Неинвазивная Интратрахеального интубации по изучению физиологии и патологии мыши легких
Summary
Использование модели, которая имитирует состояние легочных заболеваний у человека является критическим для изучения патофизиологии и / или этиологию конкретного заболевания и для разработки терапевтического вмешательства. Здесь неинвазивный интратрахеального метод интубации, которые могут непосредственно доставить экзогенные материалы легких мышей представлена.
Abstract
Использование модели, которая имитирует состояние легочных заболеваний у человека является критическим для изучения патофизиологии и / или этиологию конкретного заболевания и для разработки терапевтического вмешательства. С ростом доступности нокаутом и трансгенных производных, вместе с огромным количеством генетической информации, мыши обеспечивают один из лучших моделей для изучения молекулярных механизмов, лежащих в основе патологии и физиологии заболеваний легких. Вдыхание, интраназально закапывания, введение в трахею, и интратрахеального интубации являются наиболее широко используемыми методы по ряду исследователей управляют материалы, представляющие интерес для легких мышей. Есть плюсы и минусы для каждого метода в зависимости от целей исследования. Здесь неинвазивный интратрахеального метод интубации, которые могут непосредственно доставить экзогенные материалы легких мышей представлена. Этот метод был применен для администрирования блеомицин в легких мышей в качестве модели для изучения легочного фиброза. </ Р>
Introduction
Легких является органом, где многие разрушительные болезни, как правило, диагностируется. Среди них, рак легких является второй наиболее диагноз рака у мужчин и женщин, и наиболее распространенной причиной смерти от рака. Хроническая обструктивная болезнь легких, также известный как эмфизема и хронический бронхит, является очень серьезным заболеванием и является третьей основной причиной смертности в Соединенных Штатах. В 2011 году было подсчитано, что 25900 тысяч американцев была астма, в том числе 7,1 млн. детей в возрасте до 18 лет. Астма является третьей ведущей причиной госпитализации среди детей в возрасте до 15 (Американской легочной ассоциации, http://www.lung.org ). С целью изучения патофизиологии и / или этиологию этих разрушительных заболеваний и их основных механизмов, использование точных моделей имеет решающее значение в сочетании с удобной и неинвазивной введения различных материалов, представляющих интерес для легкого. Мыши предоставить один из лучших моделей дляизучить молекулярные механизмы, лежащие в основе патологии и физиологии легочных заболеваний из-за растущей доступности нокаутом и трансгенных мышей и огромного количества доступных генетической информации.
Различные методы были использованы рядом исследователей в различных условиях для доставки материалов, представляющих интерес для легких мышей, в том числе ингаляции, интраназально закапывания, введение в трахею, и интратрахеального интубации 1-4. Последняя процедура не использовалась регулярно, потому что это считается довольно трудно выполнить. Интратрахеального интубация описано здесь является неинвазивным, простой и быстрый способ доставить материалы, представляющие интерес для легких мышей, чтобы изучить эффект поставляемых материалов на паттернов экспрессии генов, патологии и / или физиологии легких 5. Эта техника обеспечивает доставку экзогенных материалов к целому легких и не связаны с какой-либо операции выживания и тем самым будет likelу утверждаются любых организационных уходу и использованию животных комитетов.
Protocol
Representative Results
Discussion
Интратрахеального интубация, описанный здесь, простой, но отлично неинвазивный метод, чтобы равномерно поставка материалов, представляющих интерес для мыши легких. Этот метод позволяет исследовать влияние и / или роли материала вводят по физиологии и / или патологии легких. Материалы ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана исследовательской программы Интрамурального Национального института рака, Центр по исследованию рака.
Materials
| KetaVed | Vedco | Ketamine | |
| AnaSed Injection 20 mg | LLOYD | Xylazine | |
| BioLite Stand | Braintree Scientific | RIS100 | For mice |
| BioLite Intubation Illumination System | Braintree Scientific | BIO MI-KIT | For mice |
| 22 G, 1 inch i.v. catheter | Terumo | SR-OX2225CA | For mice below 30 g. Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used. |
| or | |||
| 20 G, 1 inch i.v. catheter | Terumo | SR-OX2025CA | For mice over 30 g. Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used. |
| Catheter is used only for the case where the Intubation Illumination System is not used |
References
- Das, S., Macdonald, K., Chang, H. Y., Mitzner, W. A simple method of mouse lung intubation. J. Vis. Exp. (73), e50318 (2013).
- Miller, M. A., et al. Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis: effect of instillation volume and form of anesthesia. PLoS One. 7, e31359 (2012).
- Rayamajhi, M., Redente, E. F., Condon, T. V., Gonzalez-Juarrero, M., Riches, D. W., Lenz, L. L. Non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry. J. Vis. Exp. (51), e2702 (2011).
- Riesenfeld, E. P., et al. Inhaled salmeterol and/or fluticasone alters structure/function in a murine model of allergic airways disease. Respir. Res. 11, 22 (2010).
- Rivera, B., Miller, S., Brown, E., Price, R. A novel method for endotracheal intubation of mice and rats used in imaging studies. Contemp. Top. Lab Anim. Sci. 44, 52-55 (2005).
- Bonniaud, P., et al. Progressive transforming growth factor beta1-induced lung fibrosis is blocked by an orally active ALK5 kinase inhibitor. Am. J. Res. Crit. Care Med. 171, 889-898 (2005).
- Bivas-Benita, M., Zwier, R., Junginger, H. E., Borchard, G. Non-invasive pulmonary aerosol delivery in mice by the endotracheal route. Eur. J. Pharm. Biopharm. 61, 214-218 (2005).
- Haegens, A., et al. Myeloperoxidase deficiency attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung inflammation and subsequent cytokine and chemokine production. J. Immunol. 182, 7990-7996 (2009).
- Jackson, P., et al. Exposure of pregnant mice to carbon black by intratracheal instillation: toxicogenomic effects in dams and offspring. Mutat. Res. 745, 73-83 (2012).
- Bodewes, R., et al. Pathogenesis of Influenza A/H5N1 virus infection in ferrets differs between intranasal and intratracheal routes of inoculation. Am. J. Pathol. 179, 30-36 (2011).
- Winslow, M. M., et al. Suppression of lung adenocarcinoma progression by Nkx2-1. Nature. 473, 101-104 (2011).
