Gevasculariseerde Composite Allotransplantations (VCA) hebben een klinische realiteit. Echter, brede klinische toepassing van VCA beperkt door chronische multi-drug immunosuppressie. De auteurs presenteren een betrouwbare en reproduceerbare grote diermodel om immunomodulerende strategieën die kunnen minimaliseren of potentieel elimineren de noodzaak van immunosuppressie in VCA vertalen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een Gemodificeerde Heterotope Varkens Hind Limb Transplant Model for Translational Gevasculariseerd Composite allotransplantatie (VCA) Onderzoek
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Gevasculariseerde Composite allotransplantatie (VCA) zoals met de hand en het gezicht transplantaties vormen een levensvatbare behandelingsoptie voor complexe trauma van het bewegingsapparaat en verwoestende weefsel verlies. Ondanks de gunstige en zeer bemoedigend begin en intermediaire functionele resultaten, afwijzing van de sterk immunogeen huid component van een VCA en de potentiële schadelijke effecten van chronische multi-drug immunosuppressie steeds op grote schaal klinische toepassing van VCA belemmeren. Daarom onderzoek op dit nieuwe gebied moet richten op translationeel studies betreffende unieke immunologische kenmerken van VCA en immunomodulerende strategieën voor immunomodulatie en tolerantie-inductie na VCA zonder dat langdurige immunosuppressie ontwikkelen.
Dit artikel beschrijft een betrouwbare en reproduceerbare translationele grote diermodel van VCA die bestaat uit een osteomyocutaneous flap in een MHC-gedefinieerde varkens heterotope achterpoot allotransplantatie. BrieFly, is een goed gevasculariseerd huid peddel die in de anteromedial dij regio met behulp van nabij-infrarood laser angiografie. De onderliggende spieren, kniegewricht, distale femur en proximale tibia worden geoogst op een femorale vaatsteel. Dit allotransplantaat kan worden beschouwd als zowel een VCA en een gevasculariseerde beenmergtransplantatie met zijn unieke immuun bevoorrechte functies. De ent wordt getransplanteerd naar een subcutane abdominale zak in het ontvangende dier met een component huid exteriorized de dorsolaterale regio voor immune monitoring.
Drie chirurgische teams gelijktijdig werken in een goed gecoördineerde wijze anesthesie en ischemie te verkorten, waardoor de efficiëntie van dit model te verbeteren en het verminderen van potentiële confounders in experimentele protocollen. Dit model dient als basis voor toekomstige therapeutische strategieën gericht op het verminderen en mogelijk elimineren van de noodzaak voor chronische multi-drug immunosuppressie in VCA.
Inleiding
Gevasculariseerde Composite allotransplantatie (VCA) zoals met de hand en het gezicht transplantaties zijn nu een klinische realiteit met tal van hand en gezicht transplantaties wereldwijd 12 uitgevoerd. Hoewel vroege en tussenresultaten gunstig en zeer bemoedigend 2, de eis van chronische multidrug immunosuppressie blijft de brede klinische toepassing beperken. De vooruitgang in muismodellen van VCA inclusief super-microchirurgische anastomosen en nonsuture manchet technieken 13, hebben 3 de weg naar een beter begrip van allo-immune reacties in VCA verhard. Myriaden van immunomodulerende protocollen zijn voorgesteld voor k....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
In deze video publicatie, werden alle dierlijke procedures uitgevoerd in overeenstemming met een dier protocol door de Johns Hopkins University Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC) goedgekeurd.
1. Preoperatieve planning
- Wij maken gebruik van MHC-gedefinieerde MGH inbred miniatuur varkens (15-20 kg) in onze translationeel onderzoek voor ledemaat allotransplantatie waarin een mannelijke donor biedt ledematen voor twee vrouwelijke ontvangers (figuur 1). Voorafgaand aan chirurgie, donor en ontvanger dieren worden grondige klinische evaluatie door een dierenarts.
- Om anesthesie en ischemie te....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Vierentwintig SLA-gedefinieerde varkens heterotopische achterste ledematen transplantaties werden uitgevoerd met behulp van onze aangepaste techniek met een gemiddelde ischemie tijd van 78 min (bereik: 62-94 minuten). Graft inzet en dorsolaterale huid paddle positionering werden bereikt zonder moeite in alle dieren. Nabij infrarood laser angiografie toonde uitstekende graft perfusie bij alle ontvangers. De eerste twaalf veneuze anastomosen werden uitgevoerd met behulp van conventionele hechtdraad technieken terwijl de l.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Historisch gezien is de heterotopische achterste ledematen transplantatie protocol opgenomen uittreding van een huid peddel om de ventrale buikwand en de schepen werden geanastomoseerd in een end-to-side wijze (Hettiarachty 2004). In onze gewijzigde methode, een omgekeerde flap insetting en end-to-end anastomose brengen de huid peddel meer lateraal en dus vergemakkelijkt immuun controle in een staande positie van het dier. De identificatie van de sural slagader en de zones van de maximale perfusie met nabije infrarood l.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen.
Dankbetuigingen
We willen graag de volgende personen voor hun bijdrage aan dit project luidt: Kakali Sarkar, PhD, Joani Christensen, BS, Kate Buretta, BS, Nance Yuan, BS, William Lehao, MD, Johanna Grahammer, Georg Furtmüller, MD, Erin Rada MD, Mohammed Al-Rakan MD, Karim Sarhane MD, Saami Khalifian, BS, Mao Qi, MD, en Angelo Leto Barone MD, VCA Laboratorium, Afdeling Plastische en Reconstructieve Chirurgie, Johns Hopkins University School of Medicine, Janis Taube, MD, Mark Fischer, MD, afdelingen Dermatologie en Pathologie, Johns Hopkins University School of Medicine, Sue Eller, Minimaal Invasieve Chirurgie Training Center, Johns Hopkins University School of Medicine en Cheng-Hung ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| REAGENTS | |||
| HTK | Custodial | N/A | |
| EQUIPMENT | |||
| Electric Pen Drive | Synthes, Westchester PA | 05.001.011 | Reciprocating saw |
| Vascular Coupling device | Synovis, Newtown PA | 21003B |
Referenties
- Barth, R. N., Rodriguez, E. D., Mundinger, G. S., et al. Vascularized bone marrow-based immunosuppression inhibits rejection of vascularized composite allografts in nonhuman primates. Am. J. Transplant. 11 (7), 1407-1416 (2011).
- Brandacher, G., Gorantla, V. S., Schneeberger, S., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
