फोकल मस्तिष्क ischemia के लिए प्रारंभिक इस्केमिक सहिष्णुता पैदा करने के लिए एक पर्याप्त शर्त प्रोत्साहन के रूप में द्विपक्षीय आम मन्या धमनी आड़
Summary
सबूत नहीं जमा है, कि इस्कीमिक शर्त (पीसी) – मस्तिष्क के लिए एक गैर हानिकारक इस्कीमिक चुनौती – बाद में एक हानिकारक इस्कीमिक अपमान करने के लिए एक क्षणिक संरक्षण प्रदान करता है. हम C57BL6 / जम्मू चूहों में क्षणिक फोकल मस्तिष्क ischemia (मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा, MCAO द्वारा प्रेरित) को जल्दी इस्कीमिक सहिष्णुता (आईटी) उत्पन्न करने के लिए एक शर्त प्रोत्साहन के रूप में द्विपक्षीय आम मन्या धमनी रोड़ा (BCCAO) की स्थापना की.
Abstract
सबूत नहीं जमा है, कि इस्कीमिक शर्त – मस्तिष्क के लिए एक गैर हानिकारक इस्कीमिक चुनौती – बाद में एक हानिकारक इस्कीमिक अपमान करने के लिए एक क्षणिक संरक्षण प्रदान करता है. हम C57BL6 / जम्मू चूहों में क्षणिक फोकल मस्तिष्क ischemia के लिए जल्दी इस्कीमिक सहिष्णुता पैदा करने के लिए एक शर्त प्रोत्साहन के रूप में द्विपक्षीय आम मन्या धमनी रोड़ा की स्थापना की है. इस वीडियो में, हम इस अध्ययन के लिए इस्तेमाल किया पद्धति का प्रदर्शन करेंगे.
Introduction
इस्कीमिक स्ट्रोक एक उच्च मृत्यु दर और एक विशाल सामाजिक – आर्थिक बोझ 1 के साथ एक बीमारी है. हाल के दशकों में गहन प्रयोगात्मक और नैदानिक वैज्ञानिक प्रयासों के बावजूद, तीव्र इस्कीमिक स्ट्रोक के मरीजों के लिए उपचार के विकल्प 2 बहुत ही सीमित रहते हैं. उस के विपरीत, विकसित देशों में बुजुर्ग लोगों के प्रतिशत में वृद्धि नाटकीय रूप से अगले दशकों में 3 इस्कीमिक स्ट्रोक के साथ रोगियों की घटनाओं और व्याप्तता बढ़ जाएगा. इसलिए, इस्कीमिक स्ट्रोक के साथ रोगियों में नए उपचार रणनीतियों के लिए एक दबाने की जरूरत है.
एक दृष्टिकोण एक हानिकारक उत्तेजना के साथ सामना करने के लिए मस्तिष्क की अंतर्जात अनुकूलन के तंत्र में आगे की समझ हासिल करने के लिए है. यह मस्तिष्क व्युत्पन्न neuroprotection भी इस्कीमिक शर्त (पीसी) या इस्कीमिक सहिष्णुता (आईटी) के रूप में जाना जाता है और मस्तिष्क के लिए आवेदन किया है एक गैर हानिकारक हानिकारक प्रोत्साहन, एक क्षणिक प्रतिरोध को प्रेरित करता है, जिनमें एक घटना का वर्णन करता हैबाद में एक हानिकारक इस्कीमिक अपमान 4 के खिलाफ. आईटी जल्दी, पीसी के बाद कुछ ही घंटों के लिए मिनट के भीतर होता है और 4 घटित करने के लिए घंटे के एक जोड़े की एक विलंबता की जरूरत है, जो आईटी देरी जो: आईटी दो अलग अलग समय खिड़कियों में होता है.
अब तक मस्तिष्क में आईटी पर अनुसंधान आईटी देरी पर ध्यान केंद्रित किया है. बहुत कम आईटी जल्दी के तंत्र पर जाना जाता है. इस अध्ययन का उद्देश्य एक पर्याप्त पीसी प्रोत्साहन के रूप में, आईटी में देरी को उत्पन्न करने के लिए एक स्थापित उत्तेजना उत्पन्न करने के लिए है जो द्विपक्षीय आम मन्या धमनी रोड़ा (BCCAO) स्थापित करने के लिए है क्षणिक फोकल मस्तिष्क ischemia (मध्य मस्तिष्क धमनी रोड़ा द्वारा प्रेरित, MCAO) को आईटी जल्दी C57BL6 में / जम्मू चूहों.
