이 프로토콜은 재관류 다음 좌전 하행 동맥 (LAD)의 90 분 폐쇄 가슴 관상 동맥 풍선 폐쇄를 사용하여 돼지의 심근 경색 (MI) 모델에 대해 설명합니다. 또한, 이러한 심장 기능, 혈류 역학, 미세 혈관 저항 및 경색 크기 등 여러 가지 결과 매개 변수에 대한 프로토콜도 제공됩니다.
첫번째에서 사람이 시험에 새로 발견 된 심혈관 치료제의 도입은 엄격하게 규제 윤리적, 법적 로드맵에 따라 달라집니다. 한 가지 중요한 전제 조건은 유효 심근 경색 (MI)의 인간의 시나리오를 반영 큰 동물 모델에서 얻은 모든 안전성과 효능 측면을 잘 이해합니다. 자신의 심장의 크기, 혈류 역학, 관상 동맥 해부학은 인간에 가까운 때문에 돼지 널리이 점에서 사용된다. 여기서는 재관류 하였다 동맥 (LAD)를 좌전 하행의 폐쇄 가슴 관상 풍선 폐색을 이용한 돼지 MI 모델을 사용하기위한 효율적인 프로토콜을 제시한다. 이 방법은 앞쪽에, 중격 및 inferoseptal 벽의 큰 좌심실 경색을 유도, 심근 허혈의 90 분을 기준으로합니다. 또한, 우리는 심장 수축기 및 이완기 기능, hemodynami으로 심장에 다양한 정보를 제공하는 결과의 여러 조치에 대한 프로토콜을 제시CS, 관상 동맥 혈류 속도, 미세 혈관 저항 및 경색 크기. 이 프로토콜은 쉽게 다른 단계에서 새로운 cardioregenerative 생물학적 제제의 유효성 검사 (즉, 직접 급성 허혈성 모욕 후, 아 급성 설정에서 또는 만성 MI에 흉터 형성이 완료되면)에 대한 특정 요구 사항을 공부에 맞게 조정할 수 있습니다. 이 모델은 따라서 MI를 연구하는 유용한 번역 도구, 이후 불리한 리모델링 및 새로운 cardioregenerative 에이전트의 가능성을 제공합니다.
급성 심근 경색 (AMI) 및 만성 심부전 (CHF)와 같은 장기적인 후유증 뿌리깊은 환자의 예후 및 삶의 질에 영향을 미칠 커녕 우리의 유효한 의료 자원 1에 부과되는 높은 비용 감금. 서양 세계에서 CHF의 유병률은 케이스의 60 %가 주요 원인 2와 AMI의 결과입니다 ~ 그 중, 1 ~ 2 %로 추정된다. 혼자 미국에서 약 570 만 명의 환자는 1. 종합하면,이 숫자에 대한 강한 주장을 2030 년 연간 9백70억달러 상승 비용의 예측 세중으로, 2008 년 연간 의료 비용의 약 30,000,000,000달러를 차지 CHF 고통 , 빠른 번역, 정확하게 인간의 시나리오를 모방 재현하고 신뢰할 수있는 큰 동물 심근 경색 모델에 의존하는 새로운 cardioregenerative 치료법의 개발.
돼지 (SUS의 scrofa)는 점점 cardiovascu에 사용되는약리 및 독성 시험 3 고맙다 연구. translational 연구 도구로 이러한 성공에 대한 책임이있는 특성 중 하나는 인간의 마음 4,5와 심장 기능과 해부학에서의 유사성이다. 예를 들어, 돼지 심장 – 투 – 체중 비율, 심장의 크기와 관상 동맥의 해부학 적 분포는 모두 4 사람에게 매우 유사한 것으로 나타났습니다. 또한, 심근 대사, 전기 생리학 속성과 같은 AMI 등의 허혈성 모욕에 대한 응답은 인간의 상황 6,7와 계약의 높은 수준을 보여보고되었습니다. 궁극적으로, 임상 시험 신약 (IND)의 테스트를 위해 강력하고 지속 가능한 MI를 필요한 생산하는 표준화 된 MI-프로토콜을 상기 기준을 충족합니다. 여기, 우리는 그에 재현 할 심근를 작성, 재관류 다음에 좌전 하행 동맥 (LAD)의 90 분 폐쇄 가슴 관상 동맥 풍선 폐색을 사용하는 등의 표준화 된 모델을 제시farction anteroapical, 중격 및 좌심실의 inferoseptal 벽을 커버.
