Summary
Cerrahi stres bir fare tümör modeli postoperatif immün baskılanması metastatik hastalık teşvik nasıl keşfetmek ve ımmunostımulator perioperatif tedavilerin değerlendirilmesi için kullanılır.
Abstract
Cerrahi rezeksiyon çok kanserli hastalar için önemli bir tedavi, ancak ameliyat bağışıklık sistemi bozukluğu neden olur ve bu, hayvan modellerinde ve kanserli hastalarda metastatik hastalık gelişimi ile bağlantılı olmuştur. Grubumuzun ve diğerlerinden preklinik çalışma doğuştan gelen bağışıklık fonksiyonu, postoperatif dönemde özellikle NK hücreleri derin bastırılmasını gösterdi ve bu ameliyat sonrasında metastaz gelişmiş gelişiminde önemli bir rol oynar. Nispeten az sayıda hayvan çalışmaları ve klinik çalışmalar karakterize ve kanser cerrahisi zararlı etkilerini tersine odaklanmıştır. Kendiliğinden metastaz yapan tümörlerin ve cerrahi stres sıkı bir hayvan modelini kullanarak, akciğer metastaz gelişimi, kanser cerrahi iyileştirme gösterilmiştir. Bu modelde, 4T1 göğüs kanseri hücreleri, fare meme yağ tabanına implante edilir. 14. gün, tümör implantasyonu olarak, primer meme tümör tam bir rezeksiyon performe olduğuTüm hayvanlarda d. Hayvanların bir alt karın nefrektomi şeklinde ek cerrahi stres alır. 28. günde, akciğer tümör nodülleri nicelendirilir. Immünoterapi hemen ameliyat öncesi verildiğinde, ameliyat sonrası metastaz gelişimini önlemiş bağışıklık hücrelerinin derin bir aktivasyon tespit edildi. 4T1 göğüs tümör cerrahisi modeli tümör metastaz abdominal cerrahi stres etkilerinin simülasyonu için sağlar, diğer tümör türleri uygulanabilirliği test edilmesi gerekmektedir. Mevcut sorun preklinik fare modellerinde güvenli ve umut verici immünoterapiler belirlemek ve metastatik hastalığın tekrarını önlemek için kanser cerrahisi hastalara verilecek uygulanabilir perioperatif tedavilerin içine çevirmek için.
Introduction
Cerrahi solid tümörlerin küratif kanser tedavisinde önemli bir bileşeni olduğunu, ama tam rezeksiyon rağmen, birçok hasta metastatik nüks geliştirmek ve sonuçta hastalık nedeniyle ölmektedir. Giderek, ameliyat sonrası süre, kan pıhtılaşması, büyüme faktörleri serbest bırakılması, ve bağışıklık kaybı da dahil olmak üzere cerrahi fizyolojik stres tepkisi, bir sonucu olarak, metastaz gelişimi için önemli bir zaman olarak kabul edilmektedir. Bizim grup 1,2 ve diğerleri 3-5 ameliyattan hemen sonraki süre metastaz oluşumu için benzersiz bir zaman duyarlı olduğunu göstermiştir.
Cerrahi prometastatic etkilerinden sorumlu en önemli mekanizmalardan biri, doğal katil (NK) hücreler, 1-3 ameliyat sonrası işlev bozukluğudur. NK hücreleri, tümör büyümesi ve metastaz 6 kontrolünde dahil olan doğuştan gelen bağışıklık sistemi sitotoksik lenfositlerdir. Ameliyat sonrası NK hücre fonksiyon bozukluğu i belgelenmiştirn insan hasta 1,7-9 ve hayvan modellerinde hem de 1,10,11. Insan çalışmalarında, perioperatif dönemde düşük NK aktivitesi kanser nüksü ve mortalite 15,16 daha yüksek bir oranı ile ilişkili iken ameliyat sonrası NK hücre bastırma, spontan ve implante metastaz 1,11-14 hayvan modellerinde artmış metastaz ile ilişkilidir.
