Summary

Menneskelige skjelettmuskelbiopsi prosedyrer ved hjelp av endret Bergström Technique

Published: September 10, 2014
doi:

Summary

The purpose of this video is to present the modified Bergström skeletal muscle biopsy technique on human subjects.

Abstract

Den perkutan biopsi teknikk gjør at forskere og klinikere å samle skjelettmuskel vevsprøver. Teknikken er sikker og svært effektiv. Denne videoen beskriver perkutan biopsi teknikk som bruker en modifisert Bergström nål for å få skjelettmuskel vevsprøver fra vastus lateralis av mennesker. Den Berg nål består av en ytre kanyle med en liten åpning ("window") på siden av spissen og en indre trokar med et skjæreblad ved den distale ende. Under lokalbedøvelse og aseptiske forhold, er nålen avanserte inn i skjelettmuskulatur gjennom et snitt i huden, underhud, og fascia. Deretter blir sugekraft anvendt på den indre trokar, er den ytre trokar trukket tilbake, skjelettmuskelvevet er trukket inn i vinduet av den ytre kanyle ved suging, og den indre trokar blir raskt lukket, således skjæring eller klipping skjelettmuskulatur vevsprøve . Nålen er rotert 90 °60, og et annet kutt er gjort. Denne prosessen kan bli gjentatt tre ganger til. Dette multiple sageteknikk gir vanligvis et utvalg av 100-200 mg eller mer hos friske personer og kan gjøres umiddelbart før, under og etter et anfall av trening eller andre inngrep. Etter post-biopsi dressing av innsnitt området, fagene vanligvis gjenoppta sine daglige gjøremål med en gang og kan delta fullt ut i kraftig fysisk aktivitet i løpet av 48-72 timer. Fag bør unngå tunge styrketrening i 48 timer for å redusere risikoen for prolaps av muskelen gjennom snitt i fascia.

Introduction

Den perkutan eller "semi-åpen 'biopsi teknikken brukes til å skaffe skjelettmuskel vevsprøver fra menneskelige pasienter og forskningsobjekter. Duchenne (1806-1875) er kreditert som den første til å konstruere en nål med en trokar å få skjelettmuskulatur fra levende fag gjennom perkutan biopsi en. På 1960-tallet, Berg innført en perkutan biopsinål lik den som er beskrevet av Duchenne 2-4. For tyve år senere, Evans et al. Fem modifisert teknikken ved å anvende sug gjennom skjære trokar av Berg nålen. Denne modifikasjon kan forbedre utbyttet av vev på 3 til 5-ganger 6,7 og anvendes i kliniske og biomedisinsk forskning innstillinger. Denne teknikken har og vil fortsette å utvikle diagnostisering av myopatier og vår forståelse av struktur og funksjon av skjelettmuskulatur.

Den perkutan muskelbiopsi teknikken er straightforward. Når det gjøres riktig, med streng overholdelse av aseptisk teknikk, tilhørende risikoen er minimal. Musicelbiopsiprosedyren regnes som en eksperimentell verktøy for forskningsprosjekter. Noen akademiske institusjoner tillate utdannet fakultetet forskere med doktorgrad, med direkte lege tilsyn, for å få muskelbiopsi og andre krever en bord-sertifisert lege til å utføre teknikken. ASU biopsi teamet har vellykket utført over 1600 muskelbiopsi i løpet av de siste 13 årene 8-15. Hensikten med dette er å beskrive video den modifiserte Berg nålen perkutane muskel-biopsi teknikk 5 for å få tak i skjelettmuskelen vevsprøver fra vastus lateralis fra humane individer.

Protocol

Skjelettmuskulatur fremgangsmåte som beskrevet følger retningslinjene til Appalachian State University Institutional Review Board. MERK: Teamet består av en operatør (Ph.D. eller MD trent i biopsi teknikk), og minst én, men ideelt sett, tre eller flere teknikere. Operatøren er ansvarlig for å gjennomføre og kontrollere alle aspekter av skjelettmuskelbiopsi prosedyre. En tekniker (tekniker # 1) er umiddelbart ansvar for å bistå føreren med alle aspekter av muskel utvinning. Dette i…

Representative Results

Den muskelbiopsiprosedyren som beskrevet ovenfor gjør det mulig for forskere å raskt og konsistent samle skjelettmuskel vevsprøver. Den typiske avkastning på sunne, atletisk fagene er 200 mg eller mer i én omgang med 3-4 klipp. Prosedyren tar 15-20 min, de fleste som er brukt i forberedelsene til snittet. I mosjonsbaserte studier, er muskelprøver ofte tatt før og etter trening, med en eller to prøver samlet inn under utvinning. Med denne designen, håret på etter trening (motsatt) lår er klippet og snittet net…

Discussion

Denne videoen gir en trinn-for-trinn oppsummering av skjelettmuskelbiopsi prosedyre som brukes ved ASU Human Performance Laboratory. Denne prosedyren, med små modifikasjoner, har blitt brukt til å samle inn ca 1600 muskelbiopsi i løpet av de siste 13 årene. De muskelbiopsiprøver har gitt viktige data i sports ernæring baserte undersøkelser, som fører til viktige forskningsfunn.