LAD의 관동맥 풍선 폐색 안전과 밀접하게 인간의 상황을 모방 한 새로운 심장 혈관 치료의 효능을 조사하는 데 사용할 수있는 돼지 재현하고 일관성있는 임상 MI 모델을 제공합니다. 도 5에 도시 된 바와 같이, 제시된 허혈 / 재관류 경색 모델은 더 초기의 허혈 / 재관류 손상은 모두 동일하다 반면 MI 및 사후 MI 리모델링의 상이한 위상을 조사하기 위해 맞추어 질 수있는 플랫폼을 제공한다.
여기에 설명 된 기술 프로토콜의 성공은 프로토콜의 가장 중요한 단계로 심근 허혈에 따라 달라집니다. LAD의 두 번째 대각선 분기에 풍선 말단의 정확한 위치는 높은 생존율을 보장하는 동안 적절한 경색 크기에 도달하기 위해 매우 중요합니다. 이 MI 모델을 기반으로, ~ 15 %의 사망률을 관찰하는 동안 광범위한 중앙과 전방, 중격 및 inferi의 꼭대기 부분CMR과 TTC 염색 (그림 2A와 2B)에 보이는 것과 같이 또는 벽으로 경색되었다. 허혈의 지속 기간은 원하는 경색 크기에 따라 조정될 수있다. 우리는이 프로토콜에 랜드 레이스 돼지를 사용하고 있지만, minipigs (즉, 괴팅겐 minipigs)은 일반적으로 심근 허혈 (예를 들어 150 분의 가림)의 긴 기간을 필요로합니다.
전임상 및 임상 MI 연구의 결과 분석은 종종 LVEF을 기반으로합니다. 낮은 LVEF 단단히 심혈관 사망에 대한 위험 증가와 관련되어 있지만, 이러한 프리로드 9로 hemodynamical 매개 변수에 따라 남아있다. 틀림없이, 몇 가지 개념 및 실제적인 제한이 LVEF가 좌심실 수축 기능의 글로벌 측정되는 것이 아니라 지역 개선 (10)을 반영 관련된, 평균 LV의 단지 15 %가으로 경색되어 없습니다. 따라서,이 모델에 사용 결과에 제안 된 조치의 다양한 측면에 있나 MI 및 사후 MI 리모델링하여 수사관에게 정확하게 여러 수준에 대한 새로운 치료법의 효능을 평가하는 수단을 제공한다.
임상 연습에 전임상 모델에서 번역을 최적화하기 위해, 우리는 큰 돼지 대신 minipigs를 사용하여 선택합니다. 혈역학 적 측정, 약물 투여 및 수술 장치는 쉽게 임상 연습과 교환 할 수있다. minipigs에 비해 큰 돼지는 비교적 많은 무게를 얻을 수 있습니다. 이는 장기적으로 문제가 일련의 결과 비교에 관해서는, 후속의 원인이 될 수 있습니다. 여성 Dalland 랜드 레이스 돼지 6 개월의 나이에 약 70 kg의 무게. 추적 기간 동안 풍부한 체중 증가를 방지하기 위해, 동물은 제한된 다이어트에 보관됩니다. (: 단백질 15.6 %, 지방 2.0 %, 섬유 14.8 %, 재 8.8 %, 칼슘 0.9 %, 인 0.57 %, 마그네슘 0.29 %, 칼륨 0.18 % 포함) 하루에 두 번 돼지는 사용자 정의 만든 저칼로리 식품 750g을받을 4 주에있는 무게 약 10kg을 얻을 수 있습니다.
