טכניקות הדמיה חיה קטנות מאפשרות בדיקות אבחון סדרתי והתערבויות טיפוליות in vivo. לאחרונה, היקף היישומים התרחב באופן משמעותי וכיום כולל הערכה של התפתחות גידולים במעי הגס, ריפוי פצעים וניטור של דלקת. פרוטוקול זה מדגים יישומים פוטנציאליים המגוונים אלה של אנדוסקופיה העכברית.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
העכברי אנדוסקופיה ל בVivo ריפוי Multimodal הדמיה של היווצרות הסרטן וההערכה של מעיים פצע ודלקת
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
מודלים עכבר נמצאים בשימוש נרחב ללמוד פתוגנזה של מחלות בבני אדם ולהעריך את תהליכי אבחון, כמו גם התערבויות טיפוליות preclinically. עם זאת, הערכה תקפה של שינויים פתולוגיים לעתים קרובות מחייבת ניתוח היסטולוגית, וכאשר היא מבוצעת vivo לשעבר, מחייבת מוות של בעלי החיים. לכן בהגדרות ניסיוניות קונבנציונליות, בדיקות מעקב תוך פרט הן לעתים נדירות אפשריות. לפיכך, פיתוח של אנדוסקופיה העכברית בעכברים חיים מאפשר לחוקרים בפעם הראשונה לשניהם באופן ישיר לדמיין את רירית הקיבה ומעיים וגם לחזור על התהליך כדי לפקח על שינויים. יישומים רבים לin vivo אנדוסקופיה העכברית קיימים, כולל חקר דלקת מעיים או ריפוי פצעים, קבלת ביופסיות ריריות שוב ושוב, ולנהל באופן מקומי סוכני אבחון או טיפול באמצעות צנתרים הזרקה זעירים. מו הדמיה לאבחון לאחרונה, הדמיה מולקולרית האריכהdalities מאפשר זיהוי ספציפי של מולקולות מטרה מובחנות באמצעות photoprobes הספציפי. לסיכום, אנדוסקופיה העכברית התפתחה כטכנולוגיה חדשנית חדשנית לאבחון ניסיוני בתחום ההדמיה vivo ועלולה להשפיע באופן משמעותי על מחקר פרה קליני בתחומים שונים.
מבוא
מודלים של בעלי החיים העשירו מאוד את ההבנה של פתולוגיות במעיים רבות שלנו. עכבר המעבדה (musculus Mus) התפתח כמודל חיה ראש במחקר ביו בשל המידע הגנטי והגנומי בשפע שלה, והוא זמין בקלות בזנים מהונדסים ונוק אאוט. בנוסף לשיפור היווצרות מחלה הבנה, מודלים של בעלי החיים גם חשוב משמשים לבדיקת תרופות פוטנציאליות, כמו גם התערבויות אבחון או טיפול פרה קליניות. עם זאת, למרות מגוון רחב של דגמי עכבר מחקה מחלות של בני אדם, הרבה אפשרויות אבחון והתערבות המשמשות באופן שיגרתי בטיפול בחולה אינן זמינות לעכברים. בהתאם לכך, אסטרטגיות מעקב כדי לפקח על מהלך המחלה עכברית או את ההשפעה של התערבויות טיפוליות לעתים קרובות מוגבלות לתצפיות עקיפות או נ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל הניסויים בבעלי החיים אושרו על ידי Landesamt für נאטור, Umwelt und Verbraucherschutz (LANUV) על פי חוק הגנה על בעלי חיים הגרמנים.
.1 חומרים והתקנה ניסיונית
- טיפול בבעלי חיים
- השתמש נשי או עכברי זכרים של כל זן במשקל 20 25 גרם ולשכן אותם על פי חקיקת טיפול בבעלי החיים מקומית.
- להאכיל את העכברים עם אוכל מיוחד למכרסמים ולהחיל צ'או ללא א....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
בניטור vivo של ריפוי פצע במעיים
במהלך אנדוסקופיה שגרתית, פצעים ברירית היו מושרה באופן מכאני על ידי מלקחיים זעירים ביופסיה בקוטר של 3 צרפתי (שווה 1 מ"מ; איור 1 א). בהמשך לכך, ריפוי פצעים היה במעקב על ידי בדיקות אנדוסקופיות יומיות ולכמת על ידי מדידה של השטח שיורית פצע באמצעות תוכנה לעריכת תמונות, למשל, ImageJ (איור 1). סגירת הפצעים בודדת לאורך הזמן מתבטאת במנה של אזור פצע בפועל / אזור פצע ראשוני. לדוגמא, ביום .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
ריפוי פצעי אפיתל הוא תהליך מתמשך. קילוף פיסיולוגי מתמשך של תאי שטח בתוך הרירית של הקיבה והמעיים מתרחש דורש התחדשות תכופה של תאי האפיתל 16. כתוצאה מכך, יש ריפוי פצע לקוי השפעה עצומה על מספר מחלות, כולל כיבים במערכת העיכול ודליפה 17 בהשקה 18. הערכת רקע מולקולרי, כמו גם לתרופות פוטנציאליות כדי לעורר ריפוי האפיתל יכולה להתבצע רק באופן חלקי במערכות תרבית תאים במבחנה 19,20. לפיכך, יש צורך בהגדרות ניסיוניות מתוחכמות יותר כגון קולונוסקו.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
יש לי המחברים אין לחשוף.
