Summary

変更されたカフ法を用いたマウス子宮頸心臓移植モデル

Published: October 12, 2014
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Summary

マウスの子宮頸心臓移植モデルは、免疫学的ならびに虚血再灌流障害の研究によく適している。私たちは、非縫合カフ技術を使用して手順を変更し、このアプローチに1,000以上の成功移植を行った。

ここで、私たちはビデオを補足するためにこの技術のさらなる詳細を提供する。

Abstract

マウスモデルは、モノクローナル抗体の多種多様なため、研究に特別な関心のものであり、商業的に近交系定義され、ノックアウト株は、 インビボ研究の機構を実行するために利用可能である。縫合技術を用いた心臓移植モデルは最初に成功したラットで開発されたが、同じように広範囲に使用されたマウスと同等への翻訳は、顕微手順の技術的な複雑さにより達成されていませんでした。対照的に、また、ラットで最初に開発非縫合カフ技術は、正常マウス1-3で使用するために適合させた。血行再建術のためのこの技術は、2つの主要な段階I)は、ポリエチレンカフを介して受信者の容器を外転を伴う。 II)以前は裏返し受信者の容器の上にドナー容器を引っ張って、周タイで所定の位置に保持している。これは内皮層、短い動作時間と非常に高い開通率4の連続性を保証します。

血管吻合のためにこの技術を使用してT ">私たちは95%の全体的な成功率で1,000以上の子宮頸心臓移植を行った。動脈の流入のために総頸動脈及び近位大動脈弓を移植した心臓の逆行性灌流が生じる吻合した。静脈排出のために、移植片の肺動脈は、受信者5の外頸静脈と吻合した。

ここで、私たちはビデオを補足するためにこの技術のさらなる詳細を提供する。

Introduction

心臓移​​植は、異なる末期心疾患に罹患している患者のための選択の治療法を表す。外科技術、感染症のより効果的な予防法、および新規の免疫抑制レジメンの進歩は、臓器移植6の著しく改善された成果が得られた。しかし、長期移植片生存は、過去数年にわたって厳密7改善されていない。移植動脈硬化を特徴とする慢性拒絶反応は、長期的な移植片の生存8-11の大きな障害であり続けている。

マウスでの異所性心移植のモデルは、急性時の免疫学的メカニズムを解析するための重要かつ有効なツールとしてだけでなく、慢性拒絶12-15を提供しています。

今日までに最も頻繁移植モデルは、縫合技術を用いて腹部マウスの心臓移植は依然としてある。ドナー心臓の上行大動脈はa側に吻合さbdominal大動脈と肺動脈をレシピエントの下大静脈に吻合される。縫合モデルの顕微困難の多くは16,17を縫合される船舶の小さなサイズに基づいています。

縫合糸モデルとは対照的に、心臓は、外頸静脈を肺動脈および総頸動脈ドナーの大動脈に吻合されるレシピエントの頸部に配置される。

カフ技術を用いて子宮頸部心臓移植モデルの開発の理論的根拠は、このモデルの広範な適用を可能にする基本的な顕微スキルの高い成功率を達成可能にする動物モデルを、持っていることであった。縫合モデル18と比較した場合、この方法の主な利点はかなり少ない出血および血栓症などの吻合関連の合併症を発生している。

Protocol

動物は、バリア病原体フリーの施設に収容されている。すべての動物は、医学研究のための国立協会策定した「実験動物管理のプリンシパル」に準拠したヒューマンケアを受ける」と「実験動物の管理と使用に関する指針」は、全米科学アカデミーによって調製し、全国で公開衛生研究所(NIH公開番号86から23は、1985年改訂)。全ての実験は、オーストリアの文部科学省科学文化によって承?…

Representative Results

図2は、完全にMHCミスマッチのC57BL / 6レシピエントへの移植後のBALB / cドナーからの心臓同種移植片の代表的生存データを示す。心臓を移植後7日目±1に拒否されます。移植された同種移植片の指触診は、同種移植片拒絶反応の時間依存のコースを検出するための感度の高い方法である。私たち直列に実行されたすべての同系心臓移植が無限に生き残った(> 150日)。 <p class="j…

Discussion

血管化同種移植片の拒絶反応は不十分にしかin vitroモデルを用いて評価することができる異なる工程の茄多を伴う。受信者の増感、二次リンパ器官における抗原処理だけでなく、免疫担当細胞の分化、増殖などの現象は、生体内でよりよく特徴付けている。動物モデルは、それによってトランスレーショナルリサーチ16のための理想的なツールです。トランスジェニック?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors declare that they have no competing financial interests.

Materials

Yasargil Clip Mini Permanent 7mm Aesculap FE720K
Micro vessel clip S & T B1 00396 V
Microscissor FST 14075-11
Vesseldilatator S & T D-5a.2 00125
Microforceps FST Dumont 11271- 30
Clipapplicator S & T CAF-4 00072
Microvessel clip S & T B1 00396 V

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Oberhuber, R., Cardini, B., Kofler, M., Ritschl, P., Oellinger, R., Aigner, F., Sucher, R., Schneeberger, S., Pratschke, J., Brandacher, G., Maglione, M. Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique. J. Vis. Exp. (92), e50753, doi:10.3791/50753 (2014).

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