Det er mange kritiske teknikker for å være klar over når du utfører den modifiserte Bergström skjelett…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Ingen midler til å erklære.

Materials

Name of Material / Equipment Company Catalog Number Comments /  Description
Bergström biopsy needle, 5 x 100mm Stille Surgical Inc. 119-29187-50 1 ea
Durasorb blue pad Fisher 22-031-340 case of 300
Prep Razor Disposable Moore Medical 89760 1 ea
Shave Cream Moore Medical 92869 1 can
Alcohol Swab Moore Medical 98721 box/200
Povidone-iodine Swabsticks (3 pack) Moore Medical 90691 pack of 50
Face masks Fisher 19-039-690 case of 50
Sterile Gloves; sz 6.5 Moore Medical 68128 box of 50 pairs
Sterile Gloves; sz 7.0 Moore Medical 68129 box of 50 pairs
Sterile Gloves; sz 8.5 Moore Medical 68132 box of 50 pairs
Fenestrated Towel Drape Moore Medical 92712 case of 50
Lidocaine (1% HCl, w/o Epi Dealmed 427902 30cc vial
Ethyl Chloride spray Dealmed 386020 3.5 fl. Oz. bottle
5 mL syringe w/ 21G needle Fisher 14-827-48 case of 100
25G 5/8" needle Fisher 14-826AA case of 100
25G 1 1/2" needle Fisher 14-826-49 case of 100
Single-Use Scalpels  w/ #11 blade Fisher 0-8927-5B box of 20
60 mL Syringe Fisher 13-689-8 case of 40
~30 inch extension tubing Fisher 14-169-7A roll of 50ft
Metal stopcock Fisher 01-290-38 each
Polypropylene tubing connector w/ tapered ends, 3.2 to 5.5 mm Fisher 15-315-28A case of 100
Yellow pipette tips (1-200 µL) Fisher 02-681-2 cut off  ~15-18 mm of the tip
Topical surgical adhesive Medline MSC091076 case of 36 tubes
Topical surgical adhesive Medline MSC091076Z box of 6 tubes
Butterfly stitches (adhesive strips) 1/2" x 4" (6 per pack) Moore Medical 93050 box/300
Bandadge, Strip, 3/4 x 3 in. Fisher 19-027-202 pack of 100
Adhesive bandage (5m rolls) Fisher 19-027-768 case of 36
1" paper surgical tape Fisher 19-027-761 case of 12
Sutures (4-0 reverse cutting, FS2) Moore Medical 82926 box of 36
4 x 4 sterile gauze pads Moore Medical 66949 pkg/50
2 x 2 non-sterile gauze pads Moore Medical 37336 pkg/200
3 x 4 Non-Adherent Pads Moore Medical 74389 bx/100
Autoclave bags 3.5 x 9 Moore Medical 40390 box of 200
Autoclave bags 5.25 x 10 Moore Medical 40391 box of 200
Autoclave indicator tape Moore Medical 31608 box of 250
Lab Coats—small Fisher 23-900-520A  10/pk
Lab Coats—medium Fisher 23-900-520B  10/pk
Lab Coats—large Fisher 23-900-520C  10/pk
Germicidal Disposable Cloth Wipes Moore Medical 62879 Can/160