Buna rağmen, özellikle hemen kanser cerrahisi sonrası meydana prometastatic değişiklikleri ele hiçbir kanser tedavileri şu anda var. Perioperatif süresi metastatik sürecine müdahale için hangi bir terapötik fırsat penceresi temsil eder. Bu tür sitotoksik kemoterapi gibi geleneksel kanser tedavileri, büyük cerrahi sonrası iyileşme 17 hastalara tatbik edilmesi için çok toksik olarak kabul edilir olsa da, bağışıklık tedavileri perioperatif uygulama için ideal adaylardır. Rekombinant IL-2 ve IFN-Î ³ perioperatif kullanımı i araştırılmıştırn Erken evre ameliyat sonrası NK hücre baskılanmasını önlemek ve progresyonsuz sağkalım 18-21 geliştirmek için kendi potansiyelini gösteren klinik çalışmalar. Ne yazık ki, daha da geliştirilmesi büyük bir ameliyat 17 ile birleştirilir, bu non-spesifik sitokin tedavinin tolere tarafından engellenmiştir. Virüsler de NK hücrelerinin güçlü özel olmayan aktivatörleridir. Araştırmamız daha önce bu yeni anti-kanser onkolitik virüs (OV) ve bu influenza aşısı gibi aşılar viral replikasyon yapmayan olarak taklit eden virüsler, ameliyat öncesi uygulama ameliyat kaynaklı NK hücre faaliyetinin bozukluğu, inhibe etmek ve metastatik hastalık 1,22 azaltmak olduğunu göstermiştir.
Bu yazıda anlatılan cerrahi modeli ameliyattan sonra tümör hücrelerinin yayılmasını ve büyüme ile ilgili mekanizmaların anlayışımızı kolaylaştırdı ve bize perioperatif dönemde uygulanabilir yeni hedefli tedaviler keşfetmek için izin verdi. Bu amacı gerçekleştirmek için, bir hayvangelişen cerrahi stres ve spontan metastaz tomar modeli. Kendiliğinden akciğerler, özellikle birden fazla uzak siteler için birinci meme bezinden metastaz edebiliyoruz - modeli fare meme karsinoma tümörü (4T1 BALB / c) 'nin kullanımını sağlar. 0. günde, göğüs kanseri hücreleri, fare meme yağ tabanına implante edilir. 14. gün, tümör implantasyonu olarak, primer meme tümör tam bir rezeksiyon bütün hayvanlarda gerçekleştirilir. Hayvanların bir alt karın nefrektomi şeklinde ek cerrahi stres alır. 28. günde, akciğer tümörü nodüller ameliyatla vurguladı ve karşılaştırıldığında hiçbir cerrahi kontrol fareler izole ve ölçülür. Kanser ve cerrahi bu hayvan modelinde, kanser metastazları üzerine cerrahinin etkileri incelenmiştir ediliyor ve viral bazlı bağışıklık uyarıcılar kopyalayan ve replikasyon gibi yenilikçi imünoterapiler, perioperatif yönetim etkinliği ilk kez test edilir.
Protocol
1.. In vitro olarak tümör 4T1 hücreleri korumak
- Bitmiş DMEM içinde kültür 4T1 modifiye edilmemiş tümör hücreleri (DMEM,% 10 FBS, 1 x penisilin / streptomisin yok), 10 cm doku kültür plakaları içinde. 37 ° C,% 5 CO2 doku kültürü inkübatöründe inkübe edin.
- Bölünmüş kültürleri 2-3 kez / hafta. Optimum yaşayabilirliği Hücreler% 80 izdiham aşmamalıdır korumak için. Kültürler> 1 ay boyunca in vitro pasajlanmışlardır edilmiş ise bu daha erken pasajlanır hücrelerden daha malignite ve metastatik potansiyel azalır gibi in vivo primer tümörleri kurulması için hücreler kullanmayın.
2. Enjeksiyon için Hasat 4T1 Tümör Hücreleri
- Bir Pasteur pipeti kullanılarak doku kültürü plakasının aspire kültür ortamı.
- 2 ml EDTA ihtiva eden steril PBS 1x 10 ml ilave edilir. PBS çözeltisi, 37 ° C'de, 5-7 dakika boyunca% 5 CO2 doku kültürü inkübatöründe de bir plaka içerisinde inkübe olsun.
