이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.

방법 논문

Vitreodynamic 분석을위한 항목의 유리체 유머 해부

11.6K 조회수

⸱

DOI:

10.3791/52759

⸱

2015년 5월 24일

 ,  , 

이 논문에서

요약

이 프로토콜의 목표는 사후 적출된 돼지 눈에서 온전한 유리체핵과 피질을 전체적으로 분리하는 효과적인 기술을 보여주는 것입니다.

초록

저자는 사후 적출된 돼지 눈에서 온전한 유리체 코어와 피질을 분리하는 효과적인 기술을 제안합니다. 이전 연구에서는 이러한 해부의 결과가 밝혀졌지만 자세한 단계는 설명되지 않았기 때문에 해당 분야 외부의 연구자들은 자신의 방법을 복제할 수 없었습니다. 다른 연구에서는 유리체 구조의 해부학적 구조를 유지하지 않는 흡인 또는 유리체 코어만 분리하는 부분 절개를 통해 유리체를 채취합니다. 제안된 방법은 유리체 코어와 피질이 손상되지 않은 상태로 유리체 전체를 분리하는 동시에 유리체 해부학적 구조와 구조적 무결성을 유지합니다. 이 방법에서는 먼저 적출된 돼지 눈에서 전체 두께의 공막 피판을 만들고 이를 통해 맥락막 조직을 공막에서 분리할 수 있습니다. 그런 다음 공막 피판이 확장되고 맥락막이 공막에서 완전히 분리됩니다. 마지막으로, 맥락막-망막 조직을 유리체에서 떼어내어 고립된 온전한 유리체를 남깁니다. 제안된 유리체 박리 기법은 유리체액의 물리적 특성을 연구하는 데 사용할 수 있습니다. 특히 이 방법은 약물 전달, 유리체-망막 산소 운반 및 안구 내 대류와 관련된 실험 연구에서 의미가 있습니다.

서론

이 방법의 목적은 구체적으로 vitreodynamic 분석의 목적을 위해, 사체로부터 눈, 유리질 코어 및 피질 손상으로, 전체 그대로 유리체를 분리하는 기술이다. 유리체 생리학 분야는 유체 역학 연구원 등, 다양한 분야 연구자, 성장함에 따라, 유리체 1의 물리적, 역학적 특성을 조사하고 있습니다. 이를 위해, 그것은 세부 사항에 다양한 분야의 연구자를 지원하기 위해 전체 그대로 유리체를 분리하는 기술이 필수적이다.

Sebag 등. 2 등 (3) 인간의 시체 눈에 우아한 전체 유리체 해부를 수행하고 그 결과의 그림을 보여 주었다. 그러나, 사용되는 기술은 독립적으로 복제하는 방법을 할 수 없을 것이다 디테일 비전문가에 설명되지 않았다. 다른 연구는 이러한 포부 또는 부분 절개와 같은 간단한 방법을 사용하여 시체의 눈에서 유리체 수확 한그 중 둘은 전체 그대로 유리체가 발생하지 않습니다. Gisladottis 등. 4, 쑤 외. (5)는 시체의 눈에서 수확 유리체 유머의 투과성을 조사합니다. 유리체 추출 할 수있는 방법을 설명하지 않았다 때문에, 그것은 그들이 주사기 유리체를 흡입하는 것으로 가....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

프로토콜

모든 탈핵 눈은 도살장에서 얻은하고 모든 실험은 기관 바이오 안전성 법에 따라 수행되었다.

  1. 표면에 세포핵이 제거 된 눈을 고정합니다. 눈 주위에 여분의 조직을 통해 조직의 핀을 배치하고 스티로폼 보드로를 확보하여이 작업을 수행합니다.
  2. 해부 및 눈에서 perilimbal 결막을 분리합니다.
    1. 윤부에서 결막을 절개하고 퉁명스럽게 공막 떨어져 그것을 해부 미세 집게 (0.3 집게) 및 microscissors (웨스트 코트 위)를 사용합니다. 무딘 절개가 더 해부 할 수 있도록 진행으로 윤부 따라 결막을 잘라.
    2. 가능한 한 많은 공막을 노출 끝까지 눈 (360도)의 주위에 결막을 제거합니다.
      참고 :이 절차의 나머지 부분 동안 수술 핀이나 집게로 눈에 집착 용이하게하기 위해 결막의 작은 금액을 떠나 도움이됩니다.
  3. 하나 따라 전체 두께 공막 편 만들기눈 (메스 블레이드 69)의 측면.
    1. 부드럽게 어둡게 착색 된 맥락막까지 메스 (메스 블레이드 11)과 공막으로 절단하여 윤부에 윤부 및 3mm 후방에 ~ 5mm 공막 절개 평행을 볼 수 있습니다. 맥락막 자체를 절개하지 않도록주의하십시오.
    2. 이 부드럽게 안쪽으로 맥​​락막을 눌러이 조직 사이의 잠재적 ....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

