Summary

Facile Framställning av Internt Själv monterade lipidpartiklar som stabiliseras av kolnanorör

Published: February 19, 2016
doi:

Summary

We report on a smart application of carbon nanotubes for kinetic stabilization of lipid particles that contain self-assembled nanostructures in their cores. The preparation of lipid particles requires rather low concentrations of carbon nanotubes permitting their use in biomedical applications such as drug delivery.

Abstract

Vi presenterar en enkel metod för att framställa nanostrukturerade lipidpartiklar stabiliserade av kolnanorör (cnts). Enkelväggiga (pristine) och multi-walled (funktionaliserade) cnts används som stabilisatorer för framställning av Pickering typ olja-i-vatten (O / W) emulsioner. Lipider nämligen Dimodan U och Fytantriol används som emulgeringsmedel, som i överskott av vatten själv montera in den dubbelkontinuerliga kubiska Pn3m fas. Denna mycket viskösa fasen är fragmenterad till mindre partiklar med hjälp av en sond ultraljud i närvaro av konventionella stabilisatorer eller cnts som görs här ytaktiva. Initialt är cnts (pulverform) dispergeras i vatten följt av ytterligare ultrasonication med den smälta lipiden för att bilda den slutliga emulsionen. Under denna process cnts blir belagd med lipidmolekyler, vilka i sin tur förmodas att omge lipiddroppar för att bilda en partikelformig emulsion som är stabil i månader. Den genomsnittliga storleken på CNT-stabiliserade nanostrukturerade lipidpartiklar är i submikron range, vilket kan jämföras bra med partiklarna stabiliseras med hjälp av konventionella tensider. Liten vinkel röntgenstrålespridning data bekräftar bibehållandet av den ursprungliga Pn3m kubiska fasen i CNT-stabiliserade lipiddispersioner i jämförelse med den rena lipidfasen (bulktillståndet). Blåförskjutning och sänkning av intensitet i karaktäristisk G och G 'band av cnts observerats i Raman-spektroskopi karaktärisera interaktionen mellan CNT yt- och lipidmolekyler. Dessa resultat tyder på att interaktionerna mellan de cnts och lipider är ansvariga för deras ömsesidiga stabilisering i vattenhaltiga lösningar. Som koncentrationerna av cnts som användes för stabilisering är mycket låga och lipidmolekyler har möjlighet att funktionalisera de cnts, är toxiciteten hos cnts förväntas bli obetydlig medan deras biokompatibilitet har ökat avsevärt. Därav den nuvarande modellen finner en stor potential i olika biomedicinska tillämpningar, till exempel för att utveckla hybrid nanocarrier system för leverans av multiple funktionella molekyler som i kombinationsterapi eller polyterapi.

Introduction

Under de senaste decennierna har nanotekniken framträtt som ett kraftfullt verktyg speciellt inom området för preklinisk utveckling av läkemedel för att bekämpa ökända sjukdomar såsom cancer 1. I detta sammanhang, nanostrukturer med storlek <1000 nm omfattande utforskas som leveransfordon av olika aktiva biomolekyler såsom läkemedel, proteiner, nukleinsyror, gener och diagnostiska avbildningsmedel 1-4. Dessa biomolekyler är antingen inkapslade i nanopartiklar eller konjugerade på ytan av nanopartiklar och släpps vid verkningsstället genom triggers såsom pH eller temperatur 5,6. Även om extremt små i storlek, den stora ytarean av dessa nanopartiklar visar sig vara i hög grad fördelaktigt för målinriktad tillförsel av aktiva biomolekyler. Den kontroll över partikelstorlek och biokompatibilitet är av yttersta vikt för att optimera den terapeutiska effekten och därmed tillämpligheten av nanopartiklar 7,8.Lipider 9-13, polymerer 14,15, metaller 16,17 och kolnanorör 18,19 har vanligen som nanocarriers för olika biomedicinska och farmaceutiska tillämpningar.