- Plaka, r Hasat PBS çözümçözeltisi ile plaka 2-3x insing, 15 ml konik tüp aktarın.
- Bir tezgah üstü santrifüj içinde 4 ° C'de 500 x g'de 5 dakika için, hücreler santrifüj.
- Süpernatan aspire ve serumsuz DMEM hücre pelletini.
- Bir hücre sayacı kullanarak hücre konsantrasyonunu belirleyin.
- Buz üzerinde enjeksiyon yeri ve hücreler için 6 cells/500 ul (1x10 5 s/50 ul (1x10 için serum içermeyen ortam ile hücrelerin seyreltin.
3. 4T1 hücreleri ile tümör enjekte Mice
Gerçekleştirilen tüm hayvan çalışmaları kadavradan enjeksiyonları ya da tümör implantlar alan tüm hayvanlar için Ottawa önerilerin Üniversitesi Hayvan Bakımı Veteriner Hizmetleri, kurumsal kurallarına uygun idi.
- Buprenorfin (0.05 mg / kg), ağrı yönetimi için ameliyattan önce 1 saat ile deri altından fareler davranın.
- Tetikleyebilecek ve enjeksiyon süresi boyunca% 2.5 izofluran ile anestezi altında fare korumaktion. Refleks tepki algılamak için fare Kapkaççı çimdik. Hiçbiri tespit edilirse, etkili anestezi seviyeleri ulaşılır. Yağlayıcı madde bundan sonra steril göz kornea kurumasını önlemek için uygulanır.
- 30 G yükleyin ½ hücreleri süspansiyon tam 50 ul "Ultra-ince" Şırınga içinde. , Tüm hava kabarcıkları hava kabarcıklarını çıkarmak için şırınganın yan dokunarak şırınga sütundan çıkarılır emin olun.
- Ventral yüzü (anestezi altında) fare yerleştirin.
- Bir alkol çubukla kullanarak enjeksiyon bölgesini temizleyin ve 4 meme yağ yastığı içine yatay ve doğrudan iğne tanıtmak, yavaş yavaş şırınga hacminin dağıtımı.
- Olası sızıntıyı temizlemek için pamuklu çubuk kullanın.
- Fareler anestezi kurtarmak için izin verin.
- Buprenorfin ağrı yönetimi uygulanabilir sc 2 gün süre ile her 8 saat için (0.05 mg / kg) koruyun.
4. BALB / c Fare Rulman 4T1 Tümör Perioperatif Tedavi Yönetme
- 13 gün sonrası tümör hücre enjeksiyonu de, harici bir kumpas kullanılarak primer tümör ölçmek. Çap pergeli ile en büyük uzunlamasına çapı (boy) ve en büyük enine çapı (en) ölçün. Modifiye edilmiş elipsoid formülü tümör hacmi hesaplamak için kullanılır (tümör hacmi = 1/2 (uzunluk, genişlik 2)
- 13 gün sonrası tümör hücre enjeksiyonu anda, primer tümör yaklaşık 1 cm 3 ölçmek gerekir. Bu tümör ölçümü elde edildiğinde, perioperatif tedavi reaktifi hazırlayın.
- Onkolitiktir virüs bir perioperatif dönemde yönetebileceğiniz bir yenilikçi tedavi edilir. Enjeksiyondan önce buz üzerinde 1x steril PBS ve yerine onkolitik virüs (1x10 9 PFU / 1 ml) hazırlayın.
- Güvenli ve yer fareintravenöz kuyruk ven enjeksiyon için süzgeç içine.
- Yavaşça lateral kuyruk damarları görselleştirmek için ılık musluk suyu fare kuyruğu ısı.
- 27 G Yük ½ "İnsülin Şırınga" in Onkolitik virüs tedavisi tam 100 ul. Tüm hava kabarcıkları şırınga sütununda kaldırılır emin olun.
- Lateral kuyruk damarlar birine 1x10 8 PFU/100 ul / fare fare ile enjekte edilir. İğne uygun bir yan damar içine takılırsa şırınga karartıcı zaman, hiçbir direnç keçe olmalıdır.
