2012年11月：JOVEのこの月

Summary

この問題では、Oestreicher<em>ら。</em>淡水サンプルから磁性細菌を分離して、ガラスキャピラリーの一端に細菌を濃縮するためにどのように私たちを示しています。走磁性細菌は、その後、光と透過型電子顕微鏡で可視化すること、および様々な他のアッセイのために使用することができます。

Abstract

この問題では、Oestreicher らは淡水試料から磁性細菌を分離して、ガラスキャピラリーの一端に細菌を濃縮するためにどのように私たちを示しています。走磁性細菌は、その後、光と透過型電子顕微鏡で可視化すること、および様々な他のアッセイのために使用することができます。

また、2012年11月号、ボーランドらインチとして以前に実証人工多能性幹細胞（性IPSC）、そしてどのように四倍体胚盤胞に注入するためのIPSC線を分離するために、中に線維芽細胞を再プログラムする方法を示しJOVE 。口ピペッティングは一般的に推奨されていませんが、それが悪影響を及ぼす可能性がありますので、このプロトコルは、慎重に実行テクニックは、胚を操作する必要があります。これは、実際にラボで口ピペッティング大丈夫まれの一つです。誘導された細胞場合完全に多能性を再、彼らは性IPSCから完全に派生臨月マウスになる可能性があります。

Joveの神経科学、HeermannとKrieglsteinで成長中の軸索に沿ったシュワン細胞の発達を可視化するための方法を示しています。コラーゲンマトリックス上に、この、私たちの作家文化頸神経節の外植片を行い、神経成長因子または他の物質と植体を治療する。コラーゲンゲルは、次に外周に向かって軸索に沿って移行し、蛍光または明視野顕微鏡でタイムラプスイメージングを用いて可視化することができます。

またJoveの神経科学、ホフマンらインチ彼らは歌を調整するために聴覚フィードバックをどのように使用するかを研究するために小鳥に小さなヘッドホンを置く。著者らは、ヘッドフォンを構築し、鳥の頭にそれらを添付する方法を示してから、音響信号を調整することによって、彼らは鳥の発声学習の計算および神経生理学的基礎を学ぶことができます。

Joveの臨床で·トランスレーショナル医学、アイアンガーらは、メラノーマの発症機序を変更することができた遺伝子を研究するためにゼブラフィッシュ腫瘍モデルを使用しています。これは、最初に目的の遺伝子を発現するトランスジェニックゼブラフィッシュを作成することによって行われます。様々なアッセイは、その後どのように異なる遺伝子が発症、浸潤、移植可能性を含む、メラノーマに影響を研究するために行うことができます。

Joveのバイオ、Martin らに生体高分子（例えば、微小管等）の曲げ剛性を測定するために滑空アッセイを実証している。顕微鏡スライドにモータータンパク質を取り付け、蛍光標識した微小管を加えることによって、私達の著者は、細胞骨格の重合体のダイナミクスを分析することができます。

このプレビューはJoveの2012年11月号でちょうど少数の顕著なビデオの記事をまとめたものです。これらの記事と、より多くの完全な長さのバージョンをチェックアウトするために11月の月中に立ち寄る。