References

  1. Duchene, G. B. A. Recherches sur la paralysie musculaire pseudohypertrophique ou paralysie myo-sclerosique. Arch Gen Med. 11 (30), (1868).
  2. Bergstrom, J. Muscle electrolytes in man. Determined by neutron activation analysis on needle biopsy specimens. Scand J Clin Lab Invest (England). 14, (1962).
  3. Bergstrom, J. Percutaneous needle biopsy of skeletal muscle in physiological and clinical research). Scand J Clin Lab Invest. 35, 609-616 (1975).
  4. Bergstrom, J., Hultman, E. A study of the glycogen metabolism during exercise in man. Scand J Clin Lab Invest. 19, 218-228 (1967).
  5. Evans, W. J., Phinney, S. D., Young, V. R. Suction applied to a muscle biopsy maximizes sample size. Med Sci Sports Exerc. 14, 101-102 (1982).
  6. Hennessey, J. V., Chromiak, J. A., Della Ventura, S., Guertin, J., MacLean, D. B. Increase in percutaneous muscle biopsy yield with a suction-enhancement technique. J Appl Phys. 82, 1739-1742 (1997).
  7. Tarnopolsky, M. A., Pearce, E., Smith, K., Lach, B. Suction-modified Bergstrom muscle biopsy technique: experience with 13,500 procedures. Muscl., & Nerve. 43, 717-725 (2011).
  8. Nieman, D. C., et al. Carbohydrate ingestion influences skeletal muscle cytokine mRNA and plasma cytokine levels after a 3-h run. J Appl Physiol. 94, 1917-1925 (2003).
  9. Nieman, D. C., et al. Influence of carbohydrate ingestion on immune changes after 2 h of intensive resistance training. J Appl Physiol. 96, 1292-1298 (2004).
  10. Utter, A. C., et al. Carbohydrate supplementation and perceived exertion during prolonged running. Med Sci Sports Exerc. 36, 1036-1041 (2004).
  11. Nieman, D. C., et al. Muscle cytokine mRNA changes after 2.5 h of cycling: influence of carbohydrate. Med Sci Sports Exerc. 37, 1283-1290 (2005).
  12. Nieman, D. C., et al. Effects of quercetin and EGCG on mitochondrial biogenesis and immunity. Med Sci Sports Exerc. 41, 1467-1475 (2009).
  13. Nieman, D. C., et al. Quercetin’s Influence on Exercise Performance and Muscle Mitochondrial Biogenesis. Med Sci Sports Exerc. 42, 338-345 (2010).
  14. Dumke, C. L., et al. Quercetin’s effect on cycling efficiency and substrate utilization. Appl Physiol Nut Metab. 34, 993-1000 (2009).
  15. Nieman, D. C., et al. Quercetin’s influence on exercise-induced changes in plasma cytokines and muscle and leukocyte cytokine mRNA. J Appl Physiol. 103, 1728-1735 (2007).
  16. . Guideline for Disinfection and Sterilization in Healthcare Facilities. http://www.cdc.gov/hicpac/Disinfection_Sterilization/toc.html. , (2008).
  17. Faria, F. E., et al. The onset and duration of mobilization affect the regeneration in the rat muscle. Histol Histopath. 23, 565-571 (2008).
  18. Carlson, B. M., Shepard, B., Komorowski, T. E. A histological study of local anesthetic-induced muscle degeneration and regeneration in the monkey. J Ortho Res. 8, 485-494 (1990).
  19. Yagiela, J. A., Benoit, P. W., Buoncristiani, R. D., Peters, M. P., Fort, N. F. Comparison of myotoxic effects of lidocaine with epinephrine in rats and humans. Anesth Analg. 60, 471-480 (1981).
  20. Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate. J Appl Physiol. 61, 165-172 (1986).
  21. Gibala, M. J., et al. Brief intense interval exercise activates AMPK and p38 MAPK signaling and increases the expression of PGC-1alpha in human skeletal muscle. J Appl Physiol. 106, 929-934 (1985).
  22. Phillips, S. M., Tipton, K. D., Ferrando, A. A., Wolfe, R. R. Resistance training reduces the acute exercise-induced increase in muscle protein turnover. Am J Physiol. 276, 118-124 (1999).
  23. Davis, J. M., Murphy, E. A., Carmichael, M. D., Davis, B. Quercetin increases brain and muscle mitochondrial biogenesis and exercise tolerance. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 296, 1071-1077 (2009).
  24. Vissing, K., Andersen, J. L., Schjerling, P. Are exercise-induced genes induced by exercise. FASEB J. 19, 94-96 (2005).
  25. Lundby, C., et al. Gene expression in human skeletal muscle: alternative normalization method and effect of repeated biopsies. Eur J Appl Physiol. 95, 351-360 (2005).
  26. Coyle, E. F., Coggan, A. R., Hemmert, M. K., Ivy, J. L. Muscle glycogen utilization during prolonged strenuous exercise when fed carbohydrate. J Appl Physiol. 61, 165-172 (1985).
check_url/51812?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Shanely, R. A., Zwetsloot, K. A., Triplett, N. T., Meaney, M. P., Farris, G. E., Nieman, D. C. Human Skeletal Muscle Biopsy Procedures Using the Modified Bergström Technique. J. Vis. Exp. (91), e51812, doi:10.3791/51812 (2014).

View Video