Gavagingアダルトゼブラフィッシュ
Summary
動物モデルとしてゼブラフィッシュの使用の増加は、化合物および溶液の既知量を送達するための効果的な方法の開発が必要である。後述の強制経口投与手順は成人ゼブラフィッシュに安全かつ効率的に、確実に、溶液の正確なボリュームの経口送達を可能にします。
Abstract
ゼブラフィッシュは、生物医学研究におけるin vivoモデルにおいて重要になってきている。効果的な方法が開発され、科学研究のため溶液中の化合物または薬剤を送達するために利用されなければならない。成体ゼブラフィッシュに経口化合物を投与するための現在の方法は、魚によって自発的消費の変動に起因する不正確である。強制経口投与手順は生物医学研究における研究のためにゼブラフィッシュに感染性病原体の正確な量を提供するために開発されました。生後6ヶ月以上の大人のゼブラフィッシュは、MS-222のバッファとカット22-G針先端に取り付け柔軟なカテーテル注入チューブを使用して溶液5μlと強制経口投与の150 mg / Lでで麻酔した。チューブの先端が鰓（約1cm）を越えて延長されるまで、可撓性チューブは、ゼブラフィッシュの口腔内に低下した。溶液をゆっくり腸管に注入した。この方法では、魚は無事回復と、時間の88％に有効であった。この一人が1時間で20〜30魚を強制経口投与することができますように手順も効率的です。この方法は、正確に成体ゼブラフィッシュにおける感染症研究、又は他の化合物の研究のための薬剤を投与するために使用することができる。
Introduction
ゼブラフィッシュに経口化合物を投与するための現在の方法は、塩水エビ2、脂質カプセルダイエット3と混合し、ワックススプレービーズ4へとグルテンベースの食事経由bioencapsulatedゼラチンダイエット1に混入飼料、、上にトップコートした管理の化合物が挙げられる。5制限経口投与したこれらの方法は、個々の魚によって高い浸出率と不完全または予測不可能な化合物の消費量が含まれています。感染症研究で、魚に投与感染量は研究の成功のために重要かもしれない知っているので、これらの変数は、問題がある。また、前作では水浴で投与特定の化合物が研究下にあってもよい腸の効果が発生する前にエラをゼブラフィッシュに有毒な病変を引き起こすことが示されている。6
胃管栄養法は、AKを生成物の正確な量を投与するために他の実験動物種で使用される標準的な方法である医学と薬学研究における研究のためノウン濃度。ごく最近の文献に記載されてgavagingゼブラフィッシュのためのメソッドを持っています。記載の技術は、一つの溶液5μlを提供するために2-20μlのピペットに取り付けられた24-Gカテーテルシースを使用して二人方法である。7方法は、上記の第一及び第二の上の8.7％と39％の死亡率であったそれぞれ裁判;死亡のほとんどは妊娠女性に起因するものであった。第二強制飼養技術はメダカ（ メダカ ）の溶液5μlを管理する鈍い先端が強制経口注射器を使って説明した。死亡で8情報が提供されなかったし、強制経口投与を行うの厳密なプロセスが記載されていません。アニマルケアカナダ評議会と研究所ゼブラフィッシュによると、魚の体重の1％までは、胃管を介して投与することができる。9,10私たちの目標は、COMの正確なボリュームを提供するの再現、安全かつ効率的な方法を開発することでしたポンド経口両性の成体ゼブラフィッシュへと再生のすべての段階である。この手順は、化合物の正確な経口投与が必要とされる任意の研究のために適用可能である。
Protocol
Representative Results
Discussion
意義
この手法は改善で大人ゼブラフィッシュをgavagingするための2つの前述の技術上のいくつかの利点を提供する。まず、魚を抑制するためにスポンジを使用すると、2人を必要とする前に説明した手法とは対照的に、一人が、手順を実行することができます。7番目は、カテーテル注入チューブが原因で二次的な外傷を最小限に抑えることができ、IVカテーテルよりも…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ロックフェラー大学比較バイオサイエンスセンターでは、このプロジェクトのためのサポートを提供した。我々は技術支援のためのジャのMonnasに感謝。
Materials
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
| pH meter | Hanna probe | ||
| 1 scalpel blade | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
References
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