Protocol

人工多能性幹細胞に由来するマウスの作製 マイケル·J·ボーランド1、ジェニファー·L·ハーゼン1 kristopherさんL.ナゾル1、アルベルト·R·ロドリゲス2、グレッグ·マーティン2、セルゲイKupriyanov 2、クリスティン·K·ボールドウィン1 細胞生物学の1ドリス神経科学センター＆DEPARTMENT、スクリプス研究所、2マウス遺伝学の中核施設、スクリップス研究所彼らは多能性のための標準的なテストを通過した時、誘導多能性幹細胞（IPSC）ラインを生成することはあっても発生能の異なる行が生成されます。ここでは、完全な1多能性を有するものとしてIPSC行を定義性IPSC、から完全に由来するマウスを作製するためのプロトコルを記述します。 ネズミ分析成長中の軸索に沿ってシュワン細胞の開発 ステファンHeermann 1、2、カースティンKrieglstein 1、3 分子発生学の1部門、解剖学と細胞生物学研究所、フライブルク大学、2神経解剖学専攻、ハイデルベルク大学、3フリアス、フライブルク大学ここでは、SCが伸びる軸索に沿って開発することができますているシュワン細胞（SC）の遊走アッセイを記述します。 鳴禽類には聴覚フィードバックを操作するための軽量、ヘッドフォンベースのシステム ルーカス·A.ホフマン1,2、コナー·W·ケリー1、3、デビッド·A·ニコルソン1、2、1 Soberのサミュエル·J· 生物学の1部門、エモリー大学、2神経科学大学院プログラム、エモリー大学、3プログレ神経科学と行動生物学、エモリー大学のRAM 我々は、操られた音響信号と小鳥の自然聴覚フィードバックを交換するのに適した小型化されたヘッドフォンの設計と組立を説明します。オンライン音声処理ハードウェアは、歌の出力を操作するヘッドフォンを介して聴覚フィードバックにおけるリアルタイムエラーを導入すると、ボーカルの運動学習を駆動するために使用される。 ゼブラ土着腫瘍モデルを用いたメラノーマの修飾のためのスクリーニング Sharanyaアイアンガー1、ヤリーブHouvras 2、3、クレイグ·J. Ceol 1 がん生物学分子医学科の1プログラム、マサチューセッツ大学医学部、外科および医学の2部門、ワイルコーネル医科大学の外科および医学の3部門、ニューヨークプレスビテリアン病院<p classは= "jove_content">ゼブラ土着腫瘍モデルを用いてメラノーマ修飾するための画面への迅速な方法が提示される。これは、メラノサイト内の候補メラノーマの遺伝子の発現を可能にminiCoopRベクトルを利用しています。メラノーマフリー生存曲線、浸潤アッセイ、スケールメラノサイトおよびメラノーマ移植アッセイの抗体染色のためのプロトコルを取得するための方法が記載されている。 グライディングアッセイを用いて生体高分子の曲げ剛性の測定 ダグラス·S·マーティン、陸羽、ブライアン·L·ヴァンHoozen 物理学科、ローレンス大学持続長や生体高分子の曲げ剛性を測定するための方法が記載されている。この方法は、実験的に個々の微小管の持続長を決定するキネシン駆動型微小管滑走アッセイを使用しており、アクチンベース滑空アッセイに適応可能です。< / P> 当然のことながら環境から磁性細菌の発生の収集、分離、濃縮 Zachery Oestreicher 1、スティーブン·K·下限1、2、魏林3、ブライアン·H·下位2 地球科学、オハイオ州立大学、環境·天然資源、オハイオ州立大学、地質学と地球物理学の3研究所、中国科学院の2校の1校我々は、天然水に適用できる磁性細菌（MTB）を収集する方法を示しています。 MTBを単離して、細菌の自然な磁気を利用しています比較的簡単なセットアップを使用して堆積物試料から濃縮することができます。孤立したMTBは、次に光学および電子顕微鏡の両方を用いて詳細に調べることができます。 SCNTを介して得られるトキソプラズマに対する事前定義されたT細胞受容体の特異性を有する8 "> Transnuclearマウス オクタイKirak 1、エヴァ·マリアFrickel 1、Gijsbert M. Grotenbreg 1、2、Heikyungソ1、ルドルフ·イェーニッシュ1、3、Hidde L. Ploegh 1、3 1、生物医学研究のためのWhitehead研究所、微生物学および生物科学の2部門、シンガポール国立大学、生物学、マサチューセッツ工科大学の3学科私たちは、体細胞核移植（SCNT）を介してエピジェネティックなリプログラミングは、あらかじめ定義されたT細胞受容体（TCR）特異性を有するマウスモデルを生成するためのツールと​​して使用することができますことをここに証明する。これらtransnuclearマウスは、内因性プロモーターの制御下にそれらの内因性遺伝子座から対応するTCRを発現。