Novembre 2012: Ce mois-ci dans JoVE

Summary

Dans ce numéro, Oestreicher<em> Et al.</em> Nous montrer comment isoler des bactéries à partir d'échantillons d'eau douce magnétotactiques, et concentrer les bactéries à une extrémité d'un capillaire en verre. Les bactéries magnétotactiques peuvent ensuite être visualisées par microscopie optique et électronique à transmission, et utilisé pour divers autres essais.

Abstract

Dans ce numéro, Oestreicher et al. Nous montrer comment isoler des bactéries à partir d'échantillons d'eau douce magnétotactiques, et concentrer les bactéries à une extrémité d'un capillaire en verre. Les bactéries magnétotactiques peuvent ensuite être visualisées par microscopie optique et électronique à transmission, et utilisé pour divers autres essais.

Toujours dans le numéro de Novembre 2012, Boland et al. Démontrent comment reprogrammer des fibroblastes en cellules souches pluripotentes induites (CISP), et comment isoler les lignes iPSC pour injecter dans des blastocystes tétraploïdes, comme l'a démontré précédemment dans JoVE . Alors que pipetage à la bouche est généralement déconseillée car elle peut avoir des effets néfastes, ce protocole nécessite la technique, exécutée avec soin, pour manipuler les embryons. C'est l'une des rares occasions où c'est en fait sur OK pour pipette dans le laboratoire de la bouche. Si les cellules induites unre pleinement pluripotentes, elles peuvent aboutir à une pleine période souris dérivées complètement iPSCs.

En JoVE Neuroscience, Heermann et Krieglstein démonstration d'une méthode permettant de visualiser le développement des cellules de Schwann le long des axones en croissance. Pour ce faire, nos auteurs explants culture ganglions cervicaux sur des matrices de collagène et traiter les explants avec le facteur de croissance des nerfs ou d'autres substances. Les gels de collagène peuvent ensuite être visualisées à l'aide imagerie time-lapse avec la microscopie à fluorescence ou à champ clair, la migration le long des axones vers la périphérie.

Toujours en JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. Mettre des écouteurs minuscules sur les oiseaux chanteurs d'étudier comment ils utilisent la rétroaction auditive pour régler leur chant. Les auteurs montrent comment construire le casque et les attacher à la tête de l'oiseau, puis en ajustant le signal acoustique, ils peuvent étudier la base de calcul et neurophysiologiques de l'apprentissage vocal chez les oiseaux.

En JoVE clinique& Translational Medicine, Iyengar et al. Utilisent un modèle de tumeur poisson zèbre pour étudier les gènes qui peuvent modifier la pathogenèse du mélanome. Cela se fait en créant d'abord poisson-zèbre transgénique exprimant un gène d'intérêt. Différents essais peuvent alors être effectuées pour étudier comment les différents gènes affectent le mélanome, dont l'atteinte, l'invasion et transplantabilité.

En bio-ingénierie JoVE, Martin et al. Démontrent un essai de vol à voile pour mesurer la rigidité en flexion de biopolymères (tels que les microtubules). En attachant protéines motrices à une lame de microscope, et en ajoutant microtubules marqués par fluorescence, nos auteurs d'analyser les dynamiques de polymères du cytosquelette.

Cet aperçu résume seulement quelques notables vidéo-articles du Novembre 2012 Version de Jupiter. Arrêtez-vous tout au long du mois de Novembre pour vérifier les versions pleine longueur de ces articles et bien d'autres encore.

