Summary

Uppsamling och mätning sårvätska Biokemiska medlare i kirurgiska sår

Published: October 20, 2012
doi:

Summary

Den här artikeln innehåller en detaljerad och visuell beskrivning av en metod för att samla in och mäta biokemiska inflammatoriska och nociceptiv mediatorer vid operationssåret webbplatsen efter kejsarsnitt. Denna mänskliga bioanalys har använts för att bestämma sambanden mellan sår och serum cytokin och narkotika-medierade förändringar i sår cytokiner, kemokiner och neuropetides.

Abstract

Vi beskriver en metod med vilken vi kan samla in och mäta biokemiska inflammatoriska och nociceptiv mediatorer vid operationssåret webbplatsen. Samla platsspecifika biokemiska markörer är viktigt att förstå sambandet mellan nivåer i serum och operationssåret, fastställa de samband mellan mediatorfrigöring, smärta, smärtstillande användning och andra resultat av intresse, och utvärdera effekten av systemisk och perifera läkemedelsadministrering på operationssåret biokemi. Denna metod har tillämpats på friska kvinnor som genomgår elektiv kejsarsnitt med spinal anestesi. Vi har mätt sårexsudat och serum medlare vid samma tidsintervall som patientens smärtupplevelse och analgetika konsumtion för upp till 48 timmar efter kejsarsnitt. Med användning av denna metodik har vi kunnat detektera olika biokemiska mediatorer, inklusive nervtillväxtfaktor (NGF), prostaglandin E2 (PG-E2) substans P, IL-1β, IL-2, IL-4, IL-6, IL-7, IL-8,IL-10, IL-12, IL-13, IL-17, TNFa, INFy, G-CSF, GM-CSF, MCP-1 och MlP-1β. Studier som tillämpar denna mänskliga operationssåret bioanalys har inte funnit några samband mellan sår och serumkoncentrationer cytokin eller deras tid frisättningsprofil (J Pain 2008,. 9 (7) :650-7) 1 Vi har även dokumenterat nyttan av tekniken att identifiera. läkemedel-förmedlade förändringarna i sår cytokin innehåll (Anesth Analg 2010, 111:1452-9). 2

Introduction

Efter ett kirurgiskt snitt, bosatt och migrerande inflammatoriska celler släpper pro-och anti-inflammatoriska cytokiner, prostanoider, neuropeptider och kemokiner som är viktiga för att initiera och upprätthålla smärta. 3,4 Förmågan att samla platsspecifika biokemiska markörer är avgörande för att bestämma Förhållandet mellan nivåer i serum och operationssåret, förstå det komplicerade förhållandet mellan mediatorfrigöring och kirurgisk smärta och kunna utvärdera effekten av både systemisk och perifer läkemedelsadministrering på operationssåret biokemi. Studier har fokuserat på systemiska mätningar av biokemiska mediatorer och har inte vara platsspecifika frisättning. 5,6 Serum mätningar av cytokiner och kemokiner kan vara reflekterande av lokala kirurgiska sår biokemiska händelser och endast indikerar en global systemiskt svar på kirurgisk skada. Den här artikeln innehåller en detaljerad och unik visuell beskrivning av denna metod som var granst refereras i 2008 i Journal of Pain. 1 Syftet med denna JUPITER artikel är att ge en unik och visuellt bättre beskrivning av metoderna.

Protocol

1. Studie protokollet Skaffa Institutional godkännande Review Board och skriftligt informerat samtycke. Välj en lämplig kirurgisk befolkningen för försökets genomförande. Denna metod har endast använts för sår kejsarsnitt men mest kirurgiska sår skulle vara lämpligt. Tänk inkludering och exkludering kriterier för dina studier deltagande. Patienter och förfaranden höga kirurgiska sårinfektion kanske inte är lämpligt. Standardisera anestesi och postoperativ förv…

Representative Results

Med användning av denna metodik har vi kunnat upptäcka alla biokemiska mediatorer anges ovan med undantag av IL-5 i sårexsudat och plasma. 1,2 Några ytterligare cytokiner inte detekterades i plasma (IL-4, IL-17, TNFa, INFy , GM-CSF). 1 Tidsförloppet för uppmätta cytokiner och kemokiner i redovisade studier var konsekvent, når en platå inom de första timmarna som upptas under 24 timmar observationsperioden .. 1,2 ökade dock NGF stadigt under 24-timmars period för insamling, me…