Dessutom nanocarrier applikationer baserade på lipid själv monterade nanostrukturer har ett stort betydelse i många andra discipliner, inklusive mat och kosmetikindustrin 20,21. Till exempel, används de i proteinkristallisering 22, separation av biomolekyler 23, som livsmedelsstabiliseringsmedel t.ex., i desserter 24, och i leveransen av aktiva molekyler såsom näringsämnen, smakämnen och parfymer 25-31. Själv monterade lipid nanostrukturer inte bara har förmågan att frisätta bioaktiva molekyler på ett kontrollerat och målinriktat sätt 32-38 men de är också i stånd att skydda de funktionella molekyler från kemisk och enzymatisk nedbrytning 39,40. Även plana vätska biskikt är den mest commpå nanostruktur som bildas av amfifila lipidmolekyler i närvaro av vatten, är andra strukturer, såsom hexagonal och kubisk också vanligt förekommande 20,41,42. Den typ av nanostruktur som bildas beror på de lipider 'molekylform struktur, lipidkompositionen i vatten såväl som på de fysikalisk-kemiska betingelser som används, såsom temperatur och tryck 43. Tillämpligheten av icke plana lipid nanostrukturer särskilt av kubiska faser, är begränsad på grund av deras höga viskositet och icke-homogen domän konsistens. Dessa problem övervinns genom att dispergera de lipida nanostrukturer i stor mängd vatten för att bilda olja-i-vatten (O / W) emulsioner innehållande mikron eller submikrona dimensionerad lipidpartiklar. På detta sätt kan en lämplig produkt med låg viskositet framställas samtidigt behålla den ursprungliga lipid själv sammansatta struktur inuti de dispergerade partiklarna. Bildningen av dessa internt egen sammansatta partiklar (förkortat som ISAsomes 44 </sup> T.ex. cubosomes från kubiska faser och hexosomes från hexagonala faser) kräver vanligen en kombination av en hög energiinmatningssteg och tillsatsen av stabiliseringsmedel, såsom ytaktiva medel eller polymerer. Ny forskning i denna riktning visar tillämpningen av olika fasta partiklar 45 inkluderande kiselnanopartiklar 46, lera 47-49 och kolnanorör 50 för stabilisering av nämnda emulsioner, lämpligen betecknas som Pickering 51 eller Ramsden-Pickering emulsioner 52.

Under de senaste åren, kolbaserade nanostrukturer såsom enskilda väggar kolnanorör (SWCNT), har flera vägg kolnanorör (MWCNTs) och fullerener fått en hel del uppmärksamhet som nya biomaterial 53,54. De viktigaste frågorna är deras toxicitet 55-58, vattenolöslighet 59 och därmed deras biokompatibilitet 56. Ett effektivt sätt att ta itu med dessa frågor är ytan funktionalization med användning av icke-toxiska och biokompatibla molekyler såsom lipider. I närvaro av vatten, lipider samverkar med cnts på ett sätt som hydrofob yta cnts är avskärmad från polära vattenmedium medan lipid hydrofila huvudgrupperna hjälpa deras löslighet eller dispersion i vatten 60,61. Lipider är integrerade beståndsdelar av cellulära organeller samt vissa livsmedelsmaterial, därför deras dekoration bör helst minska toxiciteten av cnts in vivo. Biomedicinska tillämpningar oberoende baserade på cnts 18,19 och lipid nanostrukturer 9-13 är under omfattande utveckling men de program som kombinerar egenskaperna hos de två är ännu inte väl utforskade.

I detta arbete, använder vi två olika typer av lipider och tre typer av cnts varav SWCNT är på det orörda form medan MWCNTs är funktionaliserade med hydroxyl- och karboxylgrupper. Vi har använt mycket låga koncentrationer av cnts att framställa dispersionerna varsstabilitet beror på flera faktorer, t.ex., typen av lipid, typ av CNT, förhållandet mellan lipid och CNT används, såväl som på de sonication parametrar som används såsom effekt och varaktighet. Denna video protokoll ger tekniska detaljerna i en metod för att kinetiskt stabilisera lipid nanopartiklar med olika CNT-stabilisatorer.

