Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Heterotopische Cervical harttransplantatie in Muizen

11.8K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52907

⸱

25 augustus 2015

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

In dit artikel

Samenvatting

De manchettechniek verkort en vergemakkelijkt het model van heterotope cervicale harttransplantatie bij muizen door technisch uitdagende hechtingsanastomosen van kleine bloedvaten te vermijden. De technische details die in dit videopapier worden getoond, zouden onderzoekers in staat moeten stellen dit model in hun laboratoria tot stand te brengen.

Samenvatting

De heterotope cervicale harttransplantatie bij muizen is een waardevol hulpmiddel in transplantatie- en cardiovasculair onderzoek. De manchettechniek vereenvoudigt dit model aanzienlijk door uitdagende hechtingen van kleine bloedvaten te vermijden, waardoor de warme ischemietijd wordt verkort. In vergelijking met abdominale graftimplantatie is het cervicale model minder invasief en is het geïmplanteerde graft gemakkelijk toegankelijk voor verdere follow-up onderzoeken. Anastomosen worden uitgevoerd door de opgaande aorta van het graft over de manchet te trekken met de gemeenschappelijke halsslagader van de ontvanger en door de hoofdpulmonale slagader over de manchet te trekken met de uitwendige halsslagader. Selectie van een geschikte manchetmaat en volledige mobilisatie van de bloedvaten zijn belangrijk voor succesvolle revascularisatie. Ischemie-reperfusie (I/R) schade kan worden geminimaliseerd door het graft te perfunderen met een cardioplegische oplossing en door hypothermie. In dit artikel geven we technische details voor een vereenvoudigde en verbeterde manchettechniek, die chirurgen met basis microchirurgische vaardigheden in staat zou moeten stellen om de procedure met een hoge slagingsgraad uit te voeren.

Inleiding

De harttransplantatie model wordt vaak gebruikt om I / R-schade, allograftafstoting, post-transplantvasculopathie en de efficiëntie van immunomodulerende middelen te onderzoeken. Muismodellen combineert vele voordelen, zoals de bekende immunologische en genetische achtergronden, de beschikbaarheid van vele inteelt en transgene stammen en relatief lage experimentele kosten.

In 1973, werd een techniek van abdominale harttransplantatie bij muizen eerst beschreven door Corry et al 1. In dit model transplantaten revascularisatie door end-to-side anastomose van de aorta ascendens abdominale aorta van de ontvanger en de belan....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle experimenten werden goedgekeurd door de Duitse Hart Centrum München en de regering van Beieren, Duitsland (Gz. 55.2-1-54-2532.3-17-13). De dieren werden gehuisvest in een bepaalde ziekteverwekker gratis faciliteit en kregen menselijke zorg in overeenstemming met de "Principles of Laboratory Animal Care" door de National Society for Medical Research en de "Gids voor de Zorg en gebruik van proefdieren" die door de National Academy geformuleerd van Wetenschappen en gepubliceerd door de National Institutes of Health (NIH Publication no. 86-23, herzien 1985).
LET OP: Een complete set van steriele microchirurgische instrumenten, waaronder twee gebogen pincet en....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Ons team kon de beschreven techniek met succes uit te voeren na ongeveer 20 training operaties. De meest uitdagende gedeelte is de vaatwand van de halsslagader via manchet buiten keren, omdat dit flips heen en meerdere pogingen kan leiden tot scheuren van de wand. Na de stage, de gemiddelde totale operatieve tijd was 60 ± 8 min. Ongeveer 20 min nodig zijn voor de donor oogst, 25 min voor de bereiding van de cervicale schepen en 15 minuten voor anastomoses en de afsluiting huid.

Voor het onde.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

We hebben meer dan 200 cardiale transplantaties met een slagingspercentage van meer dan 90% in verschillende experimentele instellingen voltooid. Met de hier beschreven techniek, kan de volledige procedure binnen 60 minuten worden uitgevoerd door een ervaren chirurg. Door vóór orgaanverwerving de cervicale schepen voorbereiden, kan de totale transplantaat ischemie tijd worden beperkt tot 20 min. Tijd voor inplanting (warme ischemie tijd) aanzienlijk korter is met de manchet techniek in vergelijking met de hechtdraad

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

M.-A. Deutsch wordt ondersteund door Dr. Rusche Forschungsprojekt (2014) Deutsche Stiftung für Herzforschung en Deutsche Gesellschaft für Thorax- Herz- und Gefäßchirurgie. M. Krane wordt ondersteund door Deutsche Stiftung für Herzforschung (F/37/11), Deutsches Zentrum für Herz Kreislauf Forschung (DZHK B 13-050A; DZHK B 14-013SE) en Deutsche Forschungsgemeinschaft (KR3770/7-1; KR3770/9-1)

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Forceps JFC-7.2S&TP-00036Gebogene punt 0.20 mm
Vessel dilatator D-5aS&TS-00124
Adventita schaarS&TS-00102
Vascular clamp B-1VS&TS-00396
Yasargil ClipPeter Lazic65.0973.5 mm lengte
Bipolar forcepsMicromed148-100-011punt 0.25 mm
Polyimide buizenRiver Tech Medical19-24 gauge
8.0 zijde ligaturenCatgut
Custodiol HTK oplossingEssential Pharmaceuticals

Referenties

  1. Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplant Proc. 5, 733-735 (1973).
  2. Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52, 1099-1101 (1991).
  3. Martins, P.....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Meer artikelen verkennen

Muismodelcuff-techniekischemie-reperfusieschadevasculaire anastomosecardioplegische oplossingvena jugularis externaarteria carotis communisgraftafstotinghistopathologisch onderzoek