Murina Cervical Heart Transplantation Modell hjälp av en modifierad Cuff Technique

Summary

Den murina livmoderhalscancer hjärttransplantation modell passar bra för immunologiska samt ischemi reperfusion studier skada. Vi ändrade proceduren med en icke-sutur manschetten teknik och utfört mer än 1000 framgångsrika transplantationer med detta synsätt.

Häri ger vi ytterligare information om denna teknik för att komplettera videon.

Abstract

Mus modeller är av särskilt intresse för forskning, eftersom en mängd olika monoklonala antikroppar och kommersiellt definierade inavlade och knockout stammar är tillgänglig för att utföra mekanistiska studier in vivo. Medan hjärttransplantations modeller med hjälp av en sutur tekniken först framgångsrikt utvecklat hos råttor, var översättning till ett lika utbrett använt murina motsvarighet aldrig uppnås på grund av tekniska komplexiteten i mikrokirurgisk procedur. Däremot var inte sutur manschetten tekniker, även utvecklats till en början hos råttor, med framgång anpassat för användning i möss ^1-3. Denna teknik för revaskularisering innebär två stora steg I) everting det mottagande fartyget under en polyeten manschetten; II) drar det fartyg som bidrar över tidigare vrängs mottagande fartyget och hålla den på plats med en omkrets slips. Detta säkerställer en kontinuitet endotelskiktet, kort driftstid och mycket höga öppna kärl ^4.

t "> Med hjälp av denna teknik för vaskulär anastomos vi utfört mer än 1.000 livmoderhalscancer hjärttransplantationer med en total framgång på 95%. För arteriell inflöde den gemensamma halspulsådern och den proximala aortabågen anastomoserades resulterar i en retrograd perfusion av det transplanterade hjärtat. För venös dränering lungartären av transplantatet var anastomoseras med den yttre halsvenen av mottagaren ^5.

Häri ger vi ytterligare information om denna teknik för att komplettera videon.

Introduction

Hjärttransplantation representerar terapi av val för patienter som lider av olika slutstegs hjärtsjukdomar. Framsteg inom kirurgisk teknik, effektivare profylax av infektioner, och nya immunsuppressiv behandling resulterade i markant förbättrad resultatet av organtransplantation ^6. Emellertid har långsiktiga graft överlevnad inte förbättrats rigoröst under de senaste åren ^7. Kronisk avstötning, som kännetecknas av transplantations åderförkalkning fortsätter att vara ett stort hinder för långsiktig graft överlevnad ^8-11.

Modellen för heterotop hjärttransplantation i möss ger ett viktigt och relevant verktyg för analys av immunologisk mekanism under akut och kronisk avstötning ^12-15.

Hittills den vanligaste transplantationen modellen är fortfarande buken musen hjärttransplantation med hjälp av sutur tekniken. Den stigande aorta av donatorns hjärta anastomoseras till ettbdominal aorta och lungartären är anastomoseras till mottagarens sämre hålvenen. En stor del av mikro svårigheten att suturen modellen bygger på den lilla storleken av fartygen, som suture ^16,17.

I motsats till den sutur modell hjärtat placeras i halsområdet hos mottagaren där den externa jugularvenen anastomoserades till lungartären och den gemensamma halsartären aortan hos givaren.

Den logiska grunden för utvecklingen av halshjärttransplantation modell med manschetten teknik var att ha en djurmodell, som gör det möjligt att uppnå höga andelen framgångsrika med grundläggande mikrokirurgisk kompetens som gör att bred tillämpning av denna modell. De stora fördelarna med denna metod är betydligt mindre förekommande anastomos relaterade komplikationer såsom blödningar och trombos jämfört med sutur modell ^18.

Protocol

Djur är inrymda i en barriär patogenfri anläggning. Alla djur får mänskliga vård i överensstämmelse med "Principals of Laboratory Animal Care" utarbetas av Nationalföreningen för medicinsk forskning "och" Guide för skötsel och användning av försöksdjur "som utarbetats av National Academy of Sciences och offentliggjorts av National Institutes of Health (NIH publikation nr. 86-23, reviderad 1985). Alla experiment är godkända av det österrikiska ministeriet för utbildning, vetens…

Representative Results

Figur 2 visar representativa överlevnadsdata för hjärt allograft från BALB / c-donatorer efter transplantation till fullo MHC inkompatibla C57BL / 6 mottagare. Hjärtan avvisas dag 7 ± 1 efter transplantation. Finger palpation av transplanterade allograft är en känslig metod för att detektera beroende naturligtvis av transplantatavstötning tid. Alla syngena hjärttransplantationer utförs i vår serie levde på obestämd tid (> 150 dagar). <p class="jove_content" fo:keep-together.within-…

Discussion

Avslag på vaskulariserade allotransplantat innebär en uppsjö av olika åtgärder som endast kan otillräckligt utvärderas med hjälp av in vitro-modeller. Fenomen som sensibilisering av mottagarna, antigen bearbetning i sekundära lymfoida organ utan även differentiering och proliferation av immunkompetenta celler är bättre karakteriserade in vivo. Djurmodeller är därmed det perfekta verktyget för translationell forskning ^16. Musmodeller utgör fortfarande den högsta standarden in…

Materials

Yasargil Clip Mini Permanent 7mm	Aesculap	FE720K
Micro vessel clip	S & T	B1 00396 V
Microscissor	FST	14075-11
Vesseldilatator	S & T	D-5a.2 00125
Microforceps	FST	Dumont 11271- 30
Clipapplicator	S & T	CAF-4 00072
Microvessel clip	S & T	B1 00396 V