5. Primer tümör ve karın sol nefrektomi komple rezeksiyonu
- 14 gün sonrası tümör hücre enjeksiyonu anda, Ottawa Hayvan Bakım ve Veteriner Servisi Üniversitesi onaylanan protokollerde aşağıdaki rutin perioperatif başlatmak. Buprenorfin (0.05 mg / kg), ağrı yönetimi için ameliyattan önce 1 saat ile deri altından fareler davranın. Neden ve ameliyat sırasında% 2.5 izofluran kullanılarak anestezi korumak. Under koşulları ve steril cerrahi aletler kullanarak sterilize, cerrahi alan traş ve kotarılmış. Hayvanlar ameliyat öncesi deri altı sıvıları ve göz yağ tatbik edilmektedir.
- Yavaşça ve tamamen meme yağ pedi birincil 4T1 tümör kaldırmak için, küçük bir kesik (1-2 cm uzunluğunda) olun.
- 02-03 Eylül mm zımba ile kesi kapatın.
- Fare ventral orta hat boyunca deri ve deri altı tabakası ile kesim tarafından karın Açığa.
- Fare peritonunu erişmek için linea alba (3-4 cm) bir kesi olun.
- Tarafına örten bağırsakları hareket ettirerek karın sol iç tarafını ortaya. Bağırsaklar tuzlu ıslatılmış steril gazlı bez ile nemli tutulur emin olun.
- Cerrahi forseps bir künt çifti kullanarak, yavaşça sol böbrek kavramak.
- Bir döngü içine bağlı bir 3-0 balmumu kaplı örgülü ipek sütür kullanılarak, sol böbrek hilusu Arter ve 3 cerrahi knot ile sabitleyin. Surgi ile sol böbreğical makas.
- Yeterli hemostaz elde emin olmak için dikkatlice dikiş kravat inceleyin.
- 9 mm zımba kullanarak 5-0 örgülü emilebilir, ardından zımba cilt katmanı kullanarak sürekli bir döngü dikiş ile cilt altı katmanı kapatın. 5,2-5,10 10 dk / hayvan gerektiren gereken adımlar.
- Buprenorfin ağrı yönetimi uygulanabilir sc 2 gün süre ile her 8 saat için (0.05 mg / kg) koruyun.
6. Euthanizing Fareler ve İşleme ve Akciğer Tümör Yükü Kantitasyonu
- 4T1 tümör enjeksiyonundan sonrası 28 günde, Ottawa Üniversitesi Hayvan Bakım ve Veterinerlik Hizmetleri protokole göre fareler euthanize.
- % 70 etanol ile fareyi aşağı Sprey.
- Sadece göğüs kafesinin altında bir makas ile ilk kesi olun.
- Fare göğüs boşluğunun ventral orta hat boyunca deri ve deri altı tabakasının içinden keserek göğüs Açığa.
- NE her tarafı yukarı deri ve doku ile yanal kesiler yapmakfare ck.
- Akciğerler üstünde ve altında bağ dokusu kırpma sırasında hafifçe akciğer tutarak akciğerleri parçalara ayır.
- Hammaddesi,% 10 tamponlu formalin içine yerleştirmek, sonra kalıntı kan temizlemek için soğuk PBS akciğer ekstre edilmiştir.
- Tümör metastaz değerlendirilmesi için her akciğeri fotoğraf. Tümör yükü ölçümü için akciğerlere tartılır.
Representative Results
Akciğer metastaz dramatik geliştirilmesi ile sonuçlanan bir cerrahi stres tekrarlanabilir fare modeli geliştirilmiştir. Gün 28 görevde 4T1 tümör aşılama (ve 14 gün tümör rezeksiyonu + / yayınlamak - abdominal nefrektomi), akciğerler hasat ve metastaz için görüntülenmiştir. Cerrahi açıkça akciğer fotoğrafların (Şekil 1A), akciğer nodüllerin sayımı (Şekil 1 B) ve akciğer ağırlığı (Şekil 1 C) ile gösterildiği gibi, tedavi edilmemiş fareler ile karşılaştırıldığında akciğer metastaz miktarını artırır. Onkolitiktir virüs ve inaktif influenza aşısı kopyalayan preoperatif uygulamasının önemli ölçüde kanser cerrahisi prometastatic etkilerini (Şekil 1A-C) kurtarır.
