अवेध्य एम मोड इकोकार्डियोग्राफी द्वारा माउस में हृदय की दर के गर्भ मापन में
Summary
अल्ट्रा उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड छोटे जानवरों में कार्डियक असामान्यताएं की जांच के लिए एक शक्तिशाली रहते इमेजिंग उपकरण है. इसके noninvasiveness भ्रूण की शारीरिक स्थिति को बनाए रखने की अनुमति देता है. इस के साथ साथ, हम utero में E18.5 में भ्रूण के दिल की दर को मापने के लिए एम मोड अल्ट्रासाउंड का उपयोग दिखाते हैं.
Abstract
जन्मजात हृदय रोग (सीएचडी) के जन्म के समय मौत का सबसे लगातार noninfectious कारण है. सीएचडी की घटनाओं में 4 से 50/1, 000 जन्मों (बीमारी और चोट क्षेत्रीय अनुमान है, विश्व स्वास्थ्य संगठन, 2004) के आधार पर. अक्सर जीवन की गुणवत्ता में समझौता सर्जरी कि सीएचडी के कारणों को खोजने के महत्व के बारे में हमें याद दिलाता है, हृदय दोष दूर करने के लिए आवश्यक हैं. उत्परिवर्ती माउस मॉडल और लाइव इमेजिंग प्रौद्योगिकी इस रोग के एटियलजि अध्ययन करने के लिए आवश्यक उपकरण बन गए हैं. उन्नत तरीकों भ्रूण में असामान्य दिल की लाइव इमेजिंग की अनुमति हालांकि, बाद के शारीरिक और hemodynamic राज्यों कारण अक्सर शल्य चिकित्सा और / या लंबी प्रक्रिया के लिए समझौता कर रहे हैं. अवेध्य अल्ट्रासाउंड इमेजिंग, हालांकि, शल्य चिकित्सा, जिससे उनके शरीर क्रिया विज्ञान को बनाए रखने, भ्रूण उजागर बिना इस्तेमाल किया जा सकता है. इस के साथ साथ, हम utero में E18.5 में भ्रूण के दिल की दर का आकलन करने के लिए सरल एम मोड अल्ट्रासाउंड का उपयोग करें. असामान्य दिल की दर का पता लगाने के लिए वास्तव में एक अच्छा इंडिका हैइस प्रकार दिल के रोग का टो और दिल की विफलता का कारण हो सकता है कि विकास संबंधी दोषों की पहचान करने के पहले चरण का गठन किया.
Introduction
सीएचडी जन्म 1 में मौत का सबसे आम noninfectious कारण है. एकाधिक सर्जरी अक्सर जिसका जीवन की गुणवत्ता में 1 से समझौता रह सकती है विषयों में संरचनात्मक दोषों को दूर करने के लिए आवश्यक हैं. सीएचडी के साथ बच्चे अक्सर विकास 2,3 पर utero परिणामों में महत्वपूर्ण संकेत है, वे सर्जरी आया नहीं है, भले ही मस्तिष्क संबंधी बीमारियों का विकास. ऐसे में गर्भावस्था के दौरान वायरस या रसायन (शराब) के लिए जोखिम, कारण सीएचडी के रूप में दोनों आनुवांशिक और पर्यावरणीय कारकों. आनुवंशिक योगदानकर्ताओं का अध्ययन कर अपनी प्रारंभिक चरण में अभी भी है, लेकिन तेजी से बढ़ रही है. इन योगदानकर्ताओं की पहचान करने और एक सरल और शक्तिशाली उपकरण के साथ उत्परिवर्ती चूहों phenotyping, दिल के विकास में अपनी भूमिका को समझना बेहद फायदेमंद होगा.
माउस वास्तव में सीएचडी अध्ययन करने के लिए विकल्प के एक पशु मॉडल है, और मानवीय मामलों के सबसे चूहों 4,5 में reproduced किया जा सकता है. नतीजतन, भ्रूण माउस हृदय phenotyping इंक बन गया हैreasingly महत्वपूर्ण मानव सीएचडी के एटियलजि की जांच और पर्याप्त उपकरणों की आवश्यकता के लिए. तय नमूनों पर ऊतकीय पढ़ाई अमूल्य हैं, जीवित पशुओं की वास्तविक समय इमेजिंग दिल के शरीर क्रिया विज्ञान को समझने के लिए महत्वपूर्ण है. वीडियो माइक्रोस्कोपी रहते इमेजिंग प्रदान करता है. हालांकि, यह जिससे उनके शारीरिक और hemodynamic राज्य समझौता किए, भ्रूण बेनकाब करने के लिए laparotomy की आवश्यकता है. हाल ही में, इकोकार्डियोग्राफी क्लिनिक में और साथ ही चूहों में हृदय आकलन के लिए मानक इमेजिंग तकनीक बन गया है.
