Akut beyin travması bugüne kadar yeterli bir tedavisi olmayan ciddi bir yaralanma olduğunu. Multiphoton mikroskopi uzunlamasına akut beyin travması gelişim sürecini inceleyerek ve kemirgenlerde terapötik stratejiler sondalama sağlar. Beynin in vivo iki foton görüntüleme ile incelenmiştir akut beyin travması iki model bu protokolde gösterilmiştir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Boyuna İki foton görüntüleme ile takip Farelerde Akut Beyin Travma
Bu makalede
Özet
Özet
Akut beyin travması genellikle farklı kazalarında baş hasar sonuçları ve nüfusun önemli bir kısmını etkiler de, bunun için etkin bir tedavisi henüz yoktur. Şu anda kullanılan hayvan modellerinin Sınırlamalar patoloji mekanizmasının anlaşılmasını engellemektedir. Multiphoton mikroskopi uzunlamasına fizyolojik ve patolojik koşullar altında sağlam hayvan beyin içinde hücreleri ve dokuları inceleyerek sağlar. Burada, biz posttravmatik koşullar altında beyin hücre davranışı iki foton görüntüleme ile incelenmiştir akut beyin hasarı iki model tarif. Seçilen bir beyin bölgesi beyin parankiminde kontrollü bir genişlik ve derinlikte bir travma üretmek için keskin bir iğne ile yaralandı. Önerilen yöntem, aynı anda, ilaç uygulaması ile kombine edilebilir bir şırınga iğnesi ile stereotaksik dikmek kullanır. Bu yöntem, memeli beyin, akut travma patofizyolojik hücresel mekanizmaları incelemek için bir gelişmiş araç olarak kullanılabilir öneriyoruz
Giriş
Akut beyin hasarı, motorlu araç kazalarında yaralanma insidansı yüksek olan önemli bir halk sağlığı sorunudur düşer ya da saldırılar ve müteakip kronik sakatlık yüksek yaygınlık. Beyin hasarının tedavisine terapötik yaklaşımlar, böylece, hastane öncesi cerrahi ve yoğun bakım etkililiğini sınırlayan, tamamen semptomatik kalır. Bu beyin hasarı, sosyal ve ekonomik etkisi özellikle şiddetli hale getirir. Çeşitli nedenlerle için, klinik çalışmaların en yeni tedavi yaklaşımları kullanarak beyin hasarı sonrası iyileşme iyileşme göstermek için başarısız oldu.
Hayvan modelleri ilaç etkinliği beyin hasarı olan hastalarda tahmin edilebilir bir aşama....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Burada sunulan tüm prosedürleri hayvan bakımı (Hayvan Deneyleri 62/2006 tarihinde Finlandiya Yasası) için yerel rehberlik göre yapılmıştır. Hayvan lisans (ESAVI/2857/04.10.03/2012) yerel otorite (ELÄINKOELAUTAKUNTA-Ella) elde edilmiştir. 1-3 aylık yaş arasında Yetişkin fareler, ağırlığı 24-38 g, sertifikalı Üniversitesi'nin hayvan tesisinde ayrı kafeslerde tutulur ve yiyecek ve su ad libitum sağlandı.
1.. Bir Kraniyal Pencere sayesinde Beyin Hasarı Görüntüleme
- Hayvanlara anestezi ve işlem alanı hazırlanması
- Filtre ile sterilize edilmiş fosfat tamponlu salin (PBS), pH 7.4 içinde çözüldü ketamin (Ketalar, 80....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
Transgenik farelerin posttravmatik beyin görüntüleme için 1), kronik kafa penceresi ve 2) kafatası incelme,: Biz iki operasyon prosedürlerini optimize ettik. Deney preparatların şematik görünümü, Şekil 1 'de sunulmuştur. 0.3 mm OD (30 G) çelik iğne ile delme travmatik delinmiş de (Şekil 1A) uygulanır. Kafatası inceltme yaklaşık 300 mikron (Şekil 1C) bir sınırı empoze eğilimi ise başarılı bir kafa penceresi hazırlık Thy1-YFP-3D rekonstrüksiyon gösterildiği gibi, pial.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Beyin travması ani, öngörülemeyen bir olay. Burada, örneğin nörodejenerasyon, dendrit eliminasyonu, beyin ödemi, glial yara izi, fokal subaraknoid kanama ile birleştiğinde serebral korteks kanamalar ve artan geçirgenliği gibi beyin hasarı sonrası insan hastalarda gözlenen patolojik değişikliklerin bir spektrumunu üretir hayvan modeli tanımlamak Kan-beyin bariyeri. Birincil ve ikincil patogenezi yanı sıra, travma sonrası iyileşme incelemek için, bu yaralanma modeli iyi nöronal ve glial yapıların vivo görselleştirme
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.
