عزل الكريات البيضاء من واجهة الإنسان الأم والجنين

Yi Xu; Olesya Plazyo; Roberto Romero; Sonia S. Hassan; Nardhy Gomez-Lopez

doi:10.3791/52863

يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية

مقالة منهجية

عزل الكريات البيضاء من واجهة الإنسان الأم والجنين

16K مشاهدة

⸱

DOI:

10.3791/52863

⸱

مايو 21, 2015

Yi Xu¹ , Olesya Plazyo¹ , Roberto Romero¹^,²^,³^,⁴ , Sonia S. Hassan¹^,⁵ , Nardhy Gomez-Lopez¹^,⁵^,⁶

¹Perinatology Research Branch, NICHD/NIH/DHHS, ²Department of Obstetrics and Gynecology, University of Michigan, ³Department of Epidemiology and Biostatistics, Michigan State University, ⁴Department of Molecular Obstetrics and Genetics, Wayne State University, ⁵Department of Obstetrics and Gynecology, Wayne State University School of Medicine, ⁶Department of Immunology and Microbiology, Wayne State University School of Medicine

في هذه المقالة

ملخص

الموصوف هنا هو بروتوكول لعزل ودراسة الكريات البيض المتسللة للقرعة القاعدية و decidua parietalis - واجهة الأم والجنين البشرية. يحافظ هذا البروتوكول على سلامة علامات سطح الخلية وينتج خلايا قابلة للحياة كافية للتطبيقات النهائية كما ثبت من خلال تحليل قياس التدفق الخلوي.

الملخص

يتميز الحمل عن طريق تسلل الكريات البيض في الأنسجة التناسلية وعلى واجهة الأم والجنين (القاعدي الساقط والساقط الجداري). هذه الواجهة هو الموقع التشريحي للاتصال بين الأم وأنسجة الجنين. وبالتالي، فإنه هو موقع المناعية للعمل خلال فترة الحمل. التسلل الكريات البيض في واجهة الأم والجنين دورا أساسيا في غرس والصيانة الحمل، وتوقيت التسليم. ولذلك، فإن الأوصاف المظهرية والوظيفية لهذه الكريات البيض توفر نظرة ثاقبة الآليات التي تؤدي إلى اضطرابات الحمل. وقد وصفت عدة بروتوكولات من أجل عزل التسلل الكريات البيض من القاعدي الساقط والجدارية الساقط. ومع ذلك، فإن عدم الاتساق في الكواشف، والإنزيمات، ومرات من الحضانة يجعل من الصعب مقارنة هذه النتائج. الموصوفة هنا هو نهج الرواية التي تجمع بين استخدام ديس الميكانيكية والأنزيمية لطيفتقنيات ociation للحفاظ على سلامة ونزاهة علامات خارج الخلية والخلايا في الكريات البيض معزولة عن الأنسجة البشرية في واجهة الأم والجنين. وبصرف النظر عن المناعي، زراعة الخلايا، والفرز الخلية، والتطبيقات المستقبلية من هذا البروتوكول عديدة ومتنوعة. بعد هذا البروتوكول، والكريات البيض معزولة يمكن استخدامها لتحديد الحامض النووي والتعبير عن الجينات المستهدفة، في وظائف المختبر الكريات البيض (أي البلعمة، سمية الخلايا وانتشار الخلايا التائية، واللدونة، وما إلى ذلك)، وإنتاج أنواع الاكسجين التفاعلية في واجهة الأم والجنين. بالإضافة إلى ذلك، باستخدام بروتوكول وصفها، لقد كان هذا المختبر قادرة على وصف الكريات البيض جديدة ونادرة في واجهة الأم والجنين.

المقدمة

يتميز الحمل عن طريق ثلاث مراحل متميزة المناعية: 1) غرس والمشيمة المبكرة المرتبطة استجابة الموالية للالتهابات (أي زرع يشبه "جرح مفتوح ')؛ 2) الثلث الثاني من الحمل وأكثر من الثلث الثالث من الحمل عندما يتم تحقيق توازن المناعة من خلال دولة في الغالب مضادة للالتهابات في واجهة الأم والجنين. و3) الولادة، دولة الموالية للالتهابات ^1-7. الخلايا المناعية تلعب دورا هاما في تنظيم الاستجابة الالتهابية في واجهة الأم والجنين حيث وفرة والتغيير توطين طوال فترة الحمل ^6-9.

في البشر، واجهة الأم والجنين تمثل مساحة الاتصال المباشر بين الأم (الساقط)....