التقوية طويلة الأمد من المسار الثاقب-التلفيف المسنن سنبس في يتصرفون بحرية الفئران
Summary
المعدلة وراثيا وخروج المغلوب نماذج الماوس من الأمراض العصبية هي مفيدة لدراسة دور الجينات في الفسيولوجيا العصبية العادية وغير العادية. يصف هذا المقال المنهجيات التي يمكن استخدامها لدراسة التقوية طويلة الأمد، وهي آلية الخلوية التي قد تكمن وراء التعلم والذاكرة، وبالضربة القاضية في المعدلة وراثيا بحرية التصرف نماذج الماوس من أمراض الأعصاب.
Abstract
دراسات التقوية على المدى الطويل من فعالية متشابك، ظاهرة تعتمد على النشاط متشابك وجود الخصائص التي تجعلها جذابة كآلية الخلوية الكامنة التعلم وتخزين المعلومات المحتملة، منذ فترة طويلة تستخدم لتوضيح علم وظائف الأعضاء من مختلف الدوائر العصبية في الحصين، اللوزة ، والهياكل الحوفي والقشرية الأخرى. مع هذا في الاعتبار، ونماذج الماوس المعدلة وراثيا من الأمراض العصبية تمثل منصات المفيد إجراء التقوية على المدى الطويل (الكمونية) دراسات لتطوير فهم أكبر لدور الجينات في الاتصالات متشابك العادية وغير العادية في الشبكات العصبية المشاركة في التعلم، والعاطفة والمعلومات المعالجة. يصف هذا المقال منهجيات لإحداث موثوق الكمونية في الماوس يتصرف بحرية. هذه المنهجيات يمكن استخدامها في دراسات المعدلة وراثيا وخروج المغلوب يتصرف نماذج الماوس من أمراض الاعصاب بحرية.
Introduction
وقد أنتجت تطوير تكنولوجيا الجينات المعدلة وراثيا لمعالجة وخروج المغلوب نماذج الماوس من الأمراض العصبية والعصبية تقريبا. وقد استلزم هذه الترجمة من تقنيات البحث الكهربية المستخدمة سابقا في أنواع القوارض أكبر للنموذج حيواني الماوس. واحدة من هذه التقنية التحقيق العصبية هو استخدام التقوية على المدى الطويل (الكمونية) لاختبار فعالية الاتصالات متشابك داخل الشبكات العصبية المعنية في مختلف اضطرابات عصبية مرضية. يصف هذا البروتوكول تقنيات التحقيق الكهربية يمكن الاعتماد عليها من الكمونية في الفئران يتصرف بحرية. ميزة هذا البروتوكول على الآخرين هو أنه بسيطة وسهلة التنفيذ، بل هو أيضا بدلا أقل تكلفة كما أنها لا تتطلب ولا استخدام نظم مكلفة ميكرودريفي الكمبيوتر التي تسيطر عليها ولا تأثير الحقل headstages الترانزستور، و، على حد علمنا، هو البروتوكول الأول من الفيديو المزمنة التسجيلات الكهربية رس دراسة الكمونية في الفئران يتصرف بحرية. تحقيقا لهذه الغاية، وصفنا في هذه المقالة منهجيات بسيطة لدراسة التقوية على المدى الطويل في الفئران يتصرف بحرية. يمكن بسهولة أن تترجم هذه المنهجيات لنماذج الماوس المعدلة وراثيا وخروج المغلوب من اضطرابات عصبية مرضية.
Protocol
Representative Results
Discussion
في هذا البروتوكول، ونحن أثبتت طريقة موثوقة وبسيطة لدراسة الكمونية في DG في الفئران يتصرف بحرية. في حين أن العديد من الدراسات الكمونية في الفئران مستيقظا وقد أجريت 3،4، وقد أجريت في عدد قليل جدا من الفئران مستيقظا يرجع أساسا إلى التعقيد التقني الذي يشكله العقارات…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب نود أن نعترف بما يلي: الدكتور جوزيف برونزينو، والدكتور خميس أبو حسب الله، والسيد RJ-افرانس أوستن، والسيدة جيسيكا Koranda.
