Method Article

Ein "Patient-Like" Orthotope Syngene Maus-Modell der Leberzellkarzinom Metastasen

DOI:

10.3791/52858

October 24th, 2015

In This Article

Summary

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Die Metastasierung von Krebs ist die Hauptursache der durch Krebs verursachten Todesfälle. Wir bieten eine eingehende Beschreibung der unser Überleben Chirurgie Methodik für die Festlegung eines "Patienten-like" orthotopen syngenen Mausmodellsystem zur Untersuchung der Mechanismen der Metastasierung bei soliden Organtumoren.

Abstract

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Die Mehrzahl der krebsbedingten Todesfälle wird durch die Metastasierung des Krebses und nicht durch den Primärtumor selbst verursacht. Die zugrundeliegenden Mechanismen der Krebsmetastasierung sind jedoch noch unklar. Tiermodelle sind unerlässlich, um die Mechanismen aufzuklären und neue Strategien zur Behandlung von metastasierenden Krebserkrankungen zu evaluieren. In dieser Arbeit wird eine detaillierte Beschreibung eines "patientenähnlichen" orthotopen syngenen Mausmodells zur Erforschung der Mechanismen der Metastasierung von Tumoren solider Organe gegeben. Die überlebenschirurgische Implantation von hepatozellulären Karzinomzellen der BNL 1ME A.7R.1 Maus direkt in die Leber (das Ursprungsorgan) des Inzucht-Wildtyp-immunkompetenten Labormausstamms BALB/c wird beschrieben. Der Erfolg und die Reproduzierbarkeit dieser Methodik empfehlen einen breiten Einsatz bei der Aufklärung der biologischen Mechanismen der Metastasierung von Krebs in soliden Organen.

Introduction

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Hepatozelluläres Karzinom (HCC) ist eine der tödlichsten Krebsarten, mit schlechter Prognose und geringer Lebenserwartung. Fast alle krebsbedingten Todesfälle sind auf die metastasierende Ausbreitung der Krankheit vom Ursprungsorgan auf weitere entfernte Organezurückzuführen 2-6. Die HCC-Progression ist ein komplexer Prozess. Daher kann sich die Möglichkeit, die Tumormikroumgebung, die natürlicherweise in metastasiertem HCC vorkommt, in Tiermodellen zu modellieren, als erfolgreicher und nützlicher Weg erweisen, um relevante Mechanismen beim Menschen aufzudecken. 7Leider sind die Mechanismen der Krebsmetastasierung noch weitgehend unklar. Daher be....

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Protocol

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Ethics Statement
Alle tierexperimentellen Studien wurden von der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) des Hunter College der City University of New York zugelassen.

Anmerkung: acht BALB / c-Mäuse wurden in diesem experimentellen Verfahren verwendet. Fünf BALB / c-Mäuse wurden mit 5 × 10 6 BNL 1ME A.7R.1 Maus hepatozelluläre Karzinomzellen implantiert werden, um die primären Tumoren zu erzeugen. Drei BALB / c-Mäuse keine Implantationen wurden als Kontrollen verwendet. BNL 1ME A.7R.1 ist eine murine Leberzellkarzinom-Zelllinie, die durch chemische Umwandlung aus dem murinen nicht-tumor....

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Results

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Die Leber von Balb / c-Mäuse wurden mit 5 × 10 6 BNL 1ME A.7R.1 Maus HCC-Zellen implantiert. Klinische Beweise für HCC Entwicklung zu beobachten war 63 Tage nach der Operation. Demzufolge wurden die Mäuse auf humane Weise eingeschläfert. Autopsie wurde auf die eingeschläfert Mäusen durchgeführt. Die Lunge und Leber wurden reseziert und eine sorgfältige Brutto Prüfung durchgeführt, um makroskopischen Tumoren zu identifizieren. In einer Maus wurde ein oberflächlicher Tumor auf der Oberfläche der Leber mit irgen.......

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Discussion

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In diesem Artikel eine ausführliche Beschreibung des Verfahrens gegeben, dass kürzlich von Ogunwobi und Kollegen der erfolgreichen Etablierung eines orthotopen syngenen Mausmodell der HCC Metastase berichtet (Abbildung 2) 3. Die Entnahmerate von Tumoren, für dieses Verfahren ist im Allgemeinen hoch. Wir haben früher beobachteten eine Tumoraufnahmerate von 100% 3. Allerdings kann die Aufnahmerate variabel, abhängig von der Kompetenz der Prüfer sein. In einer aktuellen Experiment dur.......

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Disclosures

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Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Acknowledgements

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Wir danken Pascal DuBois für das Korrekturlesen des Artikels. Die Autoren möchten sich auch bei den Mitarbeitern der Tierschutzeinrichtung am Hunter College der City University of New York bedanken. Diese Arbeit wurde durch ein NIH RCMI-Stipendium für das Hunter College unterstützt.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Mikro-Präparierpinzette Roboz(RS-5040)Spitze 0,20 x 0,12 mm
Graefe Mikro-Präparierzange, gezackte, gebogene SpitzeRoboz(RS-5111)1 x 2 Zähne, gebogene Spitze Breite 0,6 mm
Mikro-Präparierretraktor-Agricola (3 x 3 Zinken)Roboz(RS-6501)Stumpf 3 x 3 Zinken, Tiefe 4 mm, Spreizung 25 mm
Mikro-Präparierzange-Goldstein (3 x 3 Zinken)Roboz(RS-6503)Stumpf, 3 x 3 Zinken, Tiefe 4 mm, Spreizung 19 mm
Jameson Messschieber (misst Tumore)Roboz(RS-6466)80 mm/3 Zoll Skala, verchromt 
Mikro-Präparierschere, große Ringschere, gerade und scharfeRoboz(RS-5852)23 mm Klingen, Länge 4 Zoll, flache Schäfte und große
Ringe Skalpell mit Klingen, für filigrane PräpariereingriffeRoboz(RS-9861-36)
Skalpellgriff Roboz(RS-9884)Solid
Littauer Stitch SissorsRoboz(RS-7074)Länge 4,5 Zoll
Brauner Nadelhalter, zum einfachen FadenbindenRoboz(RS-7960)Konvexer Kiefer, feine Zacken
Reflex 7MM Wundclips mit Reflex 7 Clip ApplierRoboz(RS-9262)sichere, sichere alternative Methode zum Wundverschluss
Instrumententablett und DeckelRobozRT-1350S
Mini-Clipper mit abnehmbarer KlingeRoboz(RS-5903)
Germinator 500 (der Keim-Terminator) TrockensterilisatorRobozDs-400, Ds-401, DS-501Für die schnelle Dekontamination von Mikro-Präparierinstrumenten.   Die Instrumente dekontaminieren innerhalb von 15 Sekunden.
MikroinjektionsnadelnVWRBD30512525G Nadel

References

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  1. Sheng, W., et al. Capture, release and culture of circulating tumor cells from pancreatic cancer patients using an enhanced mixing chip. Lab on a Chip. 14, 89-98 (2014).
  2. Ogunwobi, O. O., Liu, C.

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Orthotopic Mouse ModelHepatocellular CarcinomaSyngeneic Mouse ModelCancer MetastasisSurgical ImplantationCell InjectionLiver MetastasisMouse Hepatocellular CarcinomaBALB c MiceTumor Metastasis

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