 관찰<em> Aplysia</em>.
Abstract
Multifunctionality, 여러, 독특한 행동 하나를 생성 한 주변 구조의 기능은 동물이 빠르게 환경을 변화하는 자신의 행동을 적응 할 수 있습니다. 해양 연체 동물 Aplysia californica는 multifunctionality 연구를위한 다루기 쉬운 시스템을 제공합니다. 수유하는 동안, Aplysia 같은 먹이 장치, 구강 대량를 사용하여 행동의 여러 독특한 종류를 생성합니다. 이러한 행동을 제어하는 신경절은 electrophysiological 연구 액세스 할 수 있습니다 대형 식별 뉴런의 번호가 포함되어 있습니다. 이러한 뉴런의 활동은 신경 활동에 음식 움켜 잡 기사의 친척을 종료하는 신경 활동의 타이밍에 따라 두 가지 종류, ingestive 및 egestive 프로그램으로 나눌 수 있습니다 모터 프로그램에 설명 된 해당 protracts 또는 retracts 움켜 잡 기사 2. 그러나, 절연 신경절에서 이러한 행동을 생산 것입니다 근육 운동은하는, 결석 아르더 생체, 신경과 근육 레코딩의 프로그램에게 2,3,4를 공급하는 해당 획득했습니다. 관찰 모터 프로그램은 실제 행동의 상관 관계 여부를 확신 할 수 있지만, 직접 5 개의 개별 뉴런에서 기록하는 것은 매우 어렵습니다 수 있습니다. 또한, 생체에 ingestive 프로그램은 더 물린 상처와 제비의 1,2, 대부분의 이전에 체외 준비에 설명에 할 어려운 차이로 나눌 수 있습니다.
정지 구강 대량 준비 (그림 1) 절연 신경절과 그대로 동물 사이의 간격을 다리. 이 준비에는 ingestive 행동 – 물고과 삼키는 모두 포함 – 개별 뉴런이에서 녹화 및 세포 전극에게 6을 사용하여 자극 할 수 있으므로 및 egestive 행동 (거부)가 동시에 elicited 수 있습니다. 서로 다른 행동과 관련된 먹이 움직임이 recor 할 수 있습니다ded, 정량화 및 모터 프로그램에 직접 관련된. 중지 된 구강 대량 준비의 모터 프로그램은 모터 프로그램이 분리 된 신경절에 elicited하는 것보다 생체에서 관찰 것과 더 유사하게 나타납니다. 따라서이 준비 모터 프로그램은보다 직접적으로 생체 행동에 관한 할 수 있습니다, 같은 시간에, 개별 뉴런은 그대로 동물에 비해 녹음 및 자극에 더 액세스 할 수 있습니다. 또한,로 분리 신경절과 그대로 동물 사이의 중간 단계, 정지 구강 대량의 연구 결과는 더 감소 등 그대로 두 설정에서 얻은 데이터의 해석에 도움이 수 있습니다. 정지 구강 대량 준비 Aplysia의 multifunctionality의 신경 제어를 특징위한 유용한 도구입니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
이전 작업은 그대로 동물과 같은 고립 된 신경절 등의 감소 준비에서 Aplysia 모터 프로그램을 특징으로하고 있습니다. 개별 뉴런의 녹음은 5를 획득 한하지만 그대로 동물에서 같은 실험은 매우 어려운이며, 전극은 먹이를하는 동안 신경 세포로 신경 세포에서 이동할 수 없습니다. 절연 신경절에서 신경 활동에 의해 유도 먹이 움직임이 관찰 할 수 없습니다. 정지 구강 대량 준비는?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 연구는 NIH 보조금 NS047073 및 NSF 보조금 DMS1010434에 의해 지원되었다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sodium chloride | Fisher Scientific | S671 | Biological, Certified |
| Potassium chloride | Fisher Scientific | P217 | Certified ACS |
| Magnesium chloride hexahydrate | Acros Organics | 19753 | 99% |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Scientific | M63 | Certified ACS |
| Calcium chloride dihydrate | Fisher Scientifc | C79 | Certified ACS |
| Glucose (dextrose) | Sigma-Aldrich | G7528 | BioXtra |
| MOPS buffer | Acros Organics | 17263 | 99% |
| Carbachol | Acros Organics | 10824 | 99% |
| Sodium hydroxide | Fisher Scientific | SS255 | Certified |
| Hydrochloric acid | Fisher Scientific | SA49 | Certified |
| Single-barreled capillary glass | A-M Systems | 6150 | |
| Flaming-Brown micropipette puller model P-80/PC | Sutter Instruments | Filament used: FT345B | |
| Enamel coated stainless steel wire | California Fine Wire | 0.001D, coating h | |
| Household Silicone II Glue | GE | ||
| Duro Quick-Gel superglue | Henkel corp. | ||
| A-M Systems model 1700 amplifier | A-M Systems | Filter settings: 300-500 Hz nerves,10-500 Hz I2 muscle | |
| Pulsemaster Multi-Channel Stimulator | World Precision Instruments | A300 | |
| Stimulus Isolator | World Precision Instruments | A360 | |
| AxoGraph X | AxoGraph Scientific | ||
| Veeder-Root Totalizing Counter | Danaher | C342-0562 | |
| Gold Connector Pins | Bulgin | SA3148/1 | |
| Gold Connector Sockets | Bulgin | SA3149/1 | |
| Sylgard 184 Silicone Elastomer | Dow Corning | ||
| 100 x 50 mm Crystalizing Dish | Pyrex | ||
| High Vacuum Grease | Dow Corning | ||
| Pipet Tips | Fisher Scientific | 21-375D | |
| Minutien Pins | Fine Science Tools | 26002-10 | |
| Modeling Clay | Sargent Art | 22-4400 | |
| Silk Sutures | Ethicon | K89OH | |
| Whisper Air Pump | Tetra | 77849 | |
| Aquarium Tubing | Eheim | 7783 | 12/16 mm |
| Elite Airstone | Hagen | A962 | |
| Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 15000-08 | |
| Dumont #5 Fine Forceps | Fine Science Tools | 11254-20 | |
| Yaki Sushi Nori Seaweed | Rhee Bros | ||
| Kimwipes | Kimberly-Clark | 34155 |
References
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