e_content "> 맥콜과 동료는 이전에 돼지 (11)에 심근 경색에 대한 유사한 프로토콜을 발표했다. 상당한 중첩이 LAD에 대한 선호가 아닌 좌 회선 동맥 (LCX) 또는 우 관상 동맥 (RCA을 강조,이 프로토콜과 그들의 사이에 존재 RCA 경색이 높은 원치 않는 전도 장애의 가능성 (즉, 부비동 노드 장애, AV 노드 장애)를 동반하는 동안). 우리의 경험에서, LCX를 사용하여 전체 좌심실 경색 크기의 작은 범위가있다. 사이의 한 가지 차이점은 우리가 폐색 된 관상 동맥의 지혈의 90 분의 결과로 혈전 형성에 따라 노 리플 로우의 높은 속도를 관찰로 두 개의 프로토콜이 프로토콜의 증가 약물 혈소판 억제의 사용에 관한 것이다. 이러한 관찰과 일치한다 알려진 hypercoagulability 돼지 12에서 관찰. 맥콜은 헤파린, 생의 단일 고용량, 알약을 사용하여 제안하지만의 프로토콜은 혈전 합병증을 최소화하기 위해 수술을 통해 확산 여러 저용량 헤파린의 사용에 의존한다.요약하면, 우리는 첫번째에서 남자 임상 시험을 향한 필수적인 단계로 새로운 치료제를 연구하는 인간의 질병의 효과적인 재생 가능한 모든 위의 실제 큰 동물 모델을 활용하는 연구자 수있는 돼지 MI 모델을 제시한다.
The authors have nothing to disclose.
시스 Verlaan, 조이스 휘 세루, MEREL Schurink, 그레이스 크로프트는 친절하게 동물 실험과의 우수한 기술 지원을 인정합니다.
0.9% Saline | Braun | ||
6-0 Prolene | Ethicon | ||
Acetylsalicylic acid | 80 mg (Ratiopharm) | ||
Adenosine | 3mg/ml apotheek UMCU | ||
AdVantage PV loop system | Transonic Scisence | ||
Amiodarone | Cordarone I.V. (Sanofi) | ||
Amiodaron HCl (PCH) | |||
Amoxicilline/ clavulaanzuur | 500/50mg (Sandoz) | ||
Atropinesulfaat | 0,5 mg/ml (PCH) | ||
Bone Marrow Wax | Syneture | ||
Cardiac Defibrillator | Philips | ||
Clopidogrel | Clopidrogel 75A (Apothecon B.V.) | ||
Contrast agent | Telebrix | ||
Endotracheal tube | Covidien | ||
Fentanyl patch | Durogesic® 25 mcg/h (Janssen-Cilag) | ||
Fogarty catheter | Edwards Lifesciences | ||
Gadolinium | Gadovist | ||
Guidewire | Abbott | ||
Heparin | Leo | ||
I.V. cannula | Abbocath® (Hospira venisystems) | ||
Iodine | Jodiumtictuur 2% (Eurovet) | ||
Ketamine | Narketan® 10 Vétoquinol | ||
Midazolam | 5mg/ml (Actavis) | ||
Nitroglycerin | 1mg/ml Pohl Boskamp | ||
Pancuronium bromide | 2mg/ml | ||
Seldinger vascular sheath 8F | Arrow | ||
Sufentanil | 50 mcg/ml (Sufentanil-hameln) | ||
Swann-Ganz catheter | Criticath ref 680078 (Argon) | ||
Synolux | 250 mg (Pfizer) | ||
Tetra-polar catheter | Transonic Scisence | ||
Thiopental | 0,5 g (Inresa) | ||
Triphenyl-tetrazolium chloride | Merck | ||
Venofundin | Braun | ||
Vicryl 2-0 | Ethicon | ||
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