Summary

Ортотопической трансплантации аорты у мышей для изучения сосудистых заболеваний

Published: November 28, 2012
doi:

Summary

Мы описываем технику, в которой часть брюшной аорты от мыши пересаживается ортотопически чуть ниже почечных артерий в аллогенных и сингенных получателя. Эта техника может быть полезна в исследованиях, в которых трансплантация крупных артерий одинакового размера считается выгодным.

Abstract

Сосудистые процедур, связанных с анастомозов у ​​мыши, как правило, считается трудным и в значительной степени зависит от мастерства отдельных хирурга. В значительной степени это верно, но есть ряд важных принципов, которые могут уменьшить сложность этих процедур и повышения воспроизводимости. Ортотопической трансплантации аорты является отличной процедурой, в которой для изучения этих принципов, потому что она включает в себя только два конца в конец анастомоза, но требует хорошей техникой наложения швов и обработки судов для последовательного успеха. Эта процедура начинается с закупки длина брюшной аорты от донора животных, с последующим разделением родной аорты у получателя. Закупаются аорты помещается между разделенными концами получателя аорты и пришивается на место с помощью конца в конец анастомозов. Для достижения этой цели успешно требует высокой степени концентрации, хорошие инструменты, твердая рука, и понимание того, как легкососудистой мыши могут быть повреждены, в результате тромбоза. Изучение этих важных принципов является то, что занимает большую часть времени начинающих при изучении микрохирургии в мелких грызунов. На протяжении всего этого протокола, мы говорим об этих важных моментах. Эта модель может быть использована для изучения сосудистых заболеваний в различные экспериментальные системы 1-8. В контексте показанный здесь, это наиболее часто используется для изучения после трансплантации сосудистых заболеваний, общих долгосрочных осложнений твердых трансплантации органов, в которых гиперплазии интимы происходит в аллотрансплантата. Основным преимуществом модели является то, что она облегчает количественный анализ морфометрических и пересаженные судно лежит прилегающих к эндогенным судна, которое может служить в качестве дополнительного контроля 9. Техника показано здесь чаще всего используется для мышей весом 18-25 граммов. Мы накопили большую часть нашего опыта использования C57BL/6J, BALB / CJ, и C3H/HeJ штаммов.

Protocol

1. Предоперационной подготовки Хирургические процедуры, независимо от того, насколько тщательно сделано, приводит к значительному стрессу. Чтобы свести к минимуму последствия такого стресса и увеличить запасы, животные должны содержаться в виварии, по крайней мере 72 часа перед и…

Representative Results

На рисунке 1 показана аортального протеза. Белые стрелки обозначают шов линии. Патент трансплантат покажем видимых импульсов. Рисунок 2 показывает типичный эксперимент, в котором получатель выживания последовало в течение 56 дней. Одна группа состояла из дикого типа (C…

Discussion

Мышь моделей аорты трансплантации обеспечивают ряд преимуществ, потому что мыши очень хорошо определены immunogenetically 9,12,13, и они могут быть легко манипулировать, чтобы изменять их экспрессии специфических генов, если это необходимо. Как отмечалось во введении, сосудистая хирургия у…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Эта работа финансировалась за счет основного ресурса NIH P30 О'Брайен центр (DK 079 337).

Materials

Item Company Catalog No.
Vascular Clamps Fine Science Tools 00396-01 (Size B-1)
Dumont Forceps Fine Science Tools 11293-00
10-0 Needled microsuture AROSurgical TK-107038
Straight scissors Roboz Surgical Instrument Co. RS-5620
Low temperature cauterizer Beaver-Visitec International 8441000
Self retaining retractor World Precision Instruments 14240

References

  1. Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
  2. Dambrin, C., Calise, D., Pieraggi, M. T., Thiers, J. C., Thomsen, M. Orthotopic aortic transplantation in mice: a new model of allograft arteriosclerosis. J. Heart Lung Transpl. 18, 946-951 (1999).
  3. Calise, D., et al. Orthotopic aortic transplantation in rodents by the sleeve technique: a model system for the study of graft vascular disease. Transpl. Proc. 33, 2369-2370 (2001).
  4. Thomsen, M., et al. An orthotopic aortic graft mouse model to study the immunopathology of chronic vascular rejection. Transpl. Proc. 34, 2833-2835 (2002).
  5. Benza, R. L., George, J. F. Aortic graft transplantation in mice. J. Heart Lung Transpl. 21, 1319-1321 (2002).
  6. Chereshnev, I., et al. Mouse model of heterotopic aortic arch transplantation. The Journal of surgical research. 111, 171-176 (2003).
  7. Cho, H. R., et al. Improved surgical technique for heterotopic aortic transplantation in mice. J. Korean Med. Sci. 22, 12-15 (2007).
  8. Zhong, R. Organ transplantation in mice: current status and future prospects. Microsurgery. 19, 52-55 (1999).
  9. George, J. F., Pinderski, L. J., Litovsky, S., Kirklin, J. K. Of mice and men: mouse models and the molecular mechanisms of post-transplant coronary artery disease. J. Heart Lung Transpl. 24, 2003-2014 (2005).
  10. Gorska, P. Principles in laboratory animal research for experimental purposes. Med Sci Monit. 6, 171-180 (2000).
  11. Landi, M. S., Kreider, J. W., Lang, C. M., Bullock, L. P. Effects of shipping on the immune function in mice. Am. J. Vet. Res. 43, 1654-1657 (1982).
  12. Sun, H., et al. Improved surgical technique for the establishment of a murine model of aortic transplantation. Microsurgery. 18, 368-371 (1998).
  13. Chen, B., et al. Carbon monoxide rescues heme oxygenase-1-deficient mice from arterial thrombosis in allogeneic aortic transplantation. Am. J. Pathol. 175, 422-429 (2009).
  14. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transpl. Proc. 5, 733-735 (1973).
  15. Chang, E. I., et al. Vascular anastomosis using controlled phase transitions in poloxamer gels. Nature medicine. 17, 1147-1152 (2011).
check_url/4338?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Guo, L., Agarwal, A., George, J. F. Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease. J. Vis. Exp. (69), e4338, doi:10.3791/4338 (2012).

View Video