Summary

Murine Cervical Herztransplantation Modell mithilfe eines modifizierten Cuff-Technik

Published: October 12, 2014
doi:

Summary

Die murine Gebärmutterhalskrebs Herztransplantation Modell ist für immunologische sowie Ischämie Reperfusionsschaden Studien gut geeignet. Wir modifizierten das Verfahren mit einem nicht-Nahttechnik und Manschette durchgeführt mehr als 1.000 erfolgreiche Transplantationen mit diesem Ansatz.

Hier stellen wir weitere Einzelheiten dieser Technik, um das Video zu ergänzen.

Abstract

Mausmodelle sind von besonderem Interesse in der Forschung seit einer Vielzahl von monoklonalen Antikörpern und kommerziell Inzucht definiert und Knockout-Stämme sind in-vivo-Studien Mechanismus durchzuführen. Während Herztransplantation Modelle mit einer Nahttechnik wurden zunächst erfolgreich an Ratten entwickelt wurde, war die Übersetzung in eine ebenso weit verbreitete gebrauchte murine Äquivalent nie aufgrund der technischen Komplexität der mikrochirurgischen Verfahren erreicht. Im Gegensatz dazu wurden nicht-Nahtmanschette Techniken auch bei Ratten ursprünglich entwickelt, erfolgreich für die Verwendung in Mäusen 1-3 angepasst. Diese Technik für Revaskularisierung umfasst zwei Hauptschritte I) Umstülpen des Empfängergefäßes über einen Polyethylen Manschette; II) Ziehen des abgebenden Schiffes über die früher umgestülpt Empfängergefäßes und hielt ihn an Ort und Stelle mit einer umlaufenden Krawatte. Dies gewährleistet eine Kontinuität der Endothelschicht, kurze Betriebszeit und sehr hohe Durchgängigkeitsraten 4.

t "> Unter Verwendung dieser Technik für die vaskuläre Anastomose führten wir mehr als 1.000 zervikalen Herztransplantationen mit einer Erfolgsquote von 95%. arterielle Zufluss der Arteria carotis communis und das proximal Aortenbogen wurden anastomosiert was eine retrograde Perfusion des transplantierten Herzens. für venöse Drainage wurde die Lungenarterie des Transplantats mit der externen Halsschlagader des Empfängers 5 anastomosiert.

Hier stellen wir weitere Einzelheiten dieser Technik, um das Video zu ergänzen.

Introduction

Herztransplantation stellt die Therapie der Wahl bei Patienten mit verschiedenen Endstadium Herzerkrankungen. Fortschritte in der chirurgischen Techniken, effektiver Prophylaxe von Infektionen und neuartige Immunsuppressiva führte zu deutlich verbesserten Ergebnis der Organtransplantation 6. Doch langfristige Transplantatüberleben wurde nicht konsequent in den letzten Jahren 7 verbessert. Chronische Abstoßung, gekennzeichnet durch Transplantat-Arteriosklerose ist weiterhin ein großes Hindernis für die langfristige Überleben des Transplantats 8-11 sein.

Das Modell der heterotopen Herztransplantation bei Mäusen eine wichtige und gültige Werkzeug zur Analyse von immunologischen Mechanismus während der akuten als auch chronischen Abstoßung 12-15.

Bis heute die häufigste Transplantationsmodell ist immer noch die Bauch Maus Herztransplantation mit der Nahttechnik. Die aufsteigenden Aorta des Spenderherzens an die eine Anastomosebdominal Aorta und der Lungenarterie ist an der unteren Hohlvene des Empfängers anastomosiert. Viel von der mikro Schwierigkeit des Naht Modell basiert auf der geringen Größe der Gefäße, die genäht werden 16,17 basiert.

Im Gegensatz zu dem Nahtmaterial-Modell wird das Herz in den Halsbereich des Empfängers, wo die äußere Jugularvene wird zur Lungenarterie und der Arteria carotis communis die Aorta anastomosiert des Spenders angeordnet.

Das Grundprinzip der Entwicklung der Halsherztransplantation Modell mit Hilfe der Manschette Technik war es, ein Tiermodell, der hohen Erfolgsraten mit grundlegenden mikrochirurgischen Fähigkeiten, die breite Anwendung dieses Modells erlauben wird ermöglicht. Die Hauptvorteile dieses Verfahrens sind die deutlich weniger auftritt Anastomose verbundenen Komplikationen wie Blutungen und Thrombosen im Vergleich zu dem Fadenmodell 18.

Protocol

Tiere werden in einem barrierefreie Einrichtung Erreger untergebracht. Alle Tiere erhalten menschlicher Obhut in Übereinstimmung mit den "Principals of Laboratory Animal Care" von der National Society for Medical Research "und dem" Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren "der Nationalen Akademie der Wissenschaften vorbereitet formuliert und veröffentlicht von der National Institutes of Health (NIH Publikation nicht. 86-23, überarbeitet 1985). Alle Versuche werden vom Bundesmi…

Representative Results

Abbildung 2 zeigt repräsentative Überlebensdaten von Herzallotransplantaten von BALB / c-Spendern nach Transplantation in vollständig übereinstimm MHC C57BL / 6 Empfängern. Herzen werden an Tag 7 ± 1 nach der Transplantation abgelehnt. Finger Palpation des transplantierten Allograft ist eine empfindliche Methode, um den zeitlichen Verlauf der Transplantatabstoßung zu erkennen. Alle syngenen Herztransplantationen in unserer Serie durchgeführt lebt auf unbestimmte Zeit (> 150 Tage). <p clas…

Discussion

Ablehnung der gefäß Allografts bringt eine Fülle von verschiedenen Schritten, die nur unzureichend mit in-vitro-Modellen bewertet werden können. Phänomene wie die Sensibilisierung von Empfängern, die Antigenprozessierung in sekundäre lymphatische Organe, sondern auch die Differenzierung und Proliferation von immunkompetenten Zellen sind dadurch besser in vivo. Tiermodelle sind damit das ideale Werkzeug für translationale Forschung 16. Mausmodelle stellen immer noch den Goldstandard i…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

The authors declare that they have no competing financial interests.

Materials

Yasargil Clip Mini Permanent 7mm Aesculap FE720K
Micro vessel clip S & T B1 00396 V
Microscissor FST 14075-11
Vesseldilatator S & T D-5a.2 00125
Microforceps FST Dumont 11271- 30
Clipapplicator S & T CAF-4 00072
Microvessel clip S & T B1 00396 V

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Oberhuber, R., Cardini, B., Kofler, M., Ritschl, P., Oellinger, R., Aigner, F., Sucher, R., Schneeberger, S., Pratschke, J., Brandacher, G., Maglione, M. Murine Cervical Heart Transplantation Model Using a Modified Cuff Technique. J. Vis. Exp. (92), e50753, doi:10.3791/50753 (2014).

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