Transabdominal ultraljud beskrivs som ett effektivt, icke-invasivt sätt att bedöma reproduktiv status i Reeves muntjac hjort. Dessa metoder kan användas för att uppnå tidig graviditet diagnos och för att utvärdera fetala livskraft. Framtida tillämpningar av denna teknik inkluderar uppskattning av graviditetslängd ålder och effekter av moderns sjukdom på fetala utveckling.
Reeves muntjac hjort (Muntiacus reevesi) är en liten hjortdjursart som är infödd i Sydostasien, och undersöks för närvarande som en potentiell modell för överföring av prionsjukdomar och patogenes. Vertikal överföring är ett område av intresse bland forskare som studerar infektionssjukdomar, inklusive prionsjukdom, och dessa undersökningar kräver effektiva metoder för att utvärdera effekterna av moderns infektion på reproduktiv prestanda. Ultrasonografisk undersökning är ett väletablerat verktyg för att diagnostisera graviditet och bedöma fosterhälsa hos mångadjurarter 1-7, inklusive flera arter av odlade hjortdjur8-19, men denna teknik har inte beskrivits i Reeves muntjac hjort. Här beskriver vi tillämpningen av transabdominal ultraljud för att upptäcka graviditet i muntjac gör och att utvärdera fetala tillväxt och utveckling under hela graviditetsperioden. Med hjälp av detta förfarande identifierades dräktiga djur så tidigt som 35 dagar efter doe-buck parning och detta var ett effektivt sätt att säkert övervaka graviditeten med jämna mellanrum. Framtida mål för detta arbete kommer att omfatta fastställande av normala fetala mätreferenser för uppskattning av graviditetslängd ålder, bestämma känslighet och specificitet av tekniken för att diagnostisera graviditet i olika stadier av dräktigheten och identifiera variationer i fetala tillväxt och utveckling under olika experimentella villkor.
Ultrasonografisk undersökning är en väl beskriven metod för graviditetsdiagnos hos nötkreatur1,får2,3,getter 4,hästar 5,sällskapsdjur6,7och andra inhemska djurarter. Denna bildframställning modalitet har också identifierats som ett värdefullt verktyg för graviditet upptäckt och fetala ålder uppskattning i flera arter av fångenskap hjortdjur, inklusive dovhjorten8-11,kronhjorten12-16,Hokkaido sika hjort17, ochrenar 18,19. I många fall har ultrasonografi producerat högre noggrannhet än andra mekanismer för graviditet upptäckt, såsom serum progesteron eller graviditet-associerade glykoprotein analys9,18. Dessutom kan ultrasonographic visualisering av reproduktionskanalen ge ytterligare information om fetala livskraft, graviditetslängd ålder och identifiering av utvecklingsmässiga avvikelser som annars skulle vara svårt att bedöma. Nyttan av ultrasonography för utvärdering av reproduktiv status föreslår att denna metod bör anpassas till andra arter där aktiva avelsprogram används.
Reeves muntjac hjort (Muntiacus reevesi) är en liten hjortdjursart som är infödd i sydostasien20. Medan reproduktionscykeln hos dessa djur inte är väl karakteriserad i sina inhemska territorier, har studier av vilda populationer i delar av södra England förbättrat förståelsen för derasavelsmönster 20. Till skillnad från de flesta hjortdjur verkar Reeves muntjac uppfödas året runt, utan några uppenbara säsongsfasadtoppar20-22. Kvinnlig muntjac föder vanligtvis en enda fawn efter en 210-dagars graviditetsperiod och på ett tillförlitligt sätt ange en postpartum estrus inom 24 timmar20-22. Blir det inte gravid under denna postpartumperiod kommer att återvända till estrus cirka 24-25 dagar senare20. I fångenskap situationer uppnås reproduktion vanligtvis genom bostäder gör med en eller flera intakta hanar. Detta system ger tillfredsställande befruktningsgrader och kräver liten teknisk skicklighet för personalen, men exakta avelsdatum är svåra, om inte omöjliga, att bestämma.
Muntjac används ofta i cytogenetiska studier på grund av det stora utbudet av diploidkromosomtal och hög frekvens av karyotypisk diversifiering bland de olikaarterna 23. Dessa djur undersöks för närvarande också som en modell för prionsjukdomspatogenes och överföring, med särskilt intresse för studier av vertikal överföring av kronisk slösande sjukdom (CWD) hos hjortdjur. Muntjacs betydelse i ett antal olika forskningstillämpningar tyder på att förbättrad reproduktiv teknik bör inrättas för att komplettera de nuvarande utredningsförfarandena. Specifikt kan icke-invasiva mekanismer för att bedöma graviditetsperioden potentiellt klargöra kritiska variationer i reproduktiv prestanda och fetala tillväxt och utveckling under olika experimentella förhållanden. Vidare skulle utvecklingen av fostermätningsreferenser i realtid vara potentiellt värdefull för att uppskatta graviditetsåldern i situationer där avelsdatum inte kan fastställas. Tidigare studier har beskrivit mekanismer för att använda fetala mätningar, såsom kron-rumpa längd (CRL), bröstdjup (CD) och huvudlängd (HL) för att uppskatta det ungefärliga dräktighetsstadiet hoshjortdjursarter 11-14, 16,17. Dessutom har vissa av dessa studier också fastställt riktlinjer som beskriver när specifika utvecklingsmässiga milstolpar, såsom skelettmineralisering eller fetala hjärtslag, kan identifieras8-19. Medan dessa data kan vara användbara för att vägleda reproduktiv ultraljudsanalys i muntjac, har de flesta andra studerade hjortdjur mycket större kroppsstorlek och längre graviditetsperioder, vilket minskar översättningsvärdet av dessa studier för muntjac-applikationer.
Protokollet som beskrivs här beskriver transabdominal ultrasonography av kvinnliga muntjac för att diagnostisera och övervaka graviditet. Framgångsrikt utförande av detta protokoll kan underlätta tidig graviditet upptäckt och utvärdering av fetala tillväxt och utveckling. Denna teknik har värdefulla tillämpningar i genomförandet av studier som undersöker reproduktion, in utero utveckling eller vertikal överföring av infektionssjukdomar i en liten cervid modell och kan också vara användbar för kliniska ändamål i fångenskap avel operationer.
Detta protokoll beskriver tillämpningen av transabdominal ultrasonography för graviditet diagnos i Reeves muntjac rådjur. Överensstämmer med andra ultraljud studier, lämplig utrustning och tekniska färdigheter är absolut nödvändigt för en framgångsrik reproduktiv undersökning av muntjac doe. Noggrann översyn av grundläggande däggdjur anatomi, de fysiska principerna för diagnostiska ultraljud och det typiska ultrasonographic utseendet på buken inälvor kommer att bidra till att minska felaktiga diagnoser…
The authors have nothing to disclose.
Författarna vill tacka Jeanette Hayes-Klug och Kelly Anderson för förvaltningen av muntjackolonin, Dr Alan Young för att ha introducerat oss till muntjac och Mr Cleve Tedford från Cervid Solutions Inc. för att ha tillhandahållit frömuntjac för detta projekt. Detta arbete stöddes av NIH-bidrag R01AI093634.
Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
Table 2 Equipment | |||
Name of Equipment | Company | Catalog Number | Comments |
V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |