השתלת שומן היא טכניקה חיונית לשחזור ליקויים ברקמות רכות. עם זאת, זה נותר הליך בלתי צפוי המאופיין בהישרדות משתנה של השתל. המטרה שלנו הייתה לתכנן מודל עכבר המשתמש בשיטת הדמיה חדשה כדי להשוות את שימור הנפח בין טכניקות שונות של הכנה ואספקה של השתלת שומן.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
הערכה של יכולת הקיום של הזרקת שומן האנושי בעכברי עירום עם מיקרו-טומוגרפיה ממוחשבת
* These authors contributed equally
במאמר זה
סיכום
תקציר
Lipotransfer הוא כלי חיוני בארסנל של המנתח לטיפול בגירעונות ברקמות רכים של כל הגוף. השומן הוא מילוי רקמות הרך האידיאלי כפי שהוא זמין, להשיג בקלות, זול, ומטבעו ביולוגית. 1 עם זאת, למרות הפופולריות הגואה שלו, השתלת שומן הקשתה על ידי תוצאות בלתי צפויות והישרדות שתל משתנה, עם שיעורי ההחזקה פורסמו נעים בכל מקום בין 10 -80%. 1-3
כדי להקל על חקירות בהשתלת שומן, יש לנו ולכן פיתחתי מודל חיה המאפשר ניתוח של שימור נפח שומן מוזרק בזמן אמת. בקצרה, חתך קטן נעשה בקרקפת של עכבר בעירום CD-1 ו200-400 μl של lipoaspirate מעובד ממוקם מעל הגולגולת. הקרקפת נבחרה כאתר נמען בגלל העדרו של שומן תת עורי המקומי, ובגלל הניגוד המצוין רקע הניתן על ידי calvarium, אשר מסייע בתהליך הניתוח. טומוגרפיה ממוחשבת-מיקרו (מיקרו-CT) משמשת כדי לסרוק את השתל בתחילת מחקר ובכל שבועיים לאחר מכן. תמונות CT משוחזרות, ותוכנת הדמיה משמשת לכמת כרכי שתל.
באופן מסורתי, טכניקות להערכת שומן שתל נפח חייבו הרדמת חסד בבעלי החיים המחקר לספק רק הערכה אחת של משקל ונפח שתל על ידי מדידה פיזית vivo לשעבר. השוואות ביוכימיים והיסטולוגית שכמו כן נדרשו בעלי החיים המחקר להיות מורדמים. טכניקת הדמיה שתוארה זה מציעה את היתרון של הדמיה ואובייקטיבית כימות היקף בנקודות זמן מרובות לאחר השתלה ראשונית מבלי להקריב בעלי החיים המחקר. הטכניקה מוגבלת על ידי הגודל של השתל יכול להיות מוזרקים כמו עור סיכון שתלים גדולים יותר ונימק שומן. לשיטה זו כלי לכל מחקרי הערכת כדאיות שתל שומן ושימור נפח. הוא טוב במיוחד מתאים לproviding ייצוג חזותי של שתלי שומן ובעקבות שינויים בנפח לאורך זמן.
מבוא
פגמים ברקמות רכות נובעים ממגוון סיבות כולל טראומה, כריתת גידול, הזדקנות ואנומליה מולדת. הם יכולים להיות מתישים עבור מטופלים, ומייצגים את אחת הבעיות הנפוצות ביותר, אך המאתגרות ביותר עבור מנתחים משחזרים. קיימות שיטות רבות לטיפול בחסרים ברקמות רכות, כגון דשים מקומיים וחופשיים, הזרקות קולגן וחומרי מילוי סינתטיים. 4-8 עם זאת, מאז השימוש המתועד הראשון בו על ידי נויבר בשנת 18931, העברת שומן אוטולוגית נותרה תקן הזהב לתיקון ליקויים ברקמות רכות, מכיוון שהוא זמין, קל ובטוח לקציר, ותואם באופן טבעי. 1.2
למרות יתרונות אלה, שתלי שומן אוטולוגיים סובלים מהישרדות בלתי צפויה ומשתנה, עם שיעורי שימור הנעים בין 10-80% לאורך זמן. ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
הערה: פרוטוקולי ניסוי וטפסי הסכמת מטופל לקבלת שומן היו נבדקו ואושרו על ידי אוניברסיטת סטנפורד Institutional Review Board (פרוטוקול # 2,188). נהלי כל החיה אושרו על ידי הפנל המנהלי סטנפורד במעבדת טיפול בבעלי חיים (APLAC) לפי הפרוטוקול # 9999. כל הניסויים שנערכו עם הקפדה על בטיחות בבעלי חיים והנחיות טיפול הומניות.
1. שומן קציר
- באמצעות ההליך קולמן 17-19, להשיג רקמת שומן אנושית מהבטן, האגף, ו / או אזורי ירך של מטופלות בריאים עוברות שאיבת שומן אלקטיבי.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
שתלי שומן ירדו בהדרגה בנפח במהלך המחקר, וכתוצאה מכך 62.2% הישרדות ממוצעת על ידי 8. (איור 4 א) בשבוע 24 בסיום סריקת השבוע 8, כל שתל שומן הופק בחתיכה אחת. בדיקת סכום דרגת Wilcoxan שימשה להשוות את ההבדל בין מדידות נפח של שתלי שומן מתקבלים על ידי שני מיקרו-CT או מחושבים ממסה פיזית. לא נמצא הבדל משמעותי בין שתי שיטות אלה (עמ '-value דו-צדדי = .9362). (איור 4)
עם 5 .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
עד לנקודה זו, רוב החוקרים הסתמכו על שיטות הלא הדמיה לכמת את ההישרדות לטווח הארוך של שתלי שומן, אך שיטות אלה דורשים הקרבת בעלי החיים המחקר ולהניב רק מדידה אחת. 3,10-12 המחקר שלנו מייצג שיטת ניתוח השתפרה המאפשרת אובייקטיבי, כימות של הישרדות שתל שומן בזמן אמת במודל של עכברים.
קריטי בתהליך זה הוא להבטיח כי עכברים מספיק חיסון המשמשים למחקר, כמו זה מונע את דחיית השתל שיתרחש אם עכברים בעלי מערכת חיסונית שלמה .......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
לאף אחד מהמחברים אין אינטרס כלכלי מתחרה לדווח עליו.
תודות
מחקר זה נתמך על ידי קרן Oak, המעבדה Hagey לילדי רפואת רגנרטיבית, והמכון הלאומי לבריאות, מענקי NIHR21DE019274, NIHR01DE019434, NIHR01DE021683, וNIHU01HL099776 לMTLDCW נתמכה על ידי ACS פרנקלין H. מרטין הפקולטה למחקר המלגה, Hagey מעבדה לילדי רפואת רגנרטיבית, והפקולטה Scholar פרס אוניברסיטת סטנפורד מכון מחקר לבריאות הילד. מיקרו-CT נערך במרכז סטנפורד לחדשנות בin vivo הדמיה.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| SAL lipoaspirate | |||
| צנטריפוגה | בקמן קולטר, בע"מ, פסדינה, קליפורניה | ||
| 50 מ"ל צינורות חרוטיים | BD Biosciences, סן חוזה, קליפורניה | ||
| CD-1 עכברים עירומים CD-1 (Crl:CD1-Foxn1nu) | מעבדות צ'ארלס ריבר, בע"מ, ווילמינגטון, MA | ||
| איזופלורן | הנרי שיין, דבלין, אוהיו | ||
| 2.5% בטדין | פרדו פארמה, L.P., סטמפורד, CT | ||
| 70% תמיסת אתנול | מגן זהב, הייוורד, קליפורניה | ||
| 1 סמ"ק מזרק נעילת לואר | BD Biosciences, סן חוזה, קליפורניה | ||
| צינורית מד 14 | Shippert Medical, Centennial, CO | ||
| Extractps Fine Science Tools, היידלברג, גרמניה | |||
| מספריים Tenotomy | Fine Science Tools, היידלברג, גרמניה | ||
| 6-0 תפר ניילון | Ethiconבלו אפר, OH | ||
| פוספט חוצץ | מי מלח Gibco, Carlsbad, CA | ||
| סורק מיקרו-CT | סימנס הלת'קר, פלזנטון, קליפורניה | ||
| פנטום | TriFoil Imaging, Northridge, CA | ||
| תוכנת ניתוח הדמיה | IRW, Siemens Healthcare, Pleasanton, CA | ||
| Scale | מטלר-טולדו אינטרנשיונל, בע"מ, קולומבוס, אוהיו |
מקורות
- Gir, P., et al. Fat grafting: evidence-based review on autologous fat harvesting, processing, reinjection, and storage. Plast Reconstr Surg. 130 (1), 249-258 (2012).
- Kaufman, M. R., et al.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
