Ortotópico de la extremidad posterior de trasplante en el ratón

Resumen

Este modelo novedoso para posterior trasplante ortotópico extremidad en el ratón, la aplicación de una técnica de manguito no de sutura para la anastomosis super-microvascular, proporciona una herramienta poderosa para la investigación inmunológica in vivo mecanicista relacionada con alotrasplante compuesto vascularizado (VCA).

Resumen

Los sistemas de modelos animales in vivo, y en particular los modelos de ratón, han evolucionado hasta convertirse en herramientas científicas potentes y versátiles indispensables para la investigación básica y traslacional en el campo de la medicina de trasplantes. Una amplia gama de reactivos está disponible exclusivamente en este entorno, incluidos los anticuerpos monoclonales y policlonales para aplicaciones diagnósticas e intervencionistas. Además, un gran número de cepas genotipadas, endogámicas, transgénicas y knock out permiten una investigación detallada de las contribuciones individuales de los componentes humorales y celulares a la compleja interacción de una respuesta inmunitaria y convierten al ratón en el estándar de oro para la investigación inmunológica.

El alotrasplante compuesto vascularizado (VCA) delinea un nuevo campo de trasplante utilizando aloinjertos para reemplazar "lo similar con lo similar" en pacientes que sufren pérdida de tejido traumática o congénita. Este protocolo metodológico quirúrgico muestra el uso de una técnica de manguito sin sutura para la anastomosis supermicrovascular en un modelo ortotópico de trasplante de extremidades traseras de ratón. El modelo permite específicamente la comparación entre los paradigmas establecidos en el trasplante de órganos sólidos con una nueva forma de trasplante que consiste en varios componentes tisulares diferentes. De manera única, este modelo permite el trasplante de un compartimento y nicho de médula ósea vascularizada viable que tiene el potencial de ejercer un efecto beneficioso sobre el equilibrio de la aceptación y el rechazo inmunológico. Esta técnica proporciona una herramienta para investigar el reconocimiento de aloantígenos y el rechazo y la aceptación del aloinjerto, así como permite la realización de estudios de regeneración funcional del nervio para avanzar aún más en este nuevo campo del trasplante.

Introducción

A finales de los noventa se anunciaron los días pioneros del trasplante reconstructivo con el primer trasplante de mano exitoso realizado en Francia en 1998. Desde entonces, el uso de VCA para la reconstrucción de defectos tisulares devastadores se ha empleado con éxito en un amplio espectro de pacientes. Hasta la fecha, el mundo cuenta con 76 receptores de 112 extremidades superiores, así como 31 rostros ^1-3. Además, se han realizado varios otros tipos de VCA como la pared abdominal ⁴, la laringe ⁵, la tráquea ⁶, las articulaciones vascularizadas ⁷ e incluso el pene ⁸. Además, recientemente se ha repor....

Protocolo

Todos los experimentos se llevaron a cabo de conformidad con la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio del Instituto Nacional de Salud (NIH) y fueron aprobados por el Comité de la Universidad Johns Hopkins y Uso Animal Care (JHUACUC). Los procedimientos específicos se realizaron bajo el protocolo ACUC MO13M108 aprobado.

1. Operación del Donante

1. Administrar analgesia en el punto de tiempo apropiado para cada formulación farmacológica antes de la cirugía. De acuerdo con el cuidado de los animales y el uso del protocolo aprobado el uso de 0,1 mg / kg de peso corporal por vía subcutánea de buprenorfina 1 hora antes de la incisión de la p....

Resultados

Realización de alotrasplante compuesto vascularizado en un modelo de ratón usando una técnica no sutura del manguito permite lograr una excelente y de larga supervivencia del injerto plazo y animal como se muestra en la Figura 1. Además, se representa un método fiable de obtener resultados reproducibles de rechazo gradual aloinjerto en compuesto vascularizado alotrasplante como se documenta por las imágenes que se muestran en la Figura <.......

Discusión

Vascularizado compuesto alotrasplante, tales como las extremidades superiores y el trasplante de cara para la reconstrucción de defectos de tejidos devastadores, se ha desarrollado como una opción válida de tratamiento para los pacientes que no modificables a procesos de reconstrucción convencionales. Los avances técnicos en el campo de la microcirugía reconstructiva, así como una vasta experiencia con potente inmunosupresor y terapias inmunomoduladoras en el trasplante de órganos sólidos, ahora permite la supervivencia.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Sutura, 6-0 Nylon	MWI	31849
Sutura, 6-0 Polysorb	MWI	72667
Sutura, 10-0 Nylon	Aero Surgical	TK-107038
Tubo de poliimida, tamaño 25	Vention Medical	141-0023
Tubo de poliimida, tamaño 27	Vention Medical	141-0015
Pinzas microvasculares (individuales)	Synovis	00396
Pinzas Microvasculares (Dobles)	Synovis	00414
Microtijeras	Synovis	SAS-18
Micropinzas	Synovis	FRS-15 RM-8
Microdilatadores	Synovis	FRS-15 RM-8D.1
Micro-Needledriver	Synovis	C-14
Aplicador de micro-abrazadera	Synovis	CAF-4
Aguja de microlavado	Hamilton		10 mm, 30 grados, 33 g
Solución de timbres lactatos	Fisher Scientific	NC9968051
Buprenorfina			Número DEA requerido; Se obtiene de la farmacia hospitalaria.
Enrofloxacina; Baytril	Bayer Health Care	186599
Heparina			Obtenida de farmacia hospitalaria