Protocol

Génération de souris dérivées de cellules souches pluripotentes induites Michael J. Boland 1, Jennifer L. Hazen 1, Kristopher L. Nazor 1, Alberto R. Rodriguez 2, Greg Martin 2, Sergey Kupriyanov 2, Kristin Baldwin 1 K. 1 Dorris Neuroscience Center & Département de biologie cellulaire, The Scripps Research Institute, 2 Facilité de base génétique de la souris, The Scripps Research Institute Génération induites pluripotentes (cellules souches iPSC) lignes produit des lignes de différentes potentiel de développement, même quand ils passent des tests standard pour la pluripotence. Nous décrivons ici un protocole de produire des souris provenant entièrement de iPSCs, qui définit les lignes iPSC comme possédant complet 1 pluripotence. Analyser murinDéveloppement des cellules de Schwann le long des axones en croissance Stephan Heermann 1, 2, Kerstin Krieglstein 1, 3 1 Département d'embryologie moléculaire, Institut d'anatomie et de biologie cellulaire de l'Université de Fribourg, 2 Ministère de la neuroanatomie, Université de Heidelberg, 3 FRIAS, Université de Fribourg Nous décrivons ici une cellule de Schwann (SC) essai de migration dans lequel SC sont en mesure de développer le long des axones s'étendent. Un léger Casque-based System pour manipuler Rétroaction sonore chez les oiseaux chanteurs Lukas A. Hoffmann 1, 2, Conor Kelly W. 1, 3, David A. Nicholson 1, 2, Samuel J. Sober 1 1 Département de biologie, Université Emory, 2 Neuroscience programme d'études supérieures, Université Emory, 3 Program en neuroscience comportementale et biologie, Université Emory Nous présentons la conception et l'assemblage des casques miniaturisés adaptés pour remplacer un oiseau chanteur de rétroaction auditive naturelle avec un signal acoustique manipulé. En ligne de matériel de traitement du son est utilisée pour manipuler la sortie chanson, d'introduire en temps réel des erreurs dans rétroaction auditive via le casque, et conduire l'apprentissage moteur vocal. Dépistage du mélanome Modificateurs l'aide d'un modèle de tumeur Zebrafish Autochtone Sharanya Iyengar 1, Yariv Houvras 2, 3, Craig J. Ceol 1 1 Programme de médecine moléculaire et Département de biologie du cancer à l'Université du Massachusetts Medical School, 2 départements de chirurgie et de médecine, Weill Cornell Medical College, 3 départements de chirurgie et de médecine, New York Presbyterian Hospital <p class = "jove_content"> Un moyen rapide pour le dépistage de modificateurs de mélanome en utilisant un modèle de tumeur poisson zèbre autochtone est présenté. Il tire profit du vecteur miniCoopR qui permet l'expression de gènes candidats de mélanome dans les mélanocytes. Une méthode pour obtenir des courbes de survie sans mélanome, un dosage invasion, un protocole pour la coloration d'anticorps de mélanocytes échelle et un essai de transplantation mélanome sont décrits. Mesures rigidité en flexion des biopolymères en utilisant des essais de vol à voile Douglas S. Martin, Lu Yu, Brian L. Van Hoozen Département de physique, Université Lawrence Procédé pour mesurer la longueur de persistance ou la rigidité en flexion de biopolymères est décrit. La méthode utilise une kinésine axée sur les microtubules glisse test pour déterminer expérimentalement la longueur de persistance des microtubules individuels et est adaptable à l'actine des essais à base de glisse. < / P> Collecte, l'isolement et l'enrichissement des bactéries présentes naturellement magnétotactique de l'Environnement Zachery Oestreicher 1, Steven K. Lower 1, 2, Wei Lin 3, Brian H. Lower 2 1 École des sciences de la Terre, de l'Ohio State University, 2 e École des Ressources naturelles, de l'environnement et de l'Ohio State University, 3 Institut de géologie et de géophysique de l'Académie chinoise des sciences Nous démontrons une méthode pour recueillir les bactéries magnétotactiques Tout Terrain (VTT) qui peuvent être appliquées dans les eaux naturelles. VTT peuvent être isolées et enrichies à partir des échantillons de sédiments à l'aide d'une configuration relativement simple qui tire parti du magnétisme de la bactérie naturelle. VTT isolé peut ensuite être examiné en détail en utilisant à la fois la lumière et la microscopie électronique. 8 "> Souris Transnuclear avec Spécificités T prédéfinis récepteurs cellulaires contre Toxoplasma gondii obtenu par TNCS Oktay Kirak 1, Eva-Maria Frickel 1, Gijsbert M. Grotenbreg 1, 2, Heikyung Suh 1, Rudolf Jaenisch 1, 3, Hidde L. Ploegh 1, 3 1, Whitehead Institute for Biomedical Research, 2 Département de microbiologie et de sciences biologiques, Université nationale de Singapour, 3 Département de biologie, Massachusetts Institute of Technology Nous démontrons ici que la reprogrammation épigénétique par transfert nucléaire de cellules somatiques (SCNT) peut être utilisé comme un outil pour générer des modèles de souris avec pré-défini récepteur des cellules T (TCR) spécificités. Ces souris expriment l'Transnuclear correspondant TCR de leur locus endogène sous le contrôle du promoteur endogène.