सरल और कम्प्यूटर की मदद से चूहे के लिए घ्राण परीक्षण
Summary
We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.
Abstract
महक अत्यधिक प्रजातियों के बीच संरक्षित है और प्रजनन और अस्तित्व के लिए आवश्यक है।
इंसानों में, महक भी उम्र बढ़ने के साथ प्रभावित है कि इंद्रियों में से एक है और neurodegenerative रोगों की एक मजबूत कारक है। इस प्रकार, महक परीक्षण पर जल्दी न्यूरोलॉजिकल घाटा पता लगाने के लिए एक गैर इनवेसिव निदान पद्धति के रूप में प्रयोग किया जाता है। घ्राण नेटवर्क संवेदनशीलता अंतर्निहित तंत्र को समझने के लिए, कृन्तकों में घ्राण अनुसंधान पिछले एक दशक में रफ्तार पकड़ ली है।
यहाँ, हम किसी भी पूर्व भोजन या पानी के प्रतिबंध की आवश्यकता के बिना चूहों में सहज गंध धारणा और संवेदनशीलता का एक बहुत ही सरल, समय कुशल और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य घ्राण परीक्षण विधि प्रस्तुत करते हैं। परीक्षण चूहों के लिए एक परिचित माहौल में प्रदर्शन कर रहे हैं, scents और odorant जोखिम के एक 2 मिनट सत्र ही आवश्यकता होती है। विश्लेषण ImageJ पर कंप्यूटर की मदद से आदेशों का उपयोग, पोस्ट-हॉक किया जाता है और इसलिए, हो सकता है, एक शोधकर्ता द्वारा समाप्त करने के लिए शुरू से ही किया जाता है।
इस प्रोटोकॉल के किसी विशेष हार्डवेयर या सेटअप की आवश्यकता नहीं है और घ्राण धारणा और संवेदनशीलता परीक्षण में रुचि किसी भी प्रयोगशाला के लिए संकेत दिया है।
Introduction
महक स्तनधारियों में सबसे विकसित और महत्वपूर्ण संवेदी कार्यों में से एक है। घ्राण गतिविधि में कोई परेशानी होती है सबसे बुरी स्थिति में भोजन का सेवन, सामाजिक व्यवहार और, यहां तक कि अस्तित्व को प्रभावित कर सकता है। इंसानों में, घ्राण गिरावट 1 निर्भर उम्र है और मस्तिष्क संबंधी बीमारियों 2 के एक मजबूत कारक माना जाता है – 6। पेन्सिलवेनिया विश्वविद्यालय द्वारा विकसित की घ्राण पहचान परीक्षण वर्तमान में जल्दी न्यूरोलॉजिकल घाटा 7 आकलन और उच्च संभावना के साथ मनोभ्रंश 8,9 की प्रगति की भविष्यवाणी कर सकते हैं, जो सबसे अधिक है, खेतों में गैर-आक्रामक और quantifiable, नैदानिक परीक्षणों में से एक का प्रतिनिधित्व करता है।
घ्राण प्रणाली और कृन्तकों में महक की शोहरत की पहुंच, अंतर्निहित तंत्र घ्राण कार्यों 10 संबोधित कर अनुसंधान का एक तीव्र लाइन छिड़ गया है। हम पहले संकेतन recept के समारोह की हानि से पता चला हैया Notch1 घ्राण परिहार 11 प्रभावित करता है। इस प्रोटोकॉल में हम घ्राण प्रदर्शन का अध्ययन करने के न्यूरॉन्स या glia में संकेतन लिगेंड, Jagged1 कमी चूहों, का उपयोग करें।
जन्मजात महक धारणा के रूप में तीन मानकों, odors और घ्राण संवेदनशीलता 4 के बीच भेदभाव से परिभाषित किया गया है। कृन्तकों में घ्राण परीक्षण के तरीकों की एक किस्म में किया जा सकता है और कुछ व्यवहार के अध्ययन के लिए एक विशिष्ट वाष्प सांद्रता में और एक सटीक समय सीमा 12 में पशु करने के लिए गंध, जो उपलब्ध कराने olfactometers, का उपयोग करना – 14। फिर भी, इस इंस्ट्रूमेंटेशन महंगा है और केवल विशेष सुविधाओं में उपलब्ध हो सकता है। हमारे काम में, हम अस्थिर scents का उपयोग किया जाता है जो एक सरल, तेज और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य घ्राण परीक्षण प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं। परीक्षण एक attractant या एक से बचाने वाली क्रीम गंध करने के लिए उपाय धारणा करार दिया और खुशबू और पानी 11,15,16 के बीच भेदभाव का मूल्यांकन। डब्ल्यू, एक ही स्थापना का प्रयोगई भी अलग सांद्रता 16,17 पर एक गंध के प्रति संवेदनशीलता उपाय कर सकते हैं। पृष्ठ और उनके सहयोगियों ने 18 के काम से प्रेरित पद-हॉक कंप्यूटर की मदद से वीडियो प्रसंस्करण, प्रयोगात्मक चकाचौंध और पूरे प्रयोग के लिए बाहर ले जाने के लिए एक ही व्यक्ति के लिए अनुमति की आवश्यकता के बिना निष्पक्ष परिणाम प्रदान करता है।
इस प्रोटोकॉल चूहों में घ्राण व्यवहार के अध्ययन के लिए एक प्रारंभिक बिंदु प्रदान करने का इरादा है।
Protocol
Representative Results
Discussion
odors के लिए धारणा है, odors के लिए पानी और संवेदनशीलता बनाम odors के बीच भेदभाव: इस प्रोटोकॉल में प्रस्तावित परीक्षण चूहों में जन्मजात घ्राण व्यवहार के विभिन्न पहलुओं का मूल्यांकन करने के लिए अनुमति देते हैं। इ…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work is funded by the Swiss National Foundation (31_138429) and Synapsis Foundation for the support of research on Alzheimer’s disease.
Materials
| Mouse cage | Italplast (Italy) | 1144B | 36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height |
| Chipped wood bedding | Abedd (Austria) | LTE E-001 | 3 cm high |
| Peanut butter | Migros (Swizterland) | NA | 1:10 |
| 2-Methylbutyric | Sigma Aldrich (Switzerland) | W269514 | Pure |
| Female Urine from fertile females of same mouse strain | NA | NA | Dilution series |
| Camera | Olympus (US) | Camedia C-8080 | MOV files |
| Quicktime for Java (Windows) | Apple (USA) | NA | video plugin for visualizing MOV files |
| Image J for Windows | NIH (USA) | NA | Video Processing/Analysis |
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