결과

프로토콜을 따르는 것은 그대로 코어와 피질 (그림 3) 성공적인 유리체 박리로 이어질 것입니다. 이 유리체 피질에 부착 망막의 잔여 부분으로부터 명백하다. 본래 전체 유리체 특정 vitreodynamic 실험을위한 여러 가지 방법으로 사용될 수있다. 우리의 경우에는, 확산 유리체 그대로 산소의 속도와 그 대응하는 시간 상수 (도 2)의 조사 하였다. 우리의 방법을 사용하여 (코어 및 Cortex) 해부 하였다 유리체는 공지 된 노출 표면적을 갖는 유리 비이커에 넣었다. 이것은 단지 유리체 코어 6를 분리 이전에 발행 된 방법을 사용하여 수확 유리체에 비교 하였다. 다른 모든 요소는 실험 및 제어 그룹에서 일관성 유지했다. 유리질 표면은 공지 된 산소 장력 (~ 160 mmHg로)이 공기에 노출시켰다. 유리체 내의 산소 장력이 낮은 (<10 mmHg로)이었다. vitr의 비율을 바탕으로겔 상태의 유리체에 대한 의해 풍수 등. <.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

토론

조심스럽게 유리체 박리 동안 수행해야 두 가지 중요한 단계가 있습니다. 전체 두께 공막 편을 만드는 단계 3, 전체 박리에 결정적이다. 케어는 전체 두께 공막 편을 만들 때 맥락막으로 절단하지 않도록주의해야한다. 다른 중요한 단계는 맥락막에서 공막을 멀리 해부한다. 이 단계는주의 깊게 유리체가 밖으로 유출 할 수있는 맥락막에 여러 개의 구멍을 만드는 방지하기 위해 수행해야합니다. 프로토콜을 수정하고 그대로 전체 유리체 유머를 해부하는 방법이있다. 유리체 조직이 원하는 위치에 위치 된 후에 단계 8. 맥락막은 단부에서 제거 될 때까지 6 단계가 지연 될 수있다.

이 절차의 제한은 해부 동안 그대로 유리체 절제술의 성공 및 정확도를 제시하기 만 시각적 큐가 존재한다는 것이다. 유리체 코어와 피질은 육안으로 투명하고 구별하기 어려운 모두이기 때문에,이도전이 될 수 있습니다. 유리체 망막 상에의 접착 성을 몰래까지 그것은 유리체 피질의 성공적인 박리가 발생했는지 여부를 결정하는 것이.......

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

공개 사항

저자는 공개할 것이 없습니다.

감사의 글

저자는 Whittier Foundation, Harrington Foundation, National Institutes of Health and Research to Prevent Blindness의 자금 출처를 인정합니다.

....

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
0.3 집게Storz OpthalmicsE1793
Westcott Tenotomy 가위 곡선 오른쪽Storz OpthalmicsE3320 R
메스 핸들 번호 3VWR25607-947
메스 블레이드, # 11, # 3 핸들VWR470174-844

참고문헌

  1. Siggers, J. H., Ethier, C. R. Fluid Mechanics of the Eye. Annual Review of Fluid Mechanics. 44 (1), 347-372 (2012).
  2. Sebag, J. Age-related changes in human vitreous structure. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 225 (2), 89-93 (1987).
  3. Grignolo, A.

액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.

재인쇄 및 허가

더 많은 논문 탐색

전체 유리체 분리공막 플랩 생성맥락막-망막 분리돼지 안구 해부유리체 중심 및 피질유리체 해부학적 구조 보존유리체 역학 분석 기술온전한 유리체유리액 특성