Formação de Epithelium próstata humano utilizando Tissue Recombinação de Rodent Urogenital Mesênquima Sinus e células-tronco humanas

Yi Cai; Steven Kregel; Donald J. Vander Griend

doi:10.3791/50327

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Artigo de método

Formação de Epithelium próstata humano utilizando Tissue Recombinação de Rodent Urogenital Mesênquima Sinus e células-tronco humanas

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DOI:

10.3791/50327

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22 de junho de 2013

Yi Cai¹ , Steven Kregel² , Donald J. Vander Griend¹^,²

¹Department of Surgery, Section of Urology, University of Chicago, ²Committee on Cancer Biology, University of Chicago

Neste artigo

Resumo

Para desvendar são desesperadamente necessários os primeiros mecanismos moleculares subjacentes câncer de próstata iniciação, romance e sistemas de modelos humanos e abordagens inovadoras. O potencial de pré-prostática seio urogenital mesênquima (UGSM) para induzir as populações de células estaminais pluripotentes para formar o epitélio da próstata humana é uma ferramenta poderosa na investigação experimental próstata.

Resumo

Avanços na pesquisa sobre o câncer de próstata é severamente limitada pela disponibilidade de sistemas-modelo de origem humana e hormônio-naïve, que limitam a nossa capacidade de compreender os eventos genéticos e moleculares subjacentes próstata iniciação doença. Para o desenvolvimento de melhores sistemas de modelo para o estudo da próstata humana carcinogênese, nós e outros aproveitaram o único potencial indutivo pró-prostática de embriões de roedores próstata estroma, denominado mesênquima do seio urogenital (UGSM). Quando recombinado com certas populações de células, tais como células pluripotentes estaminais embrionárias, UGSM induz a formação de epitélio da próstata humana normal de uma forma dependente da testosterona. Tal sistema modelo humano pode ser utilizado para investigar experimentalmente e testar a capacidade dos candidatos genes de susceptibilidade de cancro da próstata a um ritmo acelerado em comparação com os estudos de roedores transgénicos típicos. Uma vez que as células-tronco embrionárias humanas (hESCs) pode ser geneticamente modificado em cultura using de expressão do gene indutivel ou siRNA knock-down vectores anteriores à recombinação dos tecidos, tal modelo facilita os testes das consequências funcionais de genes ou combinações de genes, que são pensados para promover ou prevenir a carcinogénese.

A técnica de isolamento de populações puras de células UGSM, no entanto, é um desafio e aprendizagem muitas vezes requer a alguém com experiência anterior ensinar pessoalmente. Além disso, a inoculação de misturas de células sob a cápsula renal de um hospedeiro imunocomprometido pode ser tecnicamente desafiadora. Aqui destacamos e ilustrar adequado isolamento de UGSM a partir de embriões de roedores e implantação cápsula renal de misturas de tecidos para formar epitélio da próstata humana. Tal abordagem, em seu estágio atual, requer in vivo xeno de células-tronco embrionárias; aplicações futuras poderiam incluir na formação da glândula vitro ou a utilização de populações de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSCs).

Introdução

Há uma tremenda necessidade de melhores sistemas de modelos humanas de câncer de próstata. Em particular, os sistemas modelo humanos relevantes de tecidos normais da próstata, não malignas que podem ser geneticamente manipulados para discernir directamente o papel de genes específicos no início do cancro da próstata seria extremamente informativo. O advento da era genômica identificou vários genes que podem ter um papel na formação do câncer. A falta de sistemas de modelos experimentais humanos, no entanto, prejudica gravemente a nossa capacidade de testar e caracterizar funcionalmente candidatos genes de susceptibilidade ao câncer de próstata. Um sistema modelo idea....