תודות
אנו מודים לסוניה Dufentester ואלקה וובר לקבלת סיוע טכני מומחה. אנו מודים Faekah גוהר להגהה את כתב היד וסטפן ברוקנר לתמיכת מידע רפואי. עבודה זו נתמכה על ידי מענק בינתחומי מ- קרונות-Fresenius-Stiftung השאר (2012_A94). ד Bettenworth נתמכה על ידי מענק מחקר מהפקולטה לרפואה, Westfälische Wilhelms-Universität מינסטר. מ 'ברוקנר נתמכה על ידי עמדה סיבובית "Gerok" של (DFG SFB1009B8). אנו מודים ליקה בלום להמחשה של הקריקטורה העכבר.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| ריאגנטים | |||
| דיאטה נטולת אספסת | Harlan Laboritories, מדיסון, ארה"ב | 2014 | |
| אזוקסימתאן (AOM) | סיגמא-אולדריץ', דייזנהופן , גרמניה | A5486 | |
| משחת עיניים Bepanthen | באייר, לברקוזן, גרמניה | 80469764 | |
| Dextran sulphate נתרן (DSS) | TdB Consulatancy, אופסלה, שוודיה | DB001 | |
| Eosin | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה | E 4382 | |
| Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה | E 9884 | |
| Falcon Tube 50 ml | BD Biosciences, Erembodegem, בלגיה | 352070 | |
| Florene 100 V/V | Abbott, וויאסבאדן, גרמניה | B506 | |
| Haematoxylin | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה | HHS32-1L | |
| איזופנטן (2-מתילבוטן) | Sigma-Aldrich, Deisenhofen, גרמניה | M32631-1L | |
| מתילן כחול | Merck, דרמשטדט, גרמניה | 1159430025 | |
| תרכובת O.C.T. Tissue Tek | Sakura, Zoeterwonde, הולנד | 4583 | |
| Omnican F - canula | Braun, Melsungen, Germany | 9161502 | |
| תמיסת מלח חוצצת פוספט, PBS | Lonza, Verviers, בלגיה | 4629 | |
| נתרן כלורי 0.9% | בראון, Melsungen, גרמניה | 5/12211095/0411 | |
| Standard diet | Altromin, Lage, גרמניה | 1320 | |
| Tissue-Tek Cryomold | Sakura, ליידן, הולנד | 4566 | |
| Vitro – קלוד | ר. לנגנברינק, טנינגן, גרמניה | 04-0002 | |
| ציוד | |||
| AIDA Control | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany | 20 096020 | |
| מסנן פס פס | סמרוק, רוצ'סטר, ארה"ב | HC 716/40 | |
| מסנן פס פס | סמרוק, רוצ'סטר, ארה"ב | HC 809/81 | |
| מלקחיים ביופסיה, 3 Fr., 28 ס"מ | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה | 61071ZJ | |
| Dell Monitor | Dell, פרנקפורט, גרמניה | נדן בדיקה U2412Mb | |
| , 9 Fr.Karl | Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה | 61029D | |
| מעטפת בדיקה, 9 Fr.Karl | Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה | 61029C | |
| כבל אור סיבים אופטיים, 3.5 מ"מ | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה | 69495NL | |
| Fluorescein Blue מערכת סינון | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה | 20100032 | |
| מסנן מחסום פלואורסצאין | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, גרמניה | 20100033 | |
| מתג רגל | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany | 20010430 | |
| טלסקופ HOPKINS, 1.9 מ"מ, אורך 10 ס"מ | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany | 1830231 | |
| SCB D-light P | Karl Storz - Endoskope , טוטלינגן, גרמניה | 20 133720 | |
| SCB tricam SL II | Karl Storz - Endoskope, טוטלינגן, גרמניה | 20 2230 20 | |
| סט צינורות VETPUMP II | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany | 69811 | |
| Tricam PDD PAL | Karl Storz - Endoskope, Tuttlingen, Germany | 20221037 | |
| UniVet Porta | Groppler Medizintechnik, Deggendorf, Germany | BKGM 0451 | |
| Vetpump 2 | Karl Storz - Endoskope (טוטלינגן, גרמניה | ) 69321620 |
מקורות
- Bettenworth, D., et al. Translational 18F-FDG PET/CT imaging to monitor lesion activity in intestinal inflammation. Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 54, 748-755 (2013).
- Lewis, J. S., Achilefu, S., Garbow, J. R., Laforest, R., Welch, M. J.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
