Muizen Baarmoederhalskanker harttransplantatie Model met een aangepaste manchet Techniek
Summary
Het murine cervicale harttransplantatie model is geschikt voor immunologische en ischemie-reperfusie schade studies. We pasten de procedure met een niet-hechtingsmanchet techniek en uitgevoerd meer dan 1000 succesvolle transplantaties met deze benadering.
Hierin geven we meer details van deze techniek om de video te vullen.
Abstract
Muismodellen zijn van bijzonder belang in het onderzoek omdat een groot aantal monoklonale antilichamen en commercieel gedefinieerd inteelt en knockout stammen zijn mechanistisch presteren in vivo studies. Terwijl harttransplantatie modellen met behulp van een hechting techniek werden voor het eerst met succes ontwikkeld in ratten, werd de vertaling in een even wijdverbreid gebruikte muizen gelijkwaardig nooit vanwege de technische complexiteit van de microchirurgische procedure bereikt. Daarentegen werden niet hechtingsmanchet technieken ook oorspronkelijk ontwikkeld in ratten met succes aangepast voor gebruik in muizen 1-3. Deze techniek voor revascularisatie omvat twee belangrijke stappen die ik) everting het ontvangende vaartuig over een polyethyleen manchet; II) het trekken van de overdragende vaartuig over de voorheen buiten gekeerde ontvangende vaartuig en houdt het op zijn plaats met een rondlopende band. Dit zorgt voor een continuïteit van de endotheliale laag, korte werktijd en zeer hoge doorgankelijkheid 4.
t "> Met deze techniek voor vasculaire anastomose voerden we meer dan 1000 cervicale harttransplantatie met een totale succespercentage van 95%. Voor arteriële instroom gemeenschappelijke halsslagader en de proximale aorta anastomose werden resulteert in een retrograde perfusie van het getransplanteerde hart. Voor veneuze drainage de longslagader van het transplantaat anastomose met de externe halsader van de ontvanger 5.Hierin geven we meer details van deze techniek om de video te vullen.
Introduction
Harttransplantatie is de behandeling van keuze voor patiënten met verschillende eindstadium hartziekten. Vooruitgang in chirurgische technieken, meer effectieve profylaxe van infecties, en nieuwe immunosuppressieve behandelingen resulteerde in sterk verbeterde uitkomst van orgaantransplantatie 6. Echter langdurige transplantaatoverleving niet strikt verbeterd in de afgelopen jaren 7. Chronische afstoting, gekenmerkt door transplantatie arteriosclerose blijft een belangrijk obstakel voor langdurige transplantaatoverleving 8-11 zijn.
Het model van heterotope harttransplantatie bij muizen een belangrijk en nuttig instrument voor analyse van immunologisch mechanisme tijdens acute en chronische afstoting 12-15.
Tot op heden de meest voorkomende transplantatie model nog steeds de buik muis harttransplantatie met de hechtdraad techniek. De opstijgende aorta van het donorhart anastomose aan de abdominal aorta en de longslagader wordt geanastomoseerd naar onderste holle ader van de ontvanger. Veel van de microchirurgische moeilijkheid van de hechtdraad model is gebaseerd op de geringe omvang van de schepen, die gehecht 16,17.
In tegenstelling tot de hechtdraad model het hart wordt geplaatst in de nek van de ontvanger wanneer de externe halsslagader wordt anastomose de longslagader en de gemeenschappelijke halsslagader de aorta van de donor.
De grondgedachte van de ontwikkeling van cervicale harttransplantatie model met de manchet techniek was een diermodel, waardoor een hoog succespercentage met basis microchirurgische vaardigheden die brede toepassing van dit model zal hebben. De grote voordelen van deze werkwijze zijn aanzienlijk minder voorkomende anastomose complicaties zoals bloedingen en trombose in vergelijking met de hechtdraad model 18.
