Gratis væv transfer er almindeligt ansat i rekonstruktionskirurgi at genoprette form og funktion efter onkologisk resektion og traumer. Forkonditionering dette væv før operation kan forbedre resultatet. Denne artikel beskriver en<em> In situ</em> Tværgående rectus abdominis myocutaneous flap (sporvogn) i rotter som et middel til at teste konditioneringsmetoder strategier.
Gratis væv overførslen er guldstandarden rekonstruktiv kirurgi til at reparere komplekse fejl ikke gøres til genstand for lokale indstillinger eller dem, der kræver sammensatte væv. Iskæmisk reperfusionsbeskadigelse (IRI) er en kendt årsag til delvis fri klap fiasko og har ingen effektiv behandling. Etablering af en laboratoriemodel denne skade kan vise sig dyrt både økonomisk som større pattedyr konventionelt anvendes og i den nødvendige ekspertise ved tekniske problemer med disse procedurer kræver typisk ansætte en erfaren microsurgeon. Denne publikation og video demonstrere effektiv brug af en model af IRI i rotter, som ikke kræver microsurgical ekspertise. Denne procedure er en in situ-model af en tværgående abdominis myocutaneous (sporvogn) flappen, hvor atraumatisk klemmer anvendes til at gengive den iskæmi-reperfusionsskade forbundet med denne operation. En laser Doppler Imaging (LDI) scanner er ansat til at vurdere flap perfusion og billedbehandling software, Image J at vurdere procentdelen område skin overlevelse som en primær effektmål for skade.
Målet med denne protokol er at demonstrere en pålidelig og reproducerbar model af iskæmi-reperfusionsskade observeret i frit væv transfer at sætte interventionelle strategier, der skal undersøges.
Gratis væv transfer defineres som den vaskulære frigørelse af en isoleret blok af vævet efterfulgt af autolog transplantation af dette væv med anastomose af flappen er transected fartøjer til indfødte fartøjer på modtagerens sted. Proceduren er kendt som FTT og vævet overføres benævnt fri klap.
Gratis væv overførslen er guldstandarden tilgang til korrektion af komplekse, sammensatte defekter, hvor de lokale muligheder er uegnede eller ikke foreligger. 1-4 Ischemia reperfusionsskade (IRI), er uundgåelig i fri væv transfer, bidrager til at baske fiasko 5,6 og har ingen effektiv behandling. Den valgfrie karakter af fri klap operationer tillader administration af farmacal agenter til forudsætning mod IRI.
IRI resulterer i nedsat flow gennem mikrocirkulationen ved endotel aktivering og metabolisk dysfunktion, 7 øget kapillær permeabilitet og efterfølgende interstitiel ødem 7, tilstrømning af inflammatoriske celler, 8 frigivelse af inflammatoriske mediatorer, reaktive ilt arter 9 og komplement deposition. 10. Denne komplekse proces med hypoxi og efterfølgende reperfusionsskade sidste ende fører til celledød. En model af myocutaneous IRI giver effektiviteten forkonditioneringscyklusser strategier for kliniske resultater skal vurderes. Nyere arbejde har valideret brugen af dyremodeller for IRI undersøgelser som et surrogat for human IRI ved at sammenligne de molekylære ændringer observerede i de humane fag og eksisterende data fra dyreforsøg. 10,11
Rotten tværgående rectus abdominis myocutaneous (sporvogn) flap blev første gang beskrevet i 1987 i tysk 12 og i 199313 på engelsk. Denne model vundet bred popularitet 13-25 som en billig, robust model til at undersøge forskellige strategier til at reducere IRI forbundet med fri væv overførsel. 14,17-22 De fleste af disse undersøgelser blev udformet som unipedicled TRAM klapper baseret på den dybe, ringere, . epigastriske vaskulær stilken 15-18,20-22 Sammenligning af dataene fra disse undersøgelser kompliceres af brugen af forskellige størrelser kutane øer (10,5-30 cm 2) og forskellige længder af postoperativ opfølgning (2 – 10 dage). Den gennemsnitlige samlede procentvise areal flap nekrose i kontrolgruppen af disse undersøgelser er 69 ± 6,2% (gennemsnit ± SEM). Det skal bemærkes, at disse seks papirer alle ansætte rectus abdominis muskel som bærer for det vaskulære stilken, men ikke afsløre, dividere og microanastomose eller klemme skibene. Zhang et al. 23. har beskrevet en sand, gratis rotte TRAM flap baseret på de overlegne epigastriske beholdere, hvor fomgange blev hævet, skibe delt, og myocutaneous flap overført og microanastomosed til lysken fartøjer. Denne vanskelige teknik krævede microanastomosis af 0,45-0,5 mm kaliber fartøjer. Kun femten blev udført, og af disse 67% overlevede. 