Teşekkürler
Biz GAFP-EGFP ve CX3CR1-EGFP fare suşları sağlamak için Dr Frank Kirchhoff derinden müteşekkiriz. Iş Finlandiya Uluslararası Hareketlilik Merkezi, Tekes, Neuroscience Fin Enstitüsü (FGSN) ve Finlandiya Akademisi hibe tarafından desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| 2A-sa Aptal Cımbız, 115 mm | XYtronic | XY-2A-SA | |
| 30 G ½ iğne içinde | BD | REF 304000 | |
| Hayvan düzeltici, tıraş makinesi | Aesculap | Isis GT420 | |
| Binoküler Mikroskop | Zeiss | Stemi 2000 | |
| paslanmaz çelik ısıtma yastığı ile Biyolojik Sıcaklık Kontrol Cihazı | Supertech | TMP-5b | |
| Künt mikrocerrahi bıçak | BD | REF 374769 | |
| Filamentli borosilikat tüp | Sutter Instruments | BF120-69-10 | Cam pipet üretimi için |
| Carprofene | Pfizer | Rimadyl vet | |
| Klorheksidin diglukonat | Sigma | C9394 | |
| Diş çimentosu | DrguDent, Dentsply | REF 640 200 271 | |
| Deksametazon | FaunaPharma | Rapidexon veteriner | |
| Tek kullanımlık matkaplar | Meisinger | HP 310 104 001 001 008 | |
| Dulbeco' s PBS 10x | Sigma | D1408 | |
| Dumont #5 forseps, 110 mm | FST | 91150-20 | |
| Ealing mikroelektrot çektirmesi | Ealing | 50-2013 | Cam pipet üretimi için dikey çektirme |
| Göz merhemi | Novartis | Viscotears | |
| Foredom matkap kontrolü | Foredom | FM3545 | |
| Foredom mikromotor el aleti | Foredom | MH-145 | |
| Fareler için gaz anestezi platformu | Stoelting | 50264 | Stereotaksik alet üzerine monte edilmiştir |
| Hemostaz Kollajen Sünger | Aviten, Ultrafoam BARD | Ref 1050050 | |
| Imaris | Bitplane | ||
| Ketamin | Intervet | Ketaminol vet | |
| Mai Tai DeepSee lazer | Spectra-Physics | ||
| Metal tutucu | Neurotar | ||
| Mikro pansuman forseps, 105 mm | Aesculap | BD302R | |
| Microfil | WPI | MF34G-5 | Mikro şırınga doldurma kılcal damarları |
| Mineral yağ | Sigma | M8410 | |
| Multifoton Lazer Tarama Mikroskobu | Olympus | FV1000MPE | |
| NanoFil Şırınga 10 μ l | WPI NANOFIL | Hamilton şırınga | |
| Nonwoven çubuklar 5 x 5 | Molnlycke Sağlık | Mesoft Cerrahi tamponlar | |
| Poliakrilik yapıştırıcı | Henkel | Loctite 401 | |
| Yuvarlak cam lamel ve nbsp; | Elektron Mikroskobu Bilimleri | ||
| 1.5 kalınlık | |||
| Küçük hayvan stereotaksik aleti | David Kopf Instruments | 900 | |
| Stoelting fare ve yenidoğan sıçan adaptörü | Stoelting | 51625 | Stereotaksik alet üzerine monte edilmiştir. |
| Öğrenci iris makası, düz 11,5 cm | FST | 91460-11 | |
| Sulforhodamine 101 | Moleküler Problar | S-359 | |
| UMP3 mikroşırınga pompası ve Mikro 4 mikroşırınga pompası kontrolörü | WPI | UMP3-1 | Mikroenjektör ve kontrolör |
| Xylazine | Bayer Health Care | Rompun veteriner |
Kaynaklar
- Lighthall, J. W. Controlled cortical impact: A new experimental brain injury model. J. Neurotrauma. 5 (1), 1-15 (1988).
- Lindgren, S., Rinder, L. Experimental studies in head injury. Biophysik. 2 (5), 320-329 (1965).
- Shreiber, D. I., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
