November 2012: Diesen Monat in JoVE

Summary

In dieser Ausgabe Oestreicher<em> Et al.</em> Zeigen uns, wie magnetotaktischen Bakterien aus Süßwasser Proben zu isolieren und zu konzentrieren, die Bakterien an einem Ende einer Glaskapillare. Die magnetotaktischen Bakterien können dann durch Licht und Transmissionselektronenmikroskopie sichtbar, und für verschiedene andere Tests.

Abstract

In dieser Ausgabe zeigen Oestreicher et al. Uns, wie man magnetotaktischen Bakterien aus Süßwasser Proben zu isolieren und zu konzentrieren, die Bakterien an einem Ende einer Glaskapillare. Die magnetotaktischen Bakterien können dann durch Licht und Transmissionselektronenmikroskopie sichtbar, und für verschiedene andere Tests.

Auch in der November 2012 Ausgabe zeigen Boland et al., Wie Fibroblasten in induzierte pluripotente Stammzellen (iPS) neu zu programmieren, und wie iPSC Linien für die Injektion in tetraploide Blastozysten, wie zuvor in gezeigt isolieren JoVE . Während Pipettieren mit dem Mund ist generell nicht empfohlen, da es schädliche Wirkungen haben kann, benötigt dieses Protokoll die Technik ausgeführt, sorgfältig, um die Embryonen zu manipulieren. Dies ist einer der seltenen Gelegenheiten, bei denen es eigentlich OK-zu-Mund-Pipette im Labor. Wenn die induzierten Zellen einwieder voll pluripotent, können sie in voller Sicht Mäusen vollständig aus iPS gewonnen führen.

In JoVE Neuroscience, demonstrieren Heermann und Krieglstein ein Verfahren zur Visualisierung von Schwann-Zellen Entwicklung entlang wachsende Axone. Um dies zu tun, behandeln unsere Autoren Kultur Halsganglien Explantate auf Kollagenmatrices und die Explantate mit nerve growth factor oder anderen Stoffen. Die Kollagen-Gele können dann visualisiert werden mit Zeitraffer-Aufnahmen mit Fluoreszenz-oder Hellfeld-Mikroskopie, die Migration auf Axone in Richtung der Peripherie.

Auch in JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. Setzen winzige Kopfhörer auf Singvögel zu studieren, wie sie auditive Rückmeldung zu verwenden, um ihren Gesang anzupassen. Die Autoren zeigen, wie man die Kopfhörer zu konstruieren und sie an den Kopf des Vogels, dann, indem das akustische Signal, können sie die Rechen-und neurophysiologischen Grundlagen der vokalen Lernen bei Vögeln zu studieren.

In JoVE Clinical& Translational Medicine, Iyengar et al. Verwenden Sie einen Zebrafisch-Tumor-Modell auf Gene, die die Pathogenese des malignen Melanoms ändern können studieren. Hierzu wird zunächst die Schaffung transgener Zebrafisch, der ein Gen von Interesse exprimieren getan. Verschiedene Tests können dann durchgeführt, um zu untersuchen, wie verschiedene Gene beeinflussen Melanom, einschließlich Beginn, Invasion und transplantability werden.

In JoVE Bioengineering, demonstrieren Martin et al. Eines Gleitbretts Assay, um die Biegesteifigkeit der Biopolymere (wie Mikrotubuli) zu messen. Durch das Anbringen Motorproteine ​​auf einen Objektträger und das Hinzufügen fluoreszenzmarkierten Mikrotubuli können unsere Autoren analysieren die Dynamik der Zytoskelett-Polymere.

Diese Vorschau fasst nur ein paar bemerkenswerte Video-Artikel in der November 2012 Ausgabe von JoVE. Schauen Sie vorbei im Laufe des Monats November, um einen Blick auf die volle Länge Versionen dieser Artikel und vieles mehr.