माउस भ्रूण इकोकार्डियोग्राफी मानक नैदानिक अल्ट्रासाउंड प्रणालियों के साथ ही अति उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड सिस्टम का उपयोग किया जाता है. बाद के 30 मेगाहर्ट्ज या दो आयामी छवियों पैदा करते हैं और जल्दी भ्रूण चरणों के मूल्यांकन की अनुमति है कि उच्च आवृत्ति transducers प्रदान करते हैं. इन transducers, हालांकि, पर्याप्त इमेजिंग विमानों और प्राप्त करने के मौलिक दिल देहात निर्धारित करने के लिए पर्याप्त है, जो एक अपेक्षाकृत गरीब प्रवेश गहराई (~ 13 मिमी), हैऐसे दिल दर, पाद लंबा और प्रकुंचन और पट और दीवार मोटाई पर छोड़ दिया और सही निलय आंतरिक व्यास, laparotomy प्रदर्शन के बिना के रूप में rameters,.
हमारे अध्ययन में, हम भ्रूण दिन E18.5 पर माउस भ्रूण के दिल की दर का आकलन करने के लिए एक अति उच्च आवृत्ति अल्ट्रासाउंड प्रणाली का इस्तेमाल किया है. हम 12.7 मिमी की फोकल लंबाई के साथ भ्रूण का आकार, दी आदर्श है जो 20 मिमी x 20 मिमी, के एक क्षेत्र दृष्टिकोण प्रदान करता है कि एक 30 मेगाहर्टज ट्रांसड्यूसर चुना है. हालांकि, एक उच्च आवृत्ति ट्रांसड्यूसर पहले विकास के चरणों का विश्लेषण करने के लिए चुना जा सकता है. चयनित एम मोड 1,000 फ्रेम / सेकंड की एक उच्च अस्थायी समाधान के लिए प्रस्ताव धन्यवाद में ऊतकों के दृश्य की अनुमति देता. पूरी प्रक्रिया सरल है और भ्रूण की शारीरिक और hemodynamic राज्यों के किसी भी गड़बड़ी से बचने के लिए जल्दी से जल्दी के रूप में किया जाना चाहिए. लगभग 8 भ्रूण का विश्लेषण लगभग 1 घंटे की आवश्यकता है.
Protocol
Representative Results
Discussion
एम मोड इकोकार्डियोग्राफी माउस भ्रूण की गर्भ दिल की दर में मापने के लिए एक प्रभावी और आसान तरीका है. व्यावसायिक रूप से उपलब्ध ट्रांसड्यूसर छोटे दिलों की धड़कन कल्पना करने के लिए पर्याप्त संकल्प …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम आंकड़े 1 और 2 में दिखाया तस्वीरें लेने के लिए इकोकार्डियोग्राफी और एन Chamberland में प्रशिक्षण के लिए मानॉन Laprise धन्यवाद. इस काम के स्वास्थ्य अनुसंधान अनुदान एमओपी 44363 संस्थान कनाडा और कनाडा के अध्यक्ष 950-216684 द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Isoflurane | Pharmaceutical Partners of Canada Inc. | CP0406v2 | 1-chloro-2,2,2-trifluoroethyl difluoromethyl ether |
| Ultrasound gel | Parker Laboratories Inc. | Aquasonic Clear | |
| Electrode gel | Parker Laboratories Inc. | Spectra 360 | |
| Ophthalmic gel | Novartis | Tear-Gel | |
| Depilatory cream | Church & Dwight Co., Inc. | Nair | |
| Hair clipper | |||
| Gauze/cotton swap | Q-tips | ||
| Permanent marker | |||
| High-Resolution In vivo Ultrasound Imaging System | Visual Sonics | Vevo770 | |
| 30 MHz Transducer | Visual Sonics | RMV707B | |
| Imaging platform and physiology controller unit | Visual Sonics | ||
| Anesthetic System | Cyprane North America Inc. | 312462 | |
| Infrared heating lamp |
References
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