Protocol
Representative Results
Discussion
Afwijzing van gevasculariseerde transplantaten brengt een overvloed aan verschillende stappen die alleen onvoldoende kan worden beoordeeld aan de hand van in vitro modellen. Fenomenen zoals de sensibilisering van de ontvangers, antigen processing in secundaire lymfoïde organen maar ook de differentiatie en proliferatie van immuun-competente cellen zijn beter gekarakteriseerd in vivo. Diermodellen zijn daardoor de ideale tool voor translationeel onderzoek 16. Muismodellen vertegenwoordigen n…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors declare that they have no competing financial interests.
Materials
| Yasargil Clip Mini Permanent 7mm | Aesculap | FE720K | |
| Micro vessel clip | S & T | B1 00396 V | |
| Microscissor | FST | 14075-11 | |
| Vesseldilatator | S & T | D-5a.2 00125 | |
| Microforceps | FST | Dumont 11271- 30 | |
| Clipapplicator | S & T | CAF-4 00072 | |
| Microvessel clip | S & T | B1 00396 V |
References
- Brandacher, G., et al. Tetrahydrobiopterin compounds prolong allograft survival independently of their effect on nitric oxide synthase activity. Transplantation. 81, 583-589 (2006).
- Schneeberger, S., et al. The effect of secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) on ischemia/reperfusion injury in cardiac transplantation. Am J Transplant. 8, 773-782 (2008).
- Sucher, R., et al. IDO and regulatory T cell support are critical for cytotoxic T lymphocyte-associated Ag-4 Ig-mediated long-term solid organ allograft survival. JImmunol. 188, 37-46 (2012).
- Yamashita, K., et al. Heme oxygenase-1 is essential for and promotes tolerance to transplanted organs. FASEB J. 20, 776-778 (2006).
- Kienzl, K., et al. Proteomic profiling of acute cardiac allograft rejection. Transplantation. 88, 553-560 (2009).
- Aurora, P., et al. Registry of the International Society for Heart and Lung Transplantation: tenth official pediatric lung and heart/lung transplantation report–2007. J Heart Lung Transplant. 26, 1223-1228 (2007).
- Häyry, P. Chronic allograft vasculopathy new strategies for drug development. Transplant Proc. 30, 3989-3990 (1998).
- Hosenpud, J. D. Immune mechanisms of cardiac allograft vasculopathy an update. Transpl Immunol. 1, 237-249 (1993).
- Libby, P., Pober, J. S. Chronic rejection. Immunity. 14, 387-397 (2001).
- Kouwenhoven, E. A., de Bruin, R. W., Heemann, U. W., Marquet, R. L., Ijzermans, J. N. Late graft dysfunction after prolonged cold ischemia of the donor kidney inhibition by cyclosporine. Transplantation. 68, 1004-1010 (1999).
- Kouwenhoven, E. A., Ijzermans, J. N., de Bruin, R. W. Etiology and pathophysiology of chronic transplant dysfunction. Transpl Int. 13, 385-401 (2000).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
- Huang, X., Chen, D., Chen, L. [A modified model of cervical heterotopic cardiac transplantation for chronic rejection research]. Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za Zhi. 22, 1508-1510 (2008).
- Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nat Protoc. 2, 471-480 (2007).
- Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105, 1609-1614 (2002).
- Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51, 896-898 (1991).
- Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64, 1598-1601 (1997).
- Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Exp Clin Transplant. 8, 245-249 (2010).
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Primarily vascularized allografts of hearts in mice. The role of H-2D, H-2K, and non-H-2 antigens in rejection. Transplantation. 16, 343-350 (1973).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
- Zimmermann, F. A., et al. Techniques for orthotopic liver transplantation in the rat and some studies of the immunologic responses to fully allogeneic liver grafts. Transplant Proc. 11, 571-577 (1979).
- Maglione, M., et al. Donor pretreatment with tetrahydrobiopterin saves pancreatic isografts from ischemia reperfusion injury in a mouse model. Am J Transplant. 10, 2231-2240 (2010).
- Heron, I. A technique for accessory cervical heart transplantation in rabbits and rats. Actapathologica et microbiologica Scandinavica Section A, Pathology. 79, 366-372 (1971).