NK hücreleri, metastaz sonrası aşı tedavisi önlenmesinde bir aracı rolü olmadığını belirlemek için, NK hücreleri, farmasötik olarak tümör metastazı modelinde anti-asiolo-GM-1 ile tüketildi. NK yokluğundaHücreler, biz perioperatif immünoterapilerin terapötik etkisinin bir ortadan kaldırma (Şekil 2A ve 2B) görülmektedir. Bu veriler cerrahi stres modelinde tümör metastaz giderme temel olarak NK hücrelerinin onkolitik virüs grip aşısı aktivasyon ve takip eden NK aracılı tümör lizis aracılık olduğunu göstermektedir. Daha fazla onkolitik virüs grip aşısı perioperatif uygulanmasından sonra NK hücresi fonksiyonunu karakterize etmek için, ex vivo NK hücre öldürme değerlendirildi. Kısaca, bir araya getirilmiş ve kriteri DX5 + NK hücrelerinin splenositlerinden cerrahi stresli ve kontrol fare izole edilmiştir. Bunlar, bir gama sayacı ile yüzer krom Yayım ölçülmesi ile takip oranları, hedef farklı efektör, krom etiketli YAC-1 hedef hücrelere birlikte 4 saat boyunca kültüre edilmiştir. Onkolitik virüs ve iltihaplanma perioperatif uygulanmasından sonra NK öldürmenin önemli bir iyileşme yanı sıra NK hücre sitotoksisite belirgin bir cerrahi kaynaklı kusuruenza aşı, tek başına cerrahi ile karşılaştırıldığında (Şekil 2C ve 2D) gözlenmiştir. Birlikte ele alındığında bu sonuçlar, ameliyat NK hücresi bastırma başarılı bir şekilde tedavi edilebilir ve metastatik hastalık yeni immünostimülatör tedaviler ile azalttığını göstermektedir.
Şekil 1. Akciğer metastazı temsil akciğerlerin (A) fotoğraflar, (B), akciğer tümörü sayım ile belirtilen tedavi gruplarının 28. günde 4T1 akciğer tümör metastazı. Değerlendirilmesi cerrahi kaynaklı geliştirme karşı perioperatif tedavi olarak yeni anti-kanser onkolitik virüs ve influenza aşısı nodüller ve (C) akciğer ağırlıkları. Veriler, bitiş ile 3 benzer bir deneyi temsil etmektedir, n = 5-10/group (*, p = 0.01; **, p <0.0001; ns) anlamlı değil. , bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınız.
Şekil 2. Cerrahi stres NK hücrelerini bozarak akciğer tümör metastazı arttırır. (A, B) akciğer tümör metastazı miktarının yeni cerrahi ameliyat ile tedavi fareler vurgulamıştır. (C, D) cerrahi olarak saflaştırılmış DX5 + NK hücrelerinin yeteneği stresli ve tümör hücrelerini öldürmek için muamele edilmemiş kontrol eder. T oranları: Belirtilen E için üç kopya halindeki gözlerin krom salınım - (SD + /) veriler ortalama yüzdesi olarak gösterildi. . Veriler 3 'e benzer deneyler n = 4-5/group (, **, p <0.005; ns, anlamlı değil *, p = 0.01) arasında temsilcisi/ Www.jove.com/files/ftp_upload/51253/51253fig2highres.jpg "target =" _blank "> bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için buraya tıklayınız.
