5/6th Nephrectomy in combinatie met High Salt Dieet en stikstofoxide synthase Remming aan chronische nierziekte induceren in de Lewis rat

Samenvatting

Een tweetraps methode om chronische nierziekte (CKD) in de Lewis rat vast door operatief verwijderen 5/6th van renale massa wordt beschreven. Combinatie van de chirurgische procedure, NOS-remming en een hoge zoutconcentratie dieet leidt tot een model lijkt op menselijke CKD, waardoor studie van causale mechanismen en de ontwikkeling van nieuwe behandelingen.

Samenvatting

Chronische nierziekte (CKD) is een wereldwijd probleem. Vertragen CKD progressie is een belangrijke prioriteit voor de gezondheid. Aangezien CKD wordt gekenmerkt door complexe verstoringen van homeostase, integratieve diermodellen noodzakelijk om ontwikkeling en progressie van CKD bestuderen. Om de ontwikkeling van CKD en nieuwe therapeutische interventies bij CKD bestuderen, gebruiken we de 5/6th nefrectomie ablatie-model, een bekend experimenteel model van progressieve nierziekte, die lijkt op een aantal aspecten van het menselijk CKD. De bruto vermindering van de renale massa veroorzaakt progressieve glomerulaire en tubulo-interstitiële schade, verlies van overblijvende nefronen en de ontwikkeling van systemische en glomerulaire hypertensie. Het is ook geassocieerd met progressieve intrarenaal capillaire verlies, ontsteking en glomerulosclerose. Risicofactoren voor CKD steevast invloed op de endotheelfunctie. Om dit na te bootsen, combineren we het verwijderen van 5/6th van renale massa met stikstofmonoxide (NO) uitputting en een hoog zout dieet. Na aankomst en acclimatisatie, dieren opnieuwontvangstbericht NO synthase remmer (NG-nitro-L-arginine) (L-NNA) aangevuld in drinkwater (20 mg / L) gedurende 4 weken, gevolgd door rechtszijdige uninephrectomy. Een week later, wordt een subtotaal nefrectomie (SNX) uitgevoerd aan de linkerkant. Na SNX, worden dieren toegelaten om te herstellen voor twee dagen, gevolgd door LNNA in drinkwater (20 mg / L) voor een periode van 4 weken. Een hoog zout dieet (6%), aangevuld in de grond chow (zie tijdslijn figuur 1), wordt voortgezet gedurende het experiment. De progressie van nierfalen wordt gevolgd in de tijd door het meten van plasma-ureum, systolische bloeddruk en proteïnurie. Door zes weken na SNX heeft nierfalen ontwikkelde. Nierfunctie wordt gemeten met behulp van 'gouden standaard' inuline en para-amino hippuurzuur (PAH) klaring technologie. Dit model van CKD wordt gekenmerkt door een vermindering van de glomerulaire filtratiesnelheid (GFR) en de effectieve renale plasma flow (ERPF), hypertensie (systolische bloeddruk> 150 mmHg), proteïnurie (> 50 mg/24 uur) En milde uremie (> 10 mM). Histologische kenmerken zijn tubulo-interstitiële schade weerspiegeld door een ontsteking, tubulaire atrofie en fibrose en focale glomerulosclerose leidt tot massale vermindering van gezonde glomeruli binnen de resterende populatie (<10%). Follow-up tot 12 weken na SNX toont verdere progressie van CKD.

Inleiding

Door zijn progressieve aard, voortvloeiende eindstadium nierziekte, en bijbehorende cardiovasculaire morbiditeit en mortaliteit, CKD is een groeiend probleem voor de volksgezondheid ^1. Vertragen CKD progressie is daarom een ​​belangrijke prioriteit voor de gezondheid. Aangezien CKD wordt gekenmerkt door complexe verstoringen van homeostase, integratieve diermodellen noodzakelijk om ontwikkeling en progressie van CKD bestuderen. De nier bestaat uit een groot aantal verschillende celtypen met elkaar. Deze complexiteit kan niet worden nagebootst in vitro.

Om nieuwe therapeutische interventies bestuderen in CKD, gebruiken ....

Protocol

Alle experimenten worden uitgevoerd in overeenstemming met het dier experimentele ethische richtlijnen van de Utrechtse proefdier commissie. Het protocol wordt uitgevoerd onder de leiding en goedkeuring van de auteur instelling dierlijke zorg en gebruik commissie.

CKD wordt geïnduceerd in mannelijke inteelt Lewis ratten (Charles River, Sulzfeld, Duitsland) op de leeftijd van 8 weken. Ratten worden gehuisvest onder standaard omstandigheden in een licht, temperatuur en vochtigheid geregelde omgeving.

1. Operatie Voorbereiding

1. Steriliseren chirurgische instrumenten:
   • 1 student weefsel tang 1-2 ....

Resultaten

Na subtotaal nefrectomie ongeveer 1/6e van de totale nierweefsel overblijft. Figuur 4 toont het gewicht van het verwijderde gedeelte van de rechter nier met gemiddelde en standaardafwijking twee eerdere experimenten. Men moet in gedachten houden dat in de week na UNX, hypertrofie van de linker nier plaatsvindt, blijkt dat het gewicht dat verwijderd moet worden berekend op basis van het gewicht van de rechter nier altijd resulteert in minder dan 5/6th verwijderen. Aangezien het niet mogelijk is het gewic.......

Discussie

Chirurgische verwijdering van 5/6th van nierweefsel in de Lewis rat, gecombineerd met een hoge zoutconcentratie dieet en tijdelijke NOS remming leidt tot een model van CKD dat menselijke CKD lijkt en maakt studie van causale mechanismen en effectiviteit van therapeutische interventies bij CKD.

De 5/6th nefrectomie model is een bekende en uitvoerig beschreven model voor CKD. Echter, simpelweg verwijderen van 5/6th van renale massa niet leiden tot een onmiddellijke nierfalen in alle ratten sta.......

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
			Reagens
L-NNA	Sigma-aldrich	N5501
Spongostan tandheelkundig: gel schuim pads 1x1x1 cm	Johnson&Johnson	Ms0005
Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36	Ethicon	V303H
Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36	Ethicon	V392H
Buprenorfine (0,3 mg/ml)	Via lokale apotheker besteld door Reckitt Benckiser pharmaceuticals	onbekend
			Uitrusting
Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm	Fine Science Tools (FST)	91121-12
Student Standard Pattern Forceps	FST	91100-12
Mayo Schaartjes	FST	14010-15
2X Semken Forceps	FST	11008-13
Student Iris Scissors	FST	91460-11
Olsen-Hegar Needle Holder	FST	12002-14