Методы сбора молока для мышей и Ривза олень мунжтак
Summary
Milk collection from animal models facilitates various research avenues: understanding passive immunity, identifying pathogens responsible for vertical transmission and, through the use of transgenic mice, even commercial production of proteins found in human breast milk. Here we illustrate a simple method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer.
Abstract
Animal models are commonly used throughout research laboratories to accomplish what would normally be considered impractical in a pathogen’s native host. Milk collection from animals allows scientists the opportunity to study many aspects of reproduction including vertical transmission, passive immunity, mammary gland biology, and lactation. Obtaining adequate volumes of milk for these studies is a challenging task, especially from small animal models. Here we illustrate an inexpensive and facile method for milk collection in mice and Reeves’ muntjac deer that does not require specialized equipment or extensive training. This particular method requires two researchers: one to express the milk and to stabilize the animal, and one to collect the milk in an appropriate container from either a Muntjac or mouse model. The mouse model also requires the use of a P-200 pipetman and corresponding pipette tips. While this method is low cost and relatively easy to perform, researchers should be advised that anesthetizing the animal is required for optimal milk collection.
Introduction
Животные модели обеспечить понимание болезни патологии, которые не могут быть получены путем анализа ин витро. Для обеспечения наиболее эффективных результатов, важно использовать животную модель, которая тесно связана с болезнью и видов, представляющих интерес. Например, мунтжака в Ривза (Muntiacus reevesi), небольшой азиатские олени 1,2 и трансгенные мыши, экспрессирующие оленевых прионных белков (CerTgPrP) 3 являются полезными животных моделей для оленевых видов. Оба вида polyestrous, что позволяет круглый год разведение, и, следовательно, в соответствии источником для связанных с беременностью тканях и жидкостях для изучения конкретных механизмов в оленевых биологии. Исследования молока имеют широкий спектр приложений, которые являются более просто (и недорого), совершенных в животных моделях, чем у человека. Исследователи могли исследовать молоко и молозиво, как потенциального источника 1) инфекционного передачи болезни, 2) иммуноглобулины, переданные от матери к потомству в развитмат ветствующую защитную эк пассивного иммунитета 4 и 3) лактоферрина, белок, содержащийся в грудном молоке человека, участвующего в пассивного иммунитета, что исследователи в настоящее время пытается коммерчески производить 5.
Сбор значительное количество молока от мелких животных может оказаться трудной задачей. Роджерс был предложен подход для сбора молока от крыс 6, который впоследствии был использован в мышах. DePeters и Hovey предложены два способа сбора молока, один вручную с помощью вакуум-сгенерированный создаваемое каучук пипетки грушей на пипеткой Пастера и второй требующей строительство доильного аппарата, который затем прилагается к источнику вакуума (такие как кран) чтобы собрать мыши молоко 7. Здесь мы предлагаем простой, низкий затратный метод для сбора молока от мышей и Ривза олень мунжтак, что требует единственную имеющуюся лабораторного оборудования и основные технические навыки. Наш метод дает достаточные объемы молока для различныхприложений.
Protocol
Representative Results
Discussion
Мышь
Есть несколько факторов, чтобы принять во внимание при сборе молока от мыши, в том числе 1) количество времени, отведенных для сбора, 2) дозу окситоцина вводили, 3), сколько щенков плотина в настоящее время ухода и 4) сумма времени, которое прошло с родов во врем?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
These experiments were funded by the NIH grant #RAI093634A. We express immense gratitude to Jenny Powers, DVM, PhD, for her assistance in muntjac milking.
Materials
| Materials-Mouse | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Ketamine (KetaVed 100 mg/mL) (dose: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazine (TranquiVed 100 mg/ml) (dose:5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Eye lubricant | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materials- Muntjac | |||
| Name of Material/Reagent | Vendor | Catalog Number | Comments |
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | optional: researcher can either use Midazolam on its own or BAM combination as an anesthetic |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadine HCl (0.07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezol hydrochloride (Antisedan) (dose: 0.25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IU/kg) | Vet One | 501013 | |
| Equipment- Mouse | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μL pipette tips | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml syringes | MWI | 005427 | |
| 27 gauge needles | MWI | 002031 | |
| Equipment- Muntjac | |||
| Name of Equipment | Vendor | Catalog Number | Comments |
| 15 ml conical tubes | VWR | 21008-918 | |
| 22 gauge needles | MWI | 873 | |
| 3 ml luer lock syringes | MWI | 001377 |
References
- Dueling, S. . Muntiacus reevesi. Animal Diversity Web. , (2004).
- Pei, K., Taber, R., O’Gara, B., Wang, Y. Breeding cycle of the Formosan Reeves muntjac (Muntiacus reevesi micrurus) in northern Taiwan, Republic of China. Mammalia. 59 (2), 223-228 (1995).
- Browning, S. R. Transmission of prions from mule deer and elk with chronic wasting disease to transgenic mice expressing cervid PrP. J. Virol. 78 (23), 13345-13350 (2004).
- Van de perre, P. Transfer of antibody via mother’s milk. Vaccine. 21 (24), 3374-3376 (2003).
- Maden, C. Genetically modified mice produce human milk protein. BioNews. , (2009).
- Rodgers, C. T. Practical aspects of milk collection in the rat. Lab. Anim. 29 (4), 450-455 (1995).
- Depeters, E. J., Hovey, R. C. Methods for collecting milk from mice. J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 14 (4), 397-400 (2009).
- Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. Milk yield and composition in mice: effects of litter size and lactation. 84 (1), 127-133 (1986).
- Hedrich, H. J., Bullock, G. R. The laboratory mouse. , 735-736 (2004).
- Nishimori, K., Young, L. J., Guo, Q., Wang, Z., Insel, T. R., Matzuk, M. M. Oxytocin is required for nursing but is not essential for parturition or reproductive behavior. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 93 (21), 11699-11704 (1996).
- Miller, B. F., Osborn, D. A., Lance, W. R., Howze, M. M., Warren, R. J., Miller, K. V. Butorphanol-azaperone-medetomidine for immobilization of captive white-tailed deer. 45 (2), 457-467 (2009).