Discussion
Cerrahi rezeksiyon lokalize katı malignitesi olan hastalar için tedavinin dayanak noktası. Hatta tam rezeksiyon ile, birçok hasta metastatik nüks geliştirmek ve sonuçta hastalık nedeniyle ölmektedir. Ameliyattan hemen sonra ameliyat sonrası dönem NK hücresi bastırma ile büyük ölçüde modüle kanser metastaz oluşumu, için ideal bir ortam sağlar. Buna rağmen, büyük ölçüde göz ardı edilir bir terapötik pencere kalır. Postoperatif metastazı önlemeyi amaçlayan hiçbir standart perioperatif anti-kanser tedavileri bulunmamaktadır. Mevcut sorun, böylece mikrometastatik hastalığın kurulmasını engelleyen perioperatif dönemde NK hücrelerini aktive edecek, güvenli ve umut verici tedavilerin tespit etmektir. Bu tedaviler titizlikle preklinik hayvan modellerinde güvenlik ve etkinlik için karakterize ve sonra düşünceli tasarlanmış klinik çalışmalarda tercüme edilmelidir.
Birincil oranıcerrahi stres bir fare tümör modeli geliştirme nale cerrahi sonrası bağışıklık bastırma ve metastatik yayılım mekanizmalarını keşfetmek ve primer tümörü çıkarmak için ameliyat geçiren, kanser hastalarında gelecekteki kullanım için potansiyeli olan yenilikçi immünoterapiler değerlendirmektir. Bu amacı gerçekleştirmek için, cerrahi stres ile birleştiğinde bir 4T1 kemirgen meme kanseri modeli geliştirilmiştir. 4T1 hücre çizgisi bir kemirgen "meme kanseri" olsa da, bu hücre hattı kullanmak için neden bize gerçekçi kanseri modelinde cerrahi stresin etkilerini değerlendirmek olanak spontan metastaz uyarlık olduğunu. Bu bağlamda, malignite gerçek köken metastatik potansiyelini ve tümör biyolojisi daha az önemlidir. Bizim modelin ikinci önemli bileşeni yakın insan kanser ameliyatı andıran bir hayvan cerrahi işlemin gelişmedir. 1 cm 3 ulaşır sonra bu hayvan cerrahi stres modelinde, birincil 4T1 meme tümör eksize edilir. Çünküİnsan kanser hastalarında cerrahi önemli bir bağışıklık bastırma, "ameliyat stres" tedavi gruplarında açık bir karın nefrektomi içeren ek gerçekleştirilir. Insanlarda daha geleneksel tümör rezeksiyonu ile karşılaştırır gibi, tam bir sol nefrektomi invaziv kolorektal kanseri, yumurtalık kanseri, böbrek kanseri, pankreas kanseri, akciğer ve yemek borusu cerrahisi dahil olmak üzere katı maligniteler için cerrahi tedavi çok sayıda türleri, çok karşılaştırılabilir kanseri. Buna ek olarak, biz laparotomi + nefrektomi nedeniyle perioperatif meydana derin fizyolojik değişiklikler, yeterince en sağlam malinitelerin invaziv cerrahi sonrası ortaya ezici fizyolojik değişiklikleri üretir iddia ediyorum. Aşırı cerrahi stres ve ölümlülük, anestezi süresi ve cerrahi yol ve ameliyat sırasında vücut ısısını korumak olabilir perioperatif faktörleri kontrol etmek için tam olarak tanımlanır. Tüm bu parametreler tam bir yürütülürd insan kanser hastalarında rutin perioperatif ayna bizim cerrahi protokolde tanımlanmış.
Perioperatif tedavi zamanlaması perioperatif kurtarma modeli için ek bir önemli bileşenidir. 4T1 tümör taşıyan farelere önce influenza aşısının 3 rejimleri ile muamele edilmiştir: Neoadjuvant (ameliyattan önce 5 gün verilir), ameliyat sırasında (cerrahi aynı günde verilir) ve cerrahi gününde verilen perioperatif + dozlu (bunu takiben de 2 Ek doz) 5 gün arayla verilmedi. Dikkate değer, aşı tedavisi 3 modları anlamlı akciğer metastazları, 22 azalmıştır. Ancak, influenza aşısı en etkili bir şekilde tek bir doz, düşük metastaz olarak perioperatif olarak verilir. Topluca, bu deneyler metastatik sürecine müdahale için dar bir terapötik pencere olarak hemen perioperatif dönemin önemini vurgulamak.
