Summary

Cardiac Stress Test geïnduceerd door dobutamine en bewaakt door hartkatheterisatie in Muizen

Published: February 10, 2013
doi:

Summary

We beschrijven het protocol een cardiale stress test geïnduceerd door dobutamine en gevolgd door hartkatheterisatie in normale muizen voeren. Ook laten we zien de toepassing ervan op subklinische hart-en vaatziekten willen onthullen, hoog vet dieet-geïnduceerde obese muizen.

Abstract

Dobutamine een β-adrenerge agonist met een affiniteit hoger receptor uitgedrukt in het hart (β 1) dan receptoren tot expressie gebracht in de slagaders (β 2). Bij systemisch toegediend, het verhoogt de cardiale vraag. Zo, dobutamine ontmaskert abnormaal hartritme of ischemische gebieden mogelijk risico van infarct.

Monitoring van de hartfunctie tijdens een cardiale stress test kan worden uitgevoerd door ofwel ecocardiography of hartkatheterisatie. Dit laatste is een invasieve maar accurate en techniek die de eerste.

Cardiale stress test geïnduceerd door dobutamine en gecontroleerd door hartkatheterisatie uitgevoerd zoals hier beschreven kan, in een experiment, het meten van de volgende hemodynamische parameters: hartslag (HR), systolische druk, diastolische druk, eind-diastolische druk, maximale overdruk ontwikkeling (dP / dtmax) en de maximale negatieve persure ontwikkeling (dP / dt min), bij aanvang omstandigheden onder toenemende doses dobutamine.

Zoals verwacht, in normale muizen zagen we een dobutamine dosis-gerelateerde toename in HR, dP / dt max en dP / dt min. Bovendien, bij de hoogste geteste dosis (12 ng / g / min) de hartdecompensatie vetrijke dieet-geïnduceerde zwaarlijvige muizen was ontmaskerd.

Protocol

Protocol is goedgekeurd door de Ethische Commissie van Facultad de Medicina Clinica Alemana-Universidad del Desarrollo. I. Voorbereiding Dobutamine Infusion Los 10 mg van dobutamine in 20 ml van gedestilleerd steriel water, teneinde een voorraadoplossing van 500 ug / ml dobutamine verkrijgen. Aliquot en bewaar bij -20 ° C. Deze oplossing kan tenminste gedurende 3 maanden. Ontdooien een hoeveelheid dobutamine stock oplossing bij kamertemperatuur. Verdun dobutam…

Representative Results

De bloeddruk signaal wordt bepaald door systolische en diastolische druk. Wanneer de druksensor in de linker ventrikel, de druk (LVP) golfvorm wordt gekenmerkt door een daling tot nul diastolische druk en het uiterlijk van de linker atriale contractie voor ventrikel contractie (figuur 1). Bij referentietoestand, ketamine-xylazine verdoofd normale muizen hadden HR van 280 ± 24, P max van 107 ± 8, P min 5 ± 1, EDP van 14 ± 2, dP / dt max van 6081 ± 365 en dP / dt <sub…

Discussion

Cardiale stress test veroorzaakt door dobutamine en gecontroleerd door hartkatheterisatie is bewerkelijk. Niettemin volgens het protocol hier beschreven en met een korte tijd van training is het mogelijk zes hemodynamische parameters in een experiment dat ongeveer een uur.

De kritische stappen van het protocol hier gepresenteerde zijn de cannulations van de bloedvaten. Wat de canulatie van de halsslagader dient uitgevoerde insnijding groot zijn dat de drie weefsellagen van de slagader, en gr…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Wij danken Dr Helio Salgado, Renata Lataro en Mauro de Oliveira, School of Medicine van Ribeirão Preto, Universiteit van Sao Paulo en Dr Ben Janssen, Cardiovascular Research Institute Maastricht, Universiteit Maastricht, voor genereuze hulp tijdens de set-up proces.

Dit werk werd ondersteund door FONDECYT subsidie ​​N ° 11090114 naar SDC

Materials

Reagents
PE-50/10 Warner Instruments 64-0752
Silk thread 6/0 HR17 Tagum SN0713K
Xylacin 20 mg/ml Laboratorio Centrovet
Ketamine 100 mg/ml Drag Pharma
Sodium chloride 0.9% Lab Sanderson S.A.
Dobutamine hydrochloride Sigma-Aldrich D0676
Syringe U-100 Insulin 29G x ½” Terumo Medical Co.
Forceps Dissecting Micro 11.5 cm Style 7 Lawton Medizintechnik 09-0959
Graefe Forceps Cvd 0.7mm 7cm Lawton Medizintechnik 62-0263
Clamps Dieffenbach bulldog Cl Str 38 mm Lawton Medizintechnik 60-010
Vannas Scissors 8 cm Str Fh Lawton Medizintechnik 63-1400
Equipment
SPR-671 MiKro-Tip Pressure catheter Millar instruments 840-6719
PCU-2000 Pressure Control Unit Millar instruments 880-0129
PowerLab 4/30 ADinstruments Pty Ltd. ML866
LabChartPro 7 ADinstruments Pty Ltd. MLU260/7
Legato200 Infusion Pump KdScientific KD-KDS210P
TCAT-2LV Temperature controller and isothermal heating plate PhysiTemp instruments Inc.
Medical Oxygen supply Indura
Rectal probe ADinstruments Pty Ltd. MLT1404
Trinocular microscope, axial illumination LW Scientific Z2B-TRI-ETNE, ILP-1502-LTS1, ILP-1502-DGGF

References

  1. Hart, C. Y., Burnett, J. C., Redfield, M. M. Effects of avertin versus xylazine-ketamine anesthesia on cardiac function in normal mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 281, H1938-H1945 (2001).
  2. Janssen, B. J., et al. Effects of anesthetics on systemic hemodynamics in mice. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 287, H1618-H1624 (2004).
  3. Lorenz, J. N. A practical guide to evaluating cardiovascular, renal, and pulmonary function in mice. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 282, R1565-R1582 (2002).
  4. Lorenz, J. N., Robbins, J. Measurement of intraventricular pressure and cardiac performance in the intact closed-chest anesthetized mouse. Am. J. Physiol. 272, H1137-H1146 (1997).
  5. Nemoto, S., DeFreitas, G., Carabello, B. A. Cardiac catheterization technique in a closed-chest murine model. Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 42, 34-38 (2003).
  6. Daniels, A., et al. Impaired cardiac functional reserve in type 2 diabetic db/db mice is associated with metabolic, but not structural, remodelling. Acta Physiol. (Oxf). 200, 11-22 (2010).
  7. De Celle, T., et al. Long-term structural and functional consequences of cardiac ischaemia-reperfusion injury in vivo in mice. Exp. Physiol. 89, 605-615 (2004).
  8. Huntgeburth, M., et al. Transforming growth factor beta oppositely regulates the hypertrophic and contractile response to beta-adrenergic stimulation in the heart. PLoS One. 6, e26628 (2011).
  9. Reddy, A. K., et al. Cardiac function in young and old Little mice. J. Gerontol. A. Biol. Sci. Med. Sci. 62, 1319-1325 (2007).
  10. Christoffersen, C., et al. Cardiac lipid accumulation associated with diastolic dysfunction in obese mice. Endocrinology. 144, 3483-3490 (2003).
check_url/50050?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Calligaris, S. D., Ricca, M., Conget, P. Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice. J. Vis. Exp. (72), e50050, doi:10.3791/50050 (2013).

View Video