Protocol

Varning: cnts som används i detta arbete är i nanopartikelform som kan ha ytterligare risker jämfört med deras bulk motsvarigheter. Inandning av grafit, både naturliga och syntetiska, kan orsaka dammlunga 62 liknar kol arbetstagarens pneumokonios. Dessutom har det funnits farhågor om toxicitet kolbaserade nanostrukturer och några av de tidigare studier tyder på akut och kronisk toxicitet i samband med inandning av cnts 63-68. Därför undvika inandning av fina CNT pulver och hantera den med stor omsorg. Vid ina…

Representative Results

Följande resultat representerar a) stabilitet dispersioner, b) storleksfördelningen av lipidpartiklar, c) vilken typ av självorganisering och d) bevis för lipid beläggning av cnts. Stabiliteten av dispersioner (Figur 2) följdes med användning av en 5 MP kamera med autofokus och LED-blixt. Figur 2. Schema för CNT typer (A) MW…

Discussion

Stabilisering av lipidpartiklar
Tre olika cnts används för att stabilisera de lipiddispersioner; av vilka två är flerväggig och funktionaliseras med användning av -OH och -COOH grupper, och en är enkel väggar och icke-funktionaliserade (orörd). Den cnts varierade i storlek på följande sätt (diameter x längd): MWCNT-COOH: 9,5 nm x 1,5 m; MWCNT-OH: 8-15 nm x 50 | j, m; SWCNT: 1-2 nm x 1-3 | im. De pulverformiga cnts dispergerades i vatten genom sond ultra-sonikering. Ovannämnda storle…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Vi vill tacka Dr Matthew J. Baker, nu vid University of Strathclyde, Glasgow för stöd med Raman experiment och Mr Nick Gaunt för hans tidigare arbete för detta projekt.

Materials

Dimodan U Danisco 15312 Store at 4°C, Non-hazardous. Irritant to eyes and skin
Phytantriol (> 95%, GC) TCI Europe N.V. P1674 Store at 4°C, Non-hazardous. Irritant to eyes and skin
Single walled Carbon Nanotubes (90%) Nanostructured & Amorphous Materials, Inc.  1246YJS Store at room temperature. Away from direct light. Irritating to eyes, skin and respiratory system
Multi-walled carboxylic acid functionalised Carbon Nanotubes (> 80% Caron basis, > 8% carboxylic acid functionalized) Sigma-Aldrich Co. LLC  755125 Store at room temperature. Away from direct light. Causes serious eye irritation. May cause respiratory irritation
Graphitized Multi-walled hydroxy functionalised Carbon Nanotubes (99.9%) Nanostructured & Amorphous Materials, Inc. (NanoAmor)  1224YJF Store at room temperature. Away from direct light. Irritating to eyes, skin and respiratory system
Pluronic F127 Sigma-Aldrich Co. LLC  P2443 BioReagent, suitable for cell culture. Not a hazardous substance or mixture. Store at room temperature.
Acetone (99.5%) Fisher Scientific  10134100 Highly flammable liquid. Causes serious eye irritation. May cause drowsiness or dizziness
Scintillation Vial VWR International Ltd 548‐0704 Soda‐lime glass vial with low background count Fitted with foil lined urea cap, 20 ml
Jars with loose, enfolding lids (375ml) VWR International Ltd 216-3308
Beaker , 1000mL Fisher Scientific  12942161 heavy duty, low form, with spout and graduations
Pasteur glass pipette (150 mm length) with latex bulb Fisher Scientific  10006021
Microcentrifuge tube conical snap cap 1.5mL Fisher Scientific  11558232
Spatula Fisher Scientific  11352204
Heating magnetic stirrer Fisher Scientific  11715704
Magnetic stirrer bars (cylindrical, opaque PTFE, 30mm x 7mm (l x diameter)) Fisher Scientific  10011792
Needle (0.9 mm x 40 mm cannula length) Terumo UK Ltd MN-2038MQ
Retort Stand Set – With stand, clamp, base, rod, rubber 3 jaw and bosshead Camlab Ltd, UK 1177157
Millipore water equipment Barnstead Nanopure, Thermoscientific, USA
Progen Genfuge 24D Digital Microcentrifuge Progen Scientific C-2400
Probe ultra-sonicator, with 13 mm  SONICS, Vibracell,  USA
5MP camera with auto-focus and LED flash Samsung Galaxy Fame Mobile camera
Raman Spectrometer Horiba Jobin-Yvon LabRAM HR800 spectrometer
Mastersizer 3000  Malvern Instruments Ltd, Malvern, United Kingdom
Small angle X-ray scattering (SAXS) SAXSpace camera (Anton Paar, Graz, Austria), X-ray generating equipment (ISO-DEBYEFLEX3003, GE Inspection Technologies GmbH), closed water circuit (Chilly 35, HYFRA, Germany). 