Discussion

Denna metod beskrivs ovan har befunnits vara tillräckligt känsliga för att detektera biokemiska inflammatoriska och nociceptiva mediatorer i sårexsudat. Provtagning vid olika tidpunkter har också gett oss möjlighet att observera förändringar av dessa mediatorer över tiden. 1,2 Vi är inte medvetna om någon annan människa operationssåret analys som seriellt kan mäta frisättningsprofilen av inflammatoriska och nociceptiv mediatorer i kirurgisk sårvätska. Resultat från vår metodik för sårvät…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dr Carvalho arbete stöddes av ett forskningsanslag från Office of forskning om kvinnors hälsa och National Institute of Child Health och Human Development av National Institutes of Health (5K12 HD043452). Dr Angst fick leveranser (On-Q PainBuster Post-op smärtlindring System) och medel (för de biokemiska analyser) från I-Flow (Lake Forest, Kalifornien).

References

  1. Carvalho, B., Clark, D. J., Angst, M. S. Local and Systemic Release of Cytokines, Nerve Growth Factor, Prostaglandin E2, and Substance P in Incisional Wounds and Serum Following Cesarean Delivery. J. Pain. 9, 650-657 (2008).
  2. Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D. C., Angst, M. S. Continuous subcutaneous instillation of bupivacaine compared to saline reduces interleukin 10 and increases substance P in surgical wounds after cesarean delivery. Anesth. Analg. 111, 1452-1459 (2010).
  3. Verri, W. A., Cunha, T. M., Parada, C. A., Poole, S., Cunha, F. Q., Ferreira, S. H. Hypernociceptive role of cytokines and chemokines: targets for analgesic drug development. Pharmacol. Ther. 112, 116-138 (2006).
  4. Watkins, L. R., Maier, S. F. Immune regulation of central nervous system functions: from sickness responses to pathological pain. J. Intern. Med. 257, 139-155 (2005).
  5. Beilin, B., Bessler, H., Mayburd, E., Smirnov, G., Dekel, A., Yardeni, I., Shavit, Y. Effects of preemptive analgesia on pain and cytokine production in the postoperative period. Anesthesiology. 98, 151-155 (2003).
  6. Wu, C. T., Jao, S. W., Borel, C. O., Yeh, C. C., Li, C. Y., Lu, C. H., Wong, C. S. The effect of epidural clonidine on perioperative cytokine response, postoperative pain, and bowel function in patients undergoing colorectal surgery. Anesth. Analg. 99, 502-509 (2004).
  7. Buvanendran, A., Kroin, J. S., Berger, R. A., Hallab, N. J., Saha, C., Negrescu, C., Moric, M., Caicedo, M. S., Tuman, K. J. Upregulation of prostaglandin E2 and interleukins in the central nervous system and peripheral tissue during and after surgery in humans. Anesthesiology. 104, 403-410 (2006).
  8. Kristiansson, M., Soop, M., Sundqvist, K. G., Soop, A., Suontaka, A. M., Blomback, M. Local vs. systemic immune and haemostatic response to hip arthroplasty. Eur. J. Anaesthesiol. 15, 260-270 (1998).
  9. Liu, S. S., Richman, J. M., Thirlby, R. C., Wu, C. L. Efficacy of continuous wound catheters delivering local anesthetic for postoperative analgesia: a quantitative and qualitative systematic review of randomized controlled trials. J. Am. Coll. Surg. 203, 914-932 (2006).
  10. Eriksson, A. S., Sinclair, R., Cassuto, J., Thomsen, P. Influence of lidocaine on leukocyte function in the surgical wound. Anesthesiology. 77, 74-78 (1992).
  11. Clark, J. D., Shi, X., Li, X., Qiao, Y., Liang, D., Angst, M. S., Yeomans, D. C. Morphine reduces local cytokine expression and neutrophil infiltration after incision. Mol. Pain. 3, 28 (2007).
  12. Webb, S. T., Ghosh, S. Intra-articular bupivacaine: potentially chondrotoxic. Br. J. Anaesth. 102, 439-441 (2009).
  13. Scott, N. B. Wound infiltration for surgery. Anaesthesia. 65, 67 (2010).
check_url/50133?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Carvalho, B., Clark, D. J., Yeomans, D., Angst, M. S. Collecting And Measuring Wound Exudate Biochemical Mediators In Surgical Wounds. J. Vis. Exp. (68), e50133, doi:10.3791/50133 (2012).

View Video