Protocol

Generation der Mäuse aus induzierten pluripotenten Stammzellen Michael J. Boland 1, Jennifer L. Hazen 1, Kristopher L. Nazor 1, Alberto R. Rodriguez 2, Greg Martin 2, Sergey Kupriyanov 2, Kristin K. Baldwin 1 1 Dorris Neuroscience Center & Department of Cell Biology, The Scripps Research Institute, 2 Mouse Genetics Core Facility, The Scripps Research Institute Erzeugung induzierten pluripotenten Stammzellen (iPS) Linien produziert Linien unterschiedlicher Entwicklungspotenzial, auch wenn sie Standard-Tests für Pluripotenz passieren. Hier beschreiben wir ein Protokoll, um Mäuse vollständig aus iPS, die die iPSC Linien als Besitz voller Pluripotenz 1 definiert abgeleitet produzieren. Analyse MurineSchwann-Zellen Entwicklung entlang wachsenden Axone Stephan Heermann 1, 2, Kerstin Krieglstein 1, 3 1 Abteilung Molekulare Embryologie, Institut für Anatomie und Zellbiologie, Universität Freiburg, 2 Abteilung für Neuroanatomie, Universität Heidelberg, 3 FRIAS, Universität Freiburg Hier beschreiben wir eine Schwann-Zellen (SC) Migration Assay, in dem SCs sind in der Lage zu entwickeln entlang erstreckt Axone. Ein Leichtes, Kopfhörer-basierte System zur Manipulation Auditory Feedback in Songbirds Lukas A. Hoffmann 1, 2, Conor W. Kelly 1, 3, David A. Nicholson 1, 2, Samuel J. Sober 1 1 Department of Biology, Emory University, 2 Neuroscience Graduate Program, Emory University, 3 Program in Neuroscience and Behavioral Biology, Emory University Wir beschreiben die Konstruktion und Montage von miniaturisierten Kopfhörer für den Ersatz ein Singvogel natürliche akustische Rückmeldung mit einem manipulierten akustisches Signal. Online Sound-Hardware wird verwendet, um Song-Ausgang zu manipulieren, stellen Echtzeit-Fehler in akustische Rückmeldung über den Kopfhörer, und fahren vocal motorisches Lernen. Screening für Melanom Modifiers mit einem Zebrafisch Autochthone Tumormodell Sharanya Iyengar 1, Yariv Houvras 2, 3, Craig J. Ceol 1 1 Programm in Molecular Medicine und Department of Cancer Biology, University of Massachusetts Medical School, 2 Abteilungen für Chirurgie und Medizin, Weill Cornell Medical College, 3 Abteilungen für Chirurgie und Medizin, New York Presbyterian Hospital <p class = "jove_content"> Eine schnelle Weg zum Bildschirm für die Melanom-Modifikatoren mit einem Zebrafisch autochthonen Tumormodell vorgestellt. Es nutzt die miniCoopR Vektor, der zur Expression von Melanom-Kandidat Gene in Melanozyten ermöglicht. Verfahren zur Melanom Überleben Kurven, eine Invasion Assay, ein Protokoll für Antikörperfärbung Maßstab von Melanozyten und Melanomzellen eine Transplantation Assay erhalten werden beschrieben. Biegesteifigkeit Maße von Biopolymeren mit Gliding Assays Douglas S. Martin, Lu Yu, Brian L. Van Hoozen Department of Physics, Lawrence University Ein Verfahren, um die Persistenzlänge oder Biegesteifigkeit von Biopolymeren messen beschrieben. Das Verfahren verwendet eine Kinesin-Mikrotubulus angetriebenen Gleitflug Assay experimentell die Persistenzlänge einzelner Mikrotubuli und ist anpassbar an Aktin-basierten Assays Gleiteigenschaften. < / P> Collection, Isolierung und Anreicherung von natürlich vorkommenden Magnetotaktische Bakterien aus der Umwelt Zachery Oestreicher 1, Steven K. Lower 1, 2, Wei Lin 3, Brian H. Lower 2 1 School of Earth Sciences, The Ohio State University, 2 School of Environment and Natural Resources, The Ohio State University, 3 Institut für Geologie und Geophysik, Chinese Academy of Sciences Wir demonstrieren eine Methode, um magnetotaktischen Bakterien (MTB), die natürlichen Gewässern angewendet werden können sammeln. MTB isoliert und angereichert werden von Sedimentproben mit einem relativ einfachen Setup, das zu Nutze macht die Bakterien die natürlichen Magnetismus. Isolated MTB können anschließend im Detail sowohl mit Licht-und Elektronenmikroskopie untersucht werden. 8 "> Transnuclear Mäuse mit Vordefinierte T Cell Receptor Spezifitäten gegen Toxoplasma gondii Via SCNT Erhalten Oktay Kirak 1, Eva-Maria Frickel 1, Gijsbert M. Grotenbreg 1, 2, Heikyung Suh 1, Rudolf Jaenisch 1, 3, Hidde L. Ploegh 1, 3 1, Whitehead Institute for Biomedical Research, 2 Departments of Microbiology and Biological Sciences, National University of Singapore, 3 Department of Biology, Massachusetts Institute of Technology Wir zeigen hier, dass epigenetische Reprogrammierung via Somatic Cell Nuclear Transfer (SCNT) als Instrument zur Mausmodellen mit vordefinierten T-Zell-Rezeptor (TCR) Besonderheiten erzeugen kann verwendet werden. Diese Mäuse exprimieren Transnuclear den entsprechenden TCR von ihrer endogenen Locus unter der Kontrolle des endogenen Promotors.