References

  1. Peer, D., et al. Nanocarriers as an emerging platform for cancer therapy. Nature Nanotech. 2, 751-760 (2007).
  2. White, R. R., Sullenger, B. A., Rusconi, C. P. Developing aptamers into therapeutics. J. Clin. Invest. 106, 929-934 (2000).
  3. Itaka, K., Chung, U. I., Kataoka, K. Supramolecular nanocarrier for gene and siRNA delivery. Nippon Rinsho Jpn. J. Clin. Med. 64, 253-257 (2006).
  4. Xu, S., et al. Development of pH-responsive core-shell nanocarriers for delivery of therapeutic and diagnostic agents. Bioorg. Med. Chem. Lett. 19, 1030-1034 (2009).
  5. Soppimath, K. S., Tan, D. C. W., Yang, Y. Y. pH-triggered thermally responsive polymer core-shell nanoparticles for drug delivery. Adv. Mater. 17, 318-323 (2005).
  6. Hans, M., Lowman, A. Biodegradable nanoparticles for drug delivery and targeting. Curr. Opin. Solid State Mater. Sci. 6, 319-327 (2002).
  7. Petros, R. A., DeSimone, J. M. Strategies in the design of nanoparticles for therapeutic applications. Nat Rev Drug Discov. 9, 615-627 (2010).
  8. Torchilin, V. P. Multifunctional nanocarriers. Adv Drug Deliver Rev. 64, 302-315 (2012).
  9. Shmeeda, H., et al. Delivery of zoledronic acid encapsulated in folate-targeted liposome results in potent in vitro cytotoxic activity on tumor cells. J. Controlled Release. 146, 76-83 (2010).
  10. Xu, Z., et al. The performance of docetaxel-loaded solid lipid nanoparticles targeted to hepatocellular carcinoma. Biomaterials. 30, 226-232 (2009).
  11. Rosenthal, E., et al. Phase IV study of liposomal daunorubicin (DaunoXome) in AIDS-related Kaposi sarcoma. Am. J. Clin. Oncol.-Canc. 25, 57-59 (2002).
  12. Dong, Y. D., Larson, I., Bames, T. J., Prestidge, C. A., Boyd, B. J. Adsorption of Nonlamellar Nanostructured Liquid-Crystalline Particles to Biorelevant Surfaces for Improved Delivery of Bioactive Compounds. Acs Appl Mater Inter. 3, 1771-1780 (2011).
  13. Rizwan, S. B., Boyd, B. J., Rades, T., Hook, S. Bicontinuous cubic liquid crystals as sustained delivery systems for peptides and proteins. Expert Opin. Drug. Deliv. 7, 1133-1144 (2010).
  14. Yoo, H. S., Park, T. G. Folate receptor targeted biodegradable polymeric doxorubicin micelles. J. Controlled Release. 96, 273-283 (2004).
  15. Khandare, J. J., et al. Dendrimer versus linear conjugate: Influence of polymeric architecture on the delivery and anticancer effect of paclitaxel. Bioconjug. Chem. 17, 1464-1472 (2006).
  16. Prabaharan, M., Grailer, J. J., Pilla, S., Steeber, D. A., Gong, S. Gold nanoparticles with a monolayer of doxorubicin-conjugated amphiphilic block copolymer for tumor-targeted drug delivery. Biomaterials. 30, 6065-6075 (2009).
  17. Fan, J., et al. Targeted anticancer prodrug with mesoporous silica nanoparticles as vehicles. Nanotechnology. 22, (2011).
  18. Bianco, A., Prato, M. Can carbon nanotubes be considered useful tools for biological applications?. Adv. Mater. 15, 1765-1768 (2003).
  19. Kam, N. W. S., Dai, H. J. Carbon nanotubes as intracellular protein transporters: Generality and biological functionality. J. Am. Chem. Soc. 127, 6021-6026 (2005).
  20. Kulkarni, C. V. Lipid crystallization: from self-assembly to hierarchical and biological ordering. Nanoscale. 4, 5779-5791 (2012).