दोनों शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के दौरान (BCCAO और MCAO), लेजर डॉपलर flowmetry (एलडीएफ) से मस्तिष्क में रक्त प्रवाह की निगरानी (CBF) का प्रदर्शन किया गया था.
BCCAO anesthetized और अनायास साँस लेने चूहों में प्रदर्शन किया गया था. दोनों आम मन्या धमनियों (सीसीए) के संपर्क में थेऔर 60 के लिए occluded सेकंड reperfusion के 5 मिनट के बाद. इस BCCAO / reperfusion के अनुक्रम में दो बार दोहराया गया था. सर्जरी के बाद, चूहों जल्दी से बरामद किया और कार्यात्मक हानि के कोई संकेत नहीं दिखाया. BCCAO प्रोटोकॉल मस्तिष्क में देरी कोशिका मृत्यु में परिणाम नहीं था कि ऊपर वर्णित, बाहर शासन करने के लिए, हम एक में BCCAO के बाद 72 घंटा धुंधला हो जाना एक TdT की मध्यस्थता dUTP बायोटिन निक अंत लेबलिंग (TUNEL के) (या नकली सर्जरी) का प्रदर्शन अलग समूह.
MCAO 5-7 कृन्तकों में फोकल मस्तिष्क ischemia के शामिल होने के लिए एक व्यापक रूप से स्थापित मॉडल है. सर्जिकल प्रक्रियाओं मानकीकृत संचालन प्रक्रिया (एसओपी) 8 का उपयोग किया जाता था. बाएं सीसीए को प्रकाश में लाने के बाद, एक सिलिकॉन से ढके monofilament जिससे पूर्वकाल मस्तिष्क धमनी (एसीए) तक विलिस के सर्किल में आंतरिक मन्या धमनी (आईसीए) के माध्यम से उन्नत किया है और बाहर का सीसीए, मध्य मस्तिष्क धमनी की उत्पत्ति (में पेश किया गया था एमसीए) समय का एक निर्धारित अवधि के लिए occluded था. इस अध्ययन में, हमआम तौर पर स्ट्रिआटल और cortical मस्तिष्क क्षेत्रों को शामिल एमसीए क्षेत्र में एक और इस्कीमिक घाव में जो परिणाम MCAO का इस्तेमाल किया 45 मिनट,.
हमारे अध्ययन में, हम जल्दी आईटी पीसी प्रोत्साहन के रूप में BCCAO का उपयोग करने का अस्थायी प्रोफाइल का विश्लेषण किया. हमारे डेटा BCCAO और MCAO के बीच इष्टतम समय देरी आईटी 30 मिनट है जल्दी प्रेरित करने के लिए है कि, संकेत दिया.
इस वीडियो में, हम दोनों शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं, अर्थात् BCCAO और MCAO के एक प्रदर्शन दे देंगे.
Protocol
Representative Results
Discussion
हमारे अध्ययन में, हम BCCAO के तीन दृश्यों, हर एक मिनट के लिए स्थायी और पांच मिनट के लिए reperfusion की, जिसके बाद आईटी जल्दी प्रेरित करने के लिए एक पर्याप्त इस्कीमिक पीसी प्रेरणा हैं कि पता चला है.
इसके अल?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Name of the instrument | Company | Catalogue number/model |
| Binocular surgical microscope | Zeiss | Stemi 2000 C |
| Light source for microscope | Zeiss | SteREO CL 1500 ECO |
| Heating pad with rectal probe | FST | 21061-10 |
| Stereotactic frame | David Kopf | Model 930 |
| Scissors | FST | 91460-11 |
| Dumont forceps #5 | FST | 11251-10 |
| Dumont forceps #7 | FST | 11271-30 |
| Mircovascular clamp | FST | 00398-02 |
| Clamp applicator | FST | 00072-14 |
| Springscissors | FST | 15372-62 |
| Needle holder | FST | 12010-14 |
| Needles | Feuerstein, Suprama | BER 562-20 |
| 5-0 silk suture | Feuerstein, Suprama | |
| 7-0 silk suture | Feuerstein,Suprama | |
| 8-0 silk suture | Feuerstein, Suprama |
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