Nós descrevemos um procedimento passo a passo para a criação de sobrecarga de pressão e hipertrofia ventricular esquerda em ratos Wistar pela constrição da aorta ascendente com clipe metálico pequeno. Este modelo é amplamente utilizado para o estudo de alterações de remodelação durante a hipertrofia cardíaca e para identificar e avaliar estratégias para a regressão de tais mudanças.
É necessária uma assinatura do JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou inicie seu teste gratuito.
Artigo de método
Aorta ascendente constrição em ratos para a criação de sobrecarga de pressão Cardíaca Hipertrofia Modelo
* These authors contributed equally
Neste artigo
Resumo
Resumo
Crescente constrição aórtica é o modelo cirúrgico mais comum e bem sucedida para a criação de sobrecarga de pressão induzida hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca. Aqui, descrevemos um procedimento cirúrgico detalhado para a criação de sobrecarga de pressão e hipertrofia cardíaca em ratos por constrição da aorta ascendente com clipe metálico pequeno. Após a anestesia, a traquéia está entubado, inserindo uma cânula através de uma incisão no meio do caminho entre dois anéis cartilaginosos da traquéia. Em seguida, uma incisão na pele é feita ao nível do segundo espaço intercostal na parede torácica esquerda e as camadas musculares estão habilitados para localizar a porção ascendente da aorta. A aorta ascendente é restrito a 50-60% do seu diâmetro original através da aplicação de um pequeno clip de titânio porte. Após a constrição da aorta, os segundo e terceiro costelas são aproximadas com prolene. A cânula da traqueia é removido uma vez que a respiração espontânea foi restabelecida. O animal é deixado recuperar oN a almofada de aquecimento por redução gradual da anestesia. A intensidade da sobrecarga de pressão criada pela constrição da aorta ascendente é determinado com base no gradiente de pressão usando transtorácica bidimensional com Doppler-ecocardiografia. Em geral, este protocolo é útil para estudar os eventos de remodelação e propriedades contráteis do coração durante o início gradual e progressão da hipertrofia cardíaca compensada para coração fase fracasso.
Introdução
Modelos animais pequenos são as ferramentas mais preferidos para o estudo de alterações crónicas no desenvolvimento da hipertrofia cardíaca e sua progressão para insuficiência cardíaca. Modelos de insuficiência cardíaca por métodos cirúrgicos foram originalmente desenvolvidos em ratos como esses animais são mais adequados para procedimentos cirúrgicos de peito aberto, ecocardiograma e avaliação dos parâmetros hemodinâmicos. Eles também fornecem amostras post mortem adequadas para o tecido, celular e estudos de nível molecular 1. Constrição da aorta ascendente é um dos modelos cirúrgicos mais comuns e bem sucedidos para a criação de insuficiência cardíaca s....
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Protocolo
Experimentos em animais foram realizados após a obtenção da aprovação do Comitê de Ética animal Institucional. Ratos Wistar foram alojados sob um escuro de 12 horas para ciclo de luz, temperatura ambiente constante (24 ± 2 ° C) com comida e água ad libitum (conforme as orientações CPCSEA).
1) Cuidados pré-operatório e anestesia
- Mantenha rato (cerca de 200 g de peso corporal) sob antibiótico guarda-chuva de 24 horas antes da cirurgia, através da administração de amoxicilina por via oral (dose: 500 mg / L de água).
- Esterilizar todos os instrumentos cirúrgicos (como tesouras, pinças, clipe aplicador, agulhas de sutura, e....
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Resultados
Nas nossas experiências que são capazes de atingir taxas de sobrevivência de mais de 80%. A eficácia da constrição aórtica foi confirmada pela realização de ecocardiograma Doppler. Os ratos (n = 6) com um gradiente de pressão de cerca de 60 mm de Hg no local da constrição da aorta foram observados durante 8 semanas e sacrificaram-se para análise do desenvolvimento de hipertrofia cardíaca (Figura 1). Após 8 semanas de avaliação ecocardiográfica pós-operatória revelou um aumento significativo nos parâmetr.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Discussão
Existem vários modelos cirúrgicos para a indução de sobrecarga de pressão, bem como a hipertrofia cardíaca e insuficiência cardíaca. Em pequenos animais, Lorell e seus colegas desenvolveram o modelo que descrevemos aqui e eles relataram a ocorrência de hipertrofia cardíaca compensada oito semanas de bandas pós aórtica 5. Alterações cardíacas gradualmente progredir para um estado descompensada e resultar em insuficiência cardíaca. A principal vantagem deste modelo é o aparecimento gradual de aumento da pressão.......
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Divulgações
Os autores não têm nada a revelar.
Agradecimentos
Os autores reconhecem Departamento de Biotecnologia, Governo da Índia para o apoio financeiro a este projeto. Ajith Kumar GS foi apoiado com bolsa de pesquisa sênior do Conselho de Pesquisa Científica e Industrial, Governo da Índia e Binil Raj com bolsa de pesquisa sênior do Conselho Indiano de Pesquisa Médica, Governo da Índia.
....Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Ratos | mantidos em sistemas de anestesia por inalação ARF, RGCB | ||
| VetEquip | AB19276 | ||
| CWE Inc | SAR- 830/AP | ||
| Cânula traqueal de rato | CWE Inc | 13-21032 | |
| Sistema de ultrassom | Philips | HD7 | |
| Transdutor de ultrassom | Philips | S 12 | |
| Clipe de titânio (pequeno) | Horizon | 1204 | |
| Aplicador de clipe | Weck | 137081 | |
| Barbeador elétrico | Vinverth | VBT0817 | |
| Lâmina BP (tamanho: 11) | Cirurgião | REF10111 | Preparação do local cirúrgico |
| Tramadol | Orquídea cuidados de saúde | OCH043 | |
| Cloridrato de amoxicilina | Ranbaxy | ||
| Isoflurano | Piramal cuidados de saúde | A23M10A | |
| Seringas | BD | 2015-09 | |
| 4-0 seda trançada | Diamante | ||
| 3-0 prolene | Johnson & Johnson | NW018 | |
| Fita cirúrgica | Romsons | SH 6301 | |
| Povidona | iodo Win Medicare | ||
| Temp. almofada de aquecimento controlada | Flamingo | HC1003 |
Referências
- Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present. Circ Heart Fail. 2, 138-144 (2009).
- Weinberg, E. O., et al.
Acesso restrito. Inicie sessão ou comece um teste para visualizar este conteúdo.
Reimpressões e permissões