  21. Yaghmur, A., et al. . Drug Formulations Based on Self-Assembled Liquid Crystalline Nanostructures. , 341-360 (2014).
  22. Kulkarni, C. V. . Advances in Planar Lipid Bilayers and Liposomes. 12, 237-272 (2010).
  23. Landau, E. M., Navarro, J. V. . US Pat. , (2001).
  24. Kulkarni, C., Belsare, N., Lele, A. Studies on shrikhand rheology. J. Food Eng. 74, 169-177 (2006).
  25. Mezzenga, R., Schurtenberger, P., Burbidge, A., Michel, M. Understanding foods as soft materials. Nature Mater. 4, 729-740 (2005).
  26. Ubbink, J., Burbidge, A., Mezzenga, R. Food structure and functionality: a soft matter perspective. Soft Matter. 4, 1569-1581 (2008).
  27. Dong, Y. D., Larson, I., Hanley, T., Boyd, B. J. Bulk and dispersed aqueous phase behavior of phytantriol: effect of vitamin E acetate and F127 polymer on liquid crystal nanostructure. Langmuir. 22, 9512-9518 (2006).
  28. Yaghmur, A., Glatter, O. Characterization and potential applications of nanostructured aqueous dispersions. Adv. Colloid Interface Sci. 147, 333-342 (2009).
  29. Pardeike, J., Hommoss, A., Müller, R. H. Lipid nanoparticles (SLN, NLC) in cosmetic and pharmaceutical dermal products. Int. J. Pharm. 366, 170-184 (2009).
  30. Yaghmur, A., Rappolt, M., Østergaard, J., Larsen, C., Larsen, S. W. Characterization of bupivacaine-loaded formulations based on liquid crystalline phases and microemulsions: the effect of lipid composition. Langmuir. 28, 2881-2889 (2012).
  31. Singh, H., Ye, A., Horne, D. Structuring food emulsions in the gastrointestinal tract to modify lipid digestion. Prog. Lipid Res. 48, 92-100 (2009).
  32. Angelova, A., Angelov, B., Mutafchieva, R., Lesieur, S., Couvreur, P. Self-Assembled Multicompartment Liquid Crystalline Lipid Carriers for Protein, Peptide, and Nucleic Acid Drug Delivery. Accounts Chem. Res. 44, 147-156 (2011).
  33. Clogston, J., Caffrey, M. Controlling release from the lipidic cubic phase. Amino acids, peptides, proteins and nucleic acids. J. Controlled Release. 107, 97-111 (2005).
  34. Shah, J. C., Sadhale, Y., Chilukuri, D. M. Cubic phase gels as drug delivery systems. Adv. Drug Deliver. Rev. 47, 229-250 (2001).
  35. Boyd, B. J., Whittaker, D. V., Khoo, S. M., Davey, G. Lyotropic liquid crystalline phases formed from glycerate surfactants as sustained release drug delivery systems. Int. J. Pharm. 309, 218-226 (2006).
  36. Drummond, C. J., Fong, C. Surfactant self-assembly objects as novel drug delivery vehicles. Curr. Opin. Colloid Interface Sci. 4, 449-456 (1999).
  37. Zhao, X. Y., Zhang, J., Zheng, L. Q., Li, D. H. Studies of cubosomes as a sustained drug delivery system. J. Dispersion Sci. Technol. 25, 795-799 (2004).
  38. Malmsten, M. Phase transformations in self-assembly systems for drug delivery applications. J. Dispersion Sci. Technol. 28, 63-72 (2007).
  39. Sadhale, Y., Shah, J. C. Stabilization of insulin against agitation-induced aggregation by the GMO cubic phase gel. Int. J. Pharm. 191, 51-64 (1999).
  40. Amar-Yuli, I., Azulay, D., Mishraki, T., Aserin, A., Garti, N. The role of glycerol and phosphatidylcholine in solubilizing and enhancing insulin stability in reverse hexagonal mesophases. J. Colloid Interface Sci. 364, 379-387 (2011).