Böyle oncoly gibi yenilikçi immunoterapilerin perioperatiftik virüs aşıları ve münhasıran araştırma grubu ile sınırlı kalmıştır. Bu yeni onkolitik ORF ve ineklerdeki çiçek hastalığı virüsleri, perioperatif uygulanması hayvan modellerinde 1 'de ameliyat sonrası NK hücresi bastırma ters ilk defa burada gösterilmektedir. Daha da önemlisi, bağışıklık fonksiyonunun bu kurtarma metastaz postoperatif oluşumunda bir azalma ile ilişkilidir. Insan çalışmalarında, ameliyat sonrası kanser cerrahi hastalarının NK hücre toksisitesini azalmıştı ve perioperatif OV belirgin kanser hastalarında 1 NK hücre aktivitesini artırır. Ticari olarak temin edilebilen profilaktik aşılar kullanılarak, perioperatif influenza aşısı yönetim önemli ölçüde tümör metastazı azalır ve klinik öncesi modellerde tümör NK hücre sitotoksisitesini iyileştirdiğini göstermektedir. İnsan çalışmalarda, influenza aşısı önemli Sağlıklı insan donörlerden ve kanser hastalarında cerrahi 22'de NK hücre aktivitesini geliştirdi.
Birçok yaklaşımlar Canc azaltmak için kullanılırKemoterapi ve radyasyon, ancak bu tedavilerin de dahil olmak üzere er nüks genellikle (neoadjuvan) önce veya (adjuvan) cerrahi sonrası aylar hafta uygulanır. Bu alanda yapılan araştırmalar erken postoperatif dönemi uzun vadeli tümör nüks oranlarının belirlenmesinde kritik olduğunu göstermektedir. Bu nedenle, bu kritik dönemde immunoterapilerin şeklinde klinik müdahaleler önemli uzun vadeli faydalar olabilir. Spontan akciğer metastazı ve cerrahi stres bir fare modeli kullanılarak çalışmalarımız yeni tedaviler keşfetmek ve kanser cerrahisi hastalarında perioperatif immünosupresyonu önlemek ve böylece de kanser nüks oranlarını azaltmak için kendi potansiyelini belirlemek için eşsiz bir fırsat sunmaktadır.
Disclosures
Yazarlar herhangi bir mali çıkarlarını beyan.
Acknowledgments
Yazarlar hayvan ameliyatları ile yardım için Kim Yates, Eileen Franklin ve Rebecca Tjepkema (Hayvan Bakım ve Veterinerlik Hizmetleri, Ottawa Üniversitesi) teşekkür etmek istiyorum. Lee-Hwa Tai bir Fonds de recherche sante Quebec Bursu tarafından desteklenmektedir. Rebecca Auer Lider'in Fırsat Grant - Bu çalışma Kanada Kanser Topluluğu Araştırma Enstitüsü Yenilik Grant, Araştırma ve Geliştirme Erken Araştırmacı Ödülü Ontario Bakanlığı, Yenilik ve Kanadalı Vakfı faaliyet hibe tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) | Corning Cell-Gro | 10-013-CV | |
| Inactivated Fetal Bovine Serum (FBS) | HyClone | SH30396.03 | |
| Penicillin/Streptomycin | Gibco | 15070-063 | |
| 1x Sterile Phosphate Buffered Saline (PBS) | Corning Cell Gro | 21-031-CV | |
| Buprenorphine | Chiron, Guelph | RXN309968 | |
| Isoflurane | Baxter Corp | 1001936040 | |
| 1/2 Ultra-fine syringe | Terumo | 30 G, SS05M3009 | |
| 9 mm Staples | Braintree | ACS BX | |
| 5-0 Braided absorbable suture | Covidien | UL-202 | |
| 3-0 Wax braided silk suture | Covidien | S-194 | |
| Formalin | Fisher | SF100-20 | |
| 4T1 Tumor cells | ATCC | CRL-2539 | |
| BALB/c mice | Charles Rivers Labs | Strain Code:028 |
References
- Tai, L. H., et al. Preventing postoperative metastatic disease by inhibiting surgery-induced dysfunction in natural killer cells. Cancer Res. 73, 97-107 (2013).