Materials
| Ketamine (100 mg/ml) | Henry Schein | 10177 | |
| Xylazine (20 mg/ml) | Henry Schein | 33197 | |
| Acepromazine (10 mg/ml) | Henry Schein | 2177 | |
| Dental acrylic powder | Lang Dental Manufacturing Co. | 1330CLR | |
| Dental acrylic liquid | Lang Dental Manufacturing Co. | 1306CLR | |
| Tungsten wire (0.127 mm) | World Precision Instruments | TGW0515 | |
| Stainless Steel Hypodermic Tubing (0.286 mm) | World Precision Instruments | 832400 | |
| Flunixin (50 mg/ml) | Henry Schein | 14165 | |
| Epoxilyte | Superior Essex | EP 6001-M | |
| Stainless steel wire insert (0.2 mm) | World Precision Instruments | 792900 | |
| Stereotaxic frame apparatus | Kopf Instruments | Model 902 | |
| Ear cuffs (ear cups) | Kopf Instruments | Model 921 | |
| Electrophysiological stimulator | Astro-Med, Inc. | S88 | |
| Digital oscilloscope | B & K Precision Corp. | 2542 | |
| Current isolation unit | Astro-Med, Inc. | PSIU-6 | |
| Differential amplifier | World Precision Instruments, Inc. | DAM-50 | |
| Commutator | Plastics One | SLC6 | |
| Dental drill | Stoelting | 58650 |
References
- Paxinos, G., Franklin, K. B. J. . The mouse brain in stereotaxic coordinates. , (2004).
- Bliss, T. V. P., Lomo, T. Long-lasting potentiation of synaptic transmission in the dentate area of the anesthetized rabbit following stimulation of the perforant path. J. Physiol. 232, 331-356 (1973).
- Blaise, J. H., Bronzino, J. D. Effects of stimulus frequency and age on bidirectional synaptic plasticity in the dentate gyrus of freely moving rats. Exp. Neurol. 182, 497-506 (2003).
- Blaise, J. H., Koranda, J. L., Chow, U., Haines, K. E., Dorward, E. C. Neonatal isolation stress alters bidirectional long-term synaptic plasticity in amygdalo-hippocampal synapses in freely behaving adult rats. Brain Res. 1193, 25-33 (2008).
- Koranda, J. L., Masino, S. A., Blaise, J. H. Bidirectional synaptic plasticity in the dentate gyrus of the awake freely behaving mouse. J. Neurosci. Methods. 167, 160-166 (2008).
- Cooke, S. F., et al. Autophosphorylation of alphaCaMKII is not a general requirement for NMDA receptor-dependent LTP in the adult mouse. J. Physiol. 574, 805-818 (2006).
- Davis, S., Bliss, T. V., Dutrieux, G., Laroche, S., Errington, M. L. Induction and duration of long-term potentiation in the hippocampus of the freely moving mouse. J. Neurosci. Methods. 75, 75-80 (1997).
- Jones, M. W., Peckham, H. M., Errington, M. L., Bliss, T. V., Routtenberg, A. Synaptic plasticity in the hippocampus of awake C57BL/6 and DBA/2 mice: interstrain differences and parallels with behavior. Hippocampus. 11, 391-396 (2001).
- Zhang, T. A., Tang, J., Pidoplichko, V. I., Dani, J. A. Addictive nicotine alters local circuit inhibition during the induction of in vivo hippocampal synaptic potentiation. J. Neurosci. 30, 6443-6453 (2010).
- Tang, J., Dani, J. A. Dopamine enables in vivo synaptic plasticity associated with the addictive drug nicotine. Neuron. 63, 673-682 (2009).
