संग्रह है, और स्वाभाविक रूप से पर्यावरण से Magnetotactic बैक्टीरिया उत्पन्न का अलगाव संवर्धन
Summary
हम एक के लिए है कि प्राकृतिक जल के लिए लागू किया जा सकता है magnetotactic बैक्टीरिया (एमटीबी) इकट्ठा विधि प्रदर्शित करता है. एमटीबी और अलग किया जा सकता है तलछट एक अपेक्षाकृत सरल सेटअप है कि बैक्टीरिया प्राकृतिक चुंबकत्व का लाभ लेता है का उपयोग कर नमूने से समृद्ध है. पृथक एमटीबी फिर दोनों प्रकाश और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग विस्तार से जांच की जा सकता है.
Abstract
Magnetotactic बैक्टीरिया (एमटीबी) जलीय सूक्ष्मजीवों कि 1 विशेषकर तलछट मैसाचुसेट्स (यूएसए) के नमक दलदल में एकत्र नमूनों में से एक 1975 में वर्णित हैं. तब से एमटीबी सभी 2 दुनिया भर से किया गया है स्तरीकृत पानी और तलछट स्तंभों में खोज की है. सभी एमटीबी एक आम सुविधा है कि वे magnetosomes, जो मैग्नेटाइट के intracellular, झिल्ली ही सीमित चुंबकीय nanocrystals (3 Fe हे 4) और / या greigite (Fe 3 4 एस) या दोनों 3, 4 होते. उत्तरी गोलार्द्ध में, एमटीबी आम तौर पर एक चुंबक के दक्षिण छोर पर आकर्षित कर रहे हैं, जबकि दक्षिणी गोलार्द्ध में वे आम तौर पर एक 3,5 चुंबक के उत्तरी छोर के लिए आकर्षित कर रहे हैं. इस संपत्ति जब पर्यावरणीय नमूनों से एमटीबी को अलग करने की कोशिश कर रहा शोषण किया जा सकता है.
एमटीबी को समृद्ध करने के लिए सबसे आम तरीकों में से एक के लिए एक स्पष्ट प्लास्टिक के कंटेनर का उपयोग करने के लिए एक प्राकृतिक स्रोत से तलछट और पानी इकट्ठा करने के लिए है,एक मीठे पानी तालाब के रूप में इस तरह के. उत्तरी गोलार्द्ध में, एक चुंबक के दक्षिण छोर तलछट पानी इंटरफ़ेस में तलछट ऊपर सिर्फ कंटेनर के बाहर के खिलाफ रखा गया है. कुछ समय के बाद, जीवाणु एक विंदुक के साथ चुंबक के पास कंटेनर के अंदर से हटाया जा सकता है और फिर एक केशिका 6 दौड़ का मैदान और एक चुंबक का उपयोग करके आगे समृद्ध. एक बार समृद्ध, बैक्टीरिया फांसी बूंद पद्धति का उपयोग करके एक खुर्दबीन स्लाइड पर रखा जा सकता है और एक खुर्दबीन प्रकाश में मनाया या एक तांबे ग्रिड पर जमा और संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (मंदिर) का उपयोग कर देखा.
इस पद्धति का उपयोग करके, पृथक एमटीबी microscopically तैराकी जैसे विशेषताओं का निर्धारण करने के लिए अध्ययन किया जा सकता है, व्यवहार और flagella, कोशिकाओं, चुंबकीय क्रिस्टल के आकार, की संख्या magnetosomes, प्रत्येक कोशिका में magnetosome श्रृंखला की संख्या, की रचना की सेल आकारिकी के प्रकार संख्या nanomineral क्रिस्टल और intracellular vacuoles की उपस्थिति.
Protocol
Representative Results
Discussion
Magnetotactic बैक्टीरिया जरूरी हर जलीय पर्यावरण 8 में नहीं पाए जाते हैं, लेकिन जब वे होते हैं, वे 100 के आदेश पर पाया जा सकता है – 2 मिली लीटर प्रति 1,000 कोशिकाओं. आदेश में ऑप्टिकल माइक्रोस्कोपी का उपयोग एमटीबी ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
अमेरिका के राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन पूर्व एशियाई और प्रशांत ग्रीष्मकालीन संस्थानों, अमेरिका अनुसंधान अनुदान कार्यक्रम के जियोलाजिकल सोसाइटी और स्नातकोत्तर अनुसंधान और छात्रवृत्ति के लिए पूर्व छात्रों अनुदान यह काम अमेरिका के राष्ट्रीय विज्ञान फाउंडेशन (कान 0,920,299 और कान 0,745,808) से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया ओहियो स्टेट यूनिवर्सिटी से. हम अपने insightful टिप्पणियों के लिए संपादक और दो अनाम समीक्षक धन्यवाद देना चाहूंगा.
Materials
| Item Name | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Glass slides | Fisher Scientific | S95933 | |
| Glass Pasteur pipets | Fisher Scientific | 13-678-6A | |
| O-ring | Hardware store | ||
| Cover slips | Fisher Scientific | 12-542B | |
| Bar magnet | Fisher Scientific | S95957 | |
| Container | Any | Any plastic or glass container that can hold at least 0.5 L and can be sealed | |
| Cotton | Any | ||
| Microscope with 60X dry lens | Zeiss | A 60X dry lens is not absolutely necessary, but this gives a high NA without using oil | |
| Diamond pen | Fisher Scientific | 08-675 | |
| 0.22 mm filter | Fisher Scientific | 09-719C | |
| 1 ml syringe | Fisher Scientific | NC9788564 | |
| Microcentrifuge tubes | Fisher Scientific | 02-681-320 | |
| Formvar/Carbon 200 mesh, copper grids | Ted Pella Inc. | 01800 | |
| Uranyl acetate | Ted Pella Inc. | 19481 | |
| Tecnai Spirit TEM | FEI | ||
| Tecnai F20 S/TEM | FEI |
References
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