- Seth, R., et al. Surgical Stress Promotes the Development of Cancer Metastases by a Coagulation-Dependent Mechanism Involving Natural Killer Cells in a Murine Model. Ann. Surg. , (2012).
- Shakhar, G., Ben-Eliyahu, S. Potential prophylactic measures against postoperative immunosuppression: could they reduce recurrence rates in oncological patients. Ann. Surg. Oncol. 10, 972-992 (2003).
- Shiromizu, A., et al. Effect of laparotomy and laparoscopy on the establishment of lung metastasis in a murine model. Surgery. 128, 799-805 (2000).
- Tsuchiya, Y., et al. Increased surgical stress promotes tumor metastasis. Surgery. 133, 547-555 (2003).
- Lanier, L. L.
- Espi, A., Arenas, J., Garcia-Granero, E., Marti, E., Lledo, S. Relationship of curative surgery on natural killer cell activity in colorectal cancer. Dis. Colon Rectum. 39, 429-434 (1996).
- Pollock, R. E., Lotzova, E., Stanford, S. D. Mechanism of surgical stress impairment of human perioperative natural killer cell cytotoxicity. Arch. Surg. 126, 338-342 (1991).
- Pollock, R. E., Lotzova, E., Stanford, S. D. Surgical stress impairs natural killer cell programming of tumor for lysis in patients with sarcomas and other solid tumors. Cancer. 70, 2192-2202 (1992).
- Ben-Eliyahu, S., Page, G. G., Yirmiya, R., Shakhar, G. Evidence that stress and surgical interventions promote tumor development by suppressing natural killer cell activity. Int. J. Cancer. 80, 880-888 (1999).
- Page, G. G., Blakely, W. P., Ben-Eliyahu, S. Evidence that postoperative pain is a mediator of the tumor-promoting effects of surgery in rats. Pain. 90, 191-199 (2001).
- Glasner, A., et al. Improving survival rates in two models of spontaneous postoperative metastasis in mice by combined administration of a beta-adrenergic antagonist and a cyclooxygenase-2 inhibitor. J. Immunol. 184, 2449-2457 (2010).
- Benish, M., et al. Perioperative use of beta-blockers and COX-2 inhibitors may improve immune competence and reduce the risk of tumor metastasis. Ann. Surg. Oncol. 15, 2042-2052 (2008).
- Goldfarb, Y., et al. Improving postoperative immune status and resistance to cancer metastasis: a combined perioperative approach of immunostimulation and prevention of excessive surgical stress responses. Ann. Surg. 253, 798-810 (2011).
- Tartter, P. I., Steinberg, B., Barron, D. M., Martinelli, G. The prognostic significance of natural killer cytotoxicity in patients with colorectal cancer. Arch. Surg. 122, 1264-1268 (1987).
- Fujisawa, T., Yamaguchi, Y. Autologous tumor killing activity as a prognostic factor in primary resected nonsmall cell carcinoma of the lung. Cancer. 79, 474-481 (1997).
- Guillot, B., Bessis, D., Dereure, O. Mucocutaneous side effects of antineoplastic chemotherapy. Expert Opin. Drug Saf. 3, 579-587 (2004).
- Deehan, D. J., Heys, S. D., Ashby, J., Eremin, O. Interleukin-2 (IL-2) augments host cellular immune reactivity in the perioperative period in patients with malignant disease. Eur. J. Surg. Oncol. 21, 16-22 (1995).
- Houvenaeghel, G., et al. Tolerance and feasibility of perioperative treatment with interferon-alpha 2a in advanced cancers. Int. Surg. 82, 165-169 (1997).
- Klatte, T., et al. Perioperative immunomodulation with interleukin-2 in patients with renal cell carcinoma: results of a controlled phase II trial. Br. J. Cancer. 95, 1167-1173 (2006).
- Oosterling, S. J., et al. Perioperative IFN-alpha to avoid surgically induced immune suppression in colorectal cancer patients. Histol. Histopathol. 21, 753-760 (2006).
- Tai, L. H., et al. Perioperative influenza vaccination reduces post-operative metastatic disease by reversing surgery-induced dysfunction in natural killer cells. Clin Cancer Res. , (2013).
