Trace Fear Conditioning i Mus

Summary

I det følgende eksperiment beskriver vi en protokoll for spor frykt kondisjonering på mus. Denne type assosiativ hukommelse omfatter et spor for å skille den nøytrale stimulus og det ubetingede stimulus.

Abstract

I dette forsøket viser vi en teknikk for å måle læring og hukommelse. I sporet frykt condition protokoll som presenteres her er det fem motstandere mellom en nøytral stimulans og en ubetinget stimulus. Det er en 20 sek spor periode som skiller hver condition rettssaken. På den påfølgende dagen frysing måles under presentasjonen av den betinget stimulus (CS) og spor periode. På den tredje dagen er det en 8 min test for å måle kontekstuell hukommelse. De representative resultatene er fra mus som ble presentert med motvilje ubetinget stimulus (sjokk) sammenlignet med mus som fikk tone presentasjoner uten ubetinget stimulus. Trace frykt condition har blitt brukt til å oppdage subtile læring og hukommelse underskudd og forbedringer i mus som ikke finnes med andre frykt condition metoder. Denne type frykt kondisjone antas å være avhengig av forbindelser mellom den mediale prefrontale cortex og hippocampus. En strøm kontrovers er om denne metoden er antatt å være amygdala-uavhengig. Derfor er andre frykt kondisjone testing er nødvendig for å undersøke amygdala-avhengige læring og hukommelse effekter, for eksempel via forsinkelses frykt kondisjonering.

Introduction

I frykt condition en nøytral stimulus (NS) er sammenkoblet med en ubehagelig ubetinget stimulus (US). NS er normalt en tone og blir en betinget stimulus (CS) gjennom gjentatte paringer med USA. Den CS kan deretter fremkalle en betinget respons (CR), slik som frysing, i fravær av motvilje USA. En vanlig brukt frykt condition protokollen er forsinkelse condition. I denne protokollen utbruddet av NS og USA er sammenhengende eller med noe overlapping i stimulus-presentasjon. Selv om forsinkelse frykt condition er en av de mest brukte typer time assosiativ condition, er det flere andre typer assosiativ condition timelige ordninger: samtidig condition, bakover condition, og spor condition ^en. I spor frykt kondisjone er det en stimulus fritt intervall mellom NS og USA på flere sekunder resulterer i et "spor"-perioden.

Flere studier har rapportert underskudds i spor frykt condition når nevrotoksiske lesjoner er produsert i de strukturer som innspill til hippocampus ^2-5 eller når farmakologiske midler brukes til å blokkere reseptor funksjon i hippocampus. Lesjon til hippocampus resultatene i underskudd i spor condition og kontekstuell condition, men ikke svekke forsinkelse frykt condition ^åtte. Det er flere fordeler ved å bruke spor frykt condition. Frykten condition-protokollen kan oppnås over en tre-dagers testperiode og gir mulighet for hippocampus-avhengig hukommelse som ikke er romlig avhengig. Spor frykt kondisjone kan brukes som en komplementær test til Morris vannlabyrint, nye objekt anerkjennelse test eller andre labyrint prøver i undersøke hippocampal-avhengige minne.

Protocol

Musene som brukes i følgende eksperiment ble generert og plassert ved Baylor University i en omgivelsestemperatur på 22 ° C, med en 14 timers lys og 10 timer mørke (20:00-06:00 hr) dagaktive syklus. Musene ble gitt ad libitum tilgang til mat og vann. Alle prosedyrer til musene var i samsvar med National Institutes of Health Retningslinjer for omsorg og bruk av forsøksdyr og dyr protokollen ble godkjent av Baylor University Animal Care og bruk komité. Oversikt <p class="jove_c…

Representative Results

For de representative resultatene presenterer vi data fra kontroll C57BL/6J voksne mus som fikk de nøytrale stimulus motstandere med den ubetingede stimulus (sjokktilstand) sammenlignet med mus som fikk den nøytrale stimulus, men ikke fikk det ubetingede stimulus (ingen sjokktilstand). Det er viktig å kjøre denne tilstanden når den først setter opp denne adferdstest for å avgjøre om protokollen har blitt utført riktig. Dataene i figur 1 representerer trening dagen i…

Discussion

Det har vært flere studier som har belyst den nevrale kretser som ligger til grunn spor frykt condition. Trace frykt condition antas å involvere CA1 av hippocampus ^12-14. Det er også bevis for at den mediale prefrontale cortex (mPFC) spiller en stor rolle i spor øye-blink kondisjonering ^15, og mPFC har blitt funnet å være involvert i spor frykt kondisjonering. En studie fant at mPFC nevroner gi varig aktivitet i løpet av spor periode, og dermed gi en struktur som kan opprettholde minnet unde…

Materials

FreezeFrame	Coulbourn
30% Isopropanol			Purchase 90% isopropanol and dilute it down to 30%
70% Ethanol
Amp-meter	Med-Associates	ENV-420	Windows XP, Vista, and 7 Compatible (32-bit only)
Digital Sound Level Meter		33-2055
Vanilla Extract	McCormick Pure Vanilla Extract
Sticky Notes	Post-it		3X3 inch