يسهل جمع الحليب من النماذج الحيوانية طرق البحث المختلفة: فهم المناعة السلبية ، وتحديد مسببات الأمراض المسؤولة عن الانتقال الرأسي ، ومن خلال استخدام الفئران المعدلة وراثيا ، حتى الإنتاج التجاري للبروتينات الموجودة في حليب الثدي البشري. نوضح هنا طريقة بسيطة لجمع الحليب في الفئران وغزلان ريفز مونتجاك.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
طرق جمع الحليب لالفئران وريفز 'Muntjac الغزلان
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
تستخدم النماذج الحيوانية بشكل شائع في جميع أنحاء مختبرات الأبحاث لتحقيق ما يمكن اعتباره عادة غير عملي في المضيف الأصلي لمسببات الأمراض. يتيح جمع الحليب من للعلماء الفرصة لدراسة العديد من جوانب التكاثر بما في ذلك الانتقال الرأسي والمناعة السلبية وبيولوجيا الغدد الثديية والرضاعة. يعد الحصول على كميات كافية من الحليب لهذه الدراسات مهمة صعبة ، خاصة من نماذج الصغيرة. نوضح هنا طريقة غير مكلفة وسهلة لجمع الحليب في الفئران وغزلان ريفز التي لا تتطلب معدات متخصصة أو تدريبا مكثفا. تتطلب هذه الطريقة بالذات باحثين: أحدهما لشفط الحليب وتثبيت ، والآخر لجمع الحليب في وعاء مناسب من نموذج Muntjac أو الفأر. يتطلب طراز الماوس أيضا استخدام ماصة P-200 وأطراف الماصة المقابلة. في حين أن هذه الطريقة منخفضة التكلفة وسهلة التنفيذ نسبيا ، يجب إبلاغ الباحثين بأن تخدير ضروري لجمع الحليب على النحو الأمثل.
المقدمة
النماذج الحيوانية توفير نظرة ثاقبة علم الأمراض التي لا يمكن الحصول عليها في المختبر عن طريق التحليل. لتوفير النتائج الأكثر فعالية، فمن المهم استخدام نموذج الحيوان الذي يرتبط ارتباطا وثيقا لهذا المرض وأنواع من الفائدة. على سبيل المثال، muntjac في ريفز '(Muntiacus reevesi)، والغزلان الصغيرة الآسيوية 1،2، والفئران المعدلة وراثيا التعبير عن بروتين بريون cervid (CerTgPrP) 3 هي نماذج حيوانية مفيدة لأنواع cervid. كلا النوعين هي متعدد الودق، مما يسمح للتربية على مدار السنة، وبالتالي مصدر ثابت للأنسجة المرتبطة بالحمل والسوائل لدراسة آليات محددة في cervid علم الأحياء. دراسات من الحليب لديها مجم....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
1. بروتوكول حلب ماوس
تمت الموافقة على الطرق الموضحة في هذا البروتوكول من قبل IACUC.
1. الفصل بين السد من النسل
- حدد السد أن تحلب. اختيار السد مع القمامة من 4 أو أكثر من الجراء التي هي 8-12 أيام بعد الولادة لتوفير الحليب القصوى التحصيل على الرغم من جمع من الممكن في أي وقت آخر نقطة الولادة تصل إلى 21 يوما.
- فصل السد من القمامة لها على الأقل 2 ساعة قبل الحلب.
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
فأر
من تجاربنا، فقد قررنا أنه من الممكن لجمع ما يقرب من 100-400 ميكرولتر من الحليب من الماوس مختبر واحد، تعتمد على العديد من المتغيرات. وتشمل هذه المتغيرات 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد الجراء السد حاليا التمريض و4) مقدار الوقت آخر الولادة. وقد أظهرت دراساتنا أن أعلى محصول تم الحصول عليها عندما يتم فصل السدود من ذريتهم لا يقل عن 2 ساعة، ويتم تعيين 45 دقيقة .......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
فأر
هناك العديد من العوامل التي تأخذ بعين الاعتبار عند جمع الحليب من ماوس، بما في ذلك 1) كمية من الوقت المخصص لجمع، 2) جرعة من الأوكسيتوسين تدار، 3) كم عدد الجراء السد حاليا التمريض و4) مبلغ الفترة الزمنية التي مرت منذ الولادة في وقت جمع. استخدام الدراسات السابقة كمبادئ توجيهية، شرعنا في تحسين الظروف لإنتاج الحليب.
الأبحاث الساب.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.
شكر وتقدير
تم تمويل هذه التجارب من قبل #RAI093634A منحة المعاهد الوطنية للصحة. نعرب عن امتناننا البالغ لجيني باورز ، DVM ، دكتوراه ، لمساعدتها في الحلب السريع.
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| المواد &# 8212 ؛ | |||
| كيتامين الفأر (KetaVed 100 مجم / مل) (الجرعة: 80-100 مجم / كجم) | MWI / Vedco | 011075 | |
| زيلازين (TranquiVed 100 مجم / مل) (الجرعة: 5-10 مجم / كجم) MWI | / Vedco | NADA 139236 | |
| زيوت تشحيم العين | MWI / Apexa | 701013 | |
| أوكسيتوسين (2 وحدة دولية / كجم) | Vet One | 501013 | |
| Materials&# 8212; مونتجاك | |||
| ميدازولام (1-2 مجم / كجم) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | اختياري: يمكن للباحث إما استخدام الميدازولام بمفرده أو تركيبة BAM كمخدر |
| لطرطرات بوتورفانول (توربوجيزيك) (0.45 مجم / كجم) | فورت دودج لصحة | NADA 135-780 | |
| طرطرات أزابيرون (0.25 مجم / كجم) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 مجم / كجم) | ZooPharm | ||
| أنتيبامزول هيدروكلوريد (أنتيسيدان) (الجرعة: 0.25 مجم / كجم) | أوريون كوربوريشن | NADA 141-033 | |
| أوكسيتوسين (10 وحدة دولية / كجم) | Vet One | 501013 | |
| Equipment&# 8212; ماوس | |||
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 & ل نصائح الماصة | مختبرات الضوء | B-2004-SH | |
| 1 مل محاقن | MWI | 005427 | |
| 27 G إبر | MWI | 002031 | |
| المعدات & # 8212 ؛ Muntjac | |||
| 15 مل أنابيب مخروطية | VWR | 21008-918 | |
| 22 جرام إبر | MWI | 873 | |
| 3 مل محاقن قفل لور | MWI | 001377 |
المراجع
- Dueling, S. Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , Available from: http://animaldiversity.ummz.umich.edu/accounts/Muntiacus_reevesi (2004).
- Pei, K., Taber, R., O'Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