23. Modellen er beskrevet af Zhang et al. 23 er en fremragende model for menneskets frie TRAM flap, da det virkelig afspejler den skade afholdt i FTT. De øvrige offentliggjorte modeller af en rotte TRAM flap mere præcist afspejler de skader afholdt under et menneske pedicled TRAM, men ikke præcist afspejler IRI, da disse klap i ikke undergår en iskæmisk periode efterfulgt af reperfusion som den vaskulære stilken aldrig klemmes eller deles, og microanastomosis udføres. Denne protokol og video beskriver en ny model af gratis væv transfer med rotten TRAM hvor IRI replikeres ved hjælp microclamps. Denne mere trofast replikerer IRI end stilken TRAM forgængere, men er teknisk lettere end performing microanastomosis. Microclamps er blevet bredt anvendt ved transplantation forskere at genskabe IRI associeret med organtransplantation, 26-33 men dette er første gang, det er blevet beskrevet i rotter sporvogn klap.
Ændringer og fejlfinding
Protokollen præsenteres her gengiver IRI set i fri væv overførsel i et eksperimentelt system, der gør det muligt yderligere forståelse af denne proces og tilvejebringer et middel til at undersøge midler til lindring IRI og forbedre resultatet. Dette kunne let ændres til at producere en mere alvorlig skade, hvis den var baseret på den ikke-dominerende, dybt, ringere epigastriske stilken eller hvis øget iskæmisk tid var.
Begrænsninger…
The authors have nothing to disclose.
Dette arbejde blev finansieret af Medical Research Council tilskud G1000299.
Den tilsvarende forfatter vil gerne takke Gary Borthwick, University of Edinburgh, for at bistå under operationen.
Forfatterne vil gerne anerkende rådgivning fra Helen Douglas og Iain Mackay og tillader os at observere deres Deep Ringere Epigastriske (Diep) flap procedure (Canniesburn Plastic Surgery Unit, Glasgow Royal Infirmary, 84 Castle Street, Glasgow G4 0SF, UK).
Forfatterne vil også gerne takke Gary Blackie på universitetet i Edinburgh for hans hjælp i at producere videoen for denne artikel.
Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
Moor LD12 laser doppler imaging scanner | http://gb.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 | ||
Complete homeothermic blanket system with flexible probe. Small. 230 VAC, 50 Hz | 507221F | www.harvardapparatus.com | |
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved | 11052-10 | 2, http://www.finescience.de | |
Acland clamps | 00398 V | B-1 ‘V’ pattern clamps used on both artery and vein. http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf | |
Clamp applicator | CAF-4 | http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf | |
Gemini cautery unit | 726067 | www.harvardapparatus.com | |
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 | D-5a.2 | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 | JFA-5b | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 | JF-5 | http://www.merciansurgical.com | |
Acland Single Clamps B-1V (Pair) | 396 | http://www.merciansurgical.com | |
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight | 67 | http://www.merciansurgical.com | |
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT | EA7613-11 | http://www.merciansurgical.com | |
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT | EA7652-14 | http://www.merciansurgical.com | |
Derf Needle Holders 12 cm TC | 703DE12 | http://www.merciansurgical.com | |
Ethilon 5-0 | W1618 | http://www.farlamedical.co.uk/ | |
Vicryl rapide 6-0 | W9913 | http://www.millermedicalsupplies.com/ | |
Instrapac – Adson Toothed Forceps (Extra Fine) | 7973 | http://www.millermedicalsupplies.com/ | |
Castroviejo needle holders | 12565-14 | http://s-and-t.ne | |
Heat Lamp | http://www.chicken-house.co.uk | ||
Silicone sheeting 0.3 mm translucent | http://www.silex.co.uk/ | ||
Image J software | http://rsbweb.nih.gov/ij/ | ||
Zeiss OPMI pico | http://www.zeiss.co.uk/ | ||
Operating microscope | |||
Vet tech solution isofluorane rig | http://www.vet-tech.co.uk/ | ||
Vet tech solution isofluorane rig | http://www.vet-tech.co.uk/ |