  41. Rappolt, M., Leitmannova Liu, A. . Advances in planar lipid bilayers and liposomes. 5, 253-283 (2006).
  42. Rappolt, M., Cacho-Nerin, F., Morello, C., Yaghmur, A. How the chain configuration governs the packing of inverted micelles in the cubic Fd 3 m-phase. Soft Matter. 9, 6291-6300 (2013).
  43. Kulkarni, C. V., Wachter, W., Iglesias-Salto, G., Engelskirchen, S., Ahualli, S. Monoolein: a magic lipid?. Phys. Chem. Chem. Phys. 13, 3004-3021 (2011).
  44. Yaghmur, A., de Campo, L., Sagalowicz, L., Leser, M. E., Glatter, O. Emulsified Microemulsions and Oil-Containing Liquid Crystalline Phases. Langmuir. 21, 569-577 (2005).
  45. Kulkarni, C. V., Glatter, O., Nissim, G. Ch. 6. Self-Assembled Supramolecular Architectures: Lyotropic Liquid Crystals.Surface and Interfacial Chemistry. , (2012).
  46. Salonen, A., Muller, F. O., Glatter, O. Internally Self-Assembled Submicrometer Emulsions Stabilized by Spherical Nanocolloids: Finding the Free Nanoparticles in the Aqueous Continuous Phase. Langmuir. 26, 7981-7987 (2010).
  47. Guillot, S., Bergaya, F., de Azevedo, C., Warmont, F., Tranchant, J. F. Internally structured pickering emulsions stabilized by clay mineral particles. J. Colloid Interface Sci. 333, 563-569 (2009).
  48. Muller, F., Salonen, A., Glatter, O. Monoglyceride-based cubosomes stabilized by Laponite: Separating the effects of stabilizer, pH and temperature. Colloids Surf., A. 358, 50-56 (2010).
  49. Salonen, A., Muller, F. O., Glatter, O. Dispersions of Internally Liquid Crystalline Systems Stabilized by Charged Disklike Particles as Pickering Emulsions: Basic Properties and Time-Resolved. Langmuir. 24, 5306-5314 (2008).
  50. Gaunt, N. P., Patil-Sen, Y., Baker, M. J., Kulkarni, C. V. Carbon nanotubes for stabilization of nanostructured lipid particles. Nanoscale. 7, 1090-1095 (2015).
  51. Pickerings, S. U. Emulsions. J. Chem. Soc. 91, (2001).
  52. Ramsden, W. Separation of Solids in the Surface-Layers of Solutions and ‘Suspensions’ (Observations on Surface-Membranes, Bubbles, Emulsions, and Mechanical Coagulation). — Preliminary Account. Proceedings of the Royal Society of London. 72, 156-164 (1903).
  53. Lin, Y., et al. Advances toward bioapplications of carbon nanotubes. J. Mater. Chem. 14, 527-541 (2004).
  54. Saito, N., et al. Safe Clinical Use of Carbon Nanotubes as Innovative Biomaterials. Chem. Rev. 114, 6040-6079 (2014).
  55. Pulskamp, K., Diabate, S., Krug, H. F. Carbon nanotubes show no sign of acute toxicity but induce intracellular reactive oxygen species in dependence on contaminants. Toxicol. Lett. 168, 58-74 (2007).
  56. Smart, S. K., Cassady, A. I., Lu, G. Q., Martin, D. J. The biocompatibility of carbon nanotubes. Carbon. 44, 1034-1047 (2006).
  57. Colvin, V. L. The potential environmental impact of engineered nanomaterials. Nat. Biotechnol. 21, 1166-1170 (2003).
  58. Firme, C. P., Bandaru, P. R. Toxicity issues in the application of carbon nanotubes to biological systems. Nanomed-Nanotechnol. 6, 245-256 (2010).
  59. Haddon, R. C. Carbon nanotubes. Accounts Chem. Res. 35, 997-997 (2002).
  60. Kapralov, A. A., et al. Adsorption of Surfactant Lipids by Single-Walled Carbon Nanotubes in Mouse Lung upon Pharyngeal Aspiration. Acs Nano. 6, 4147-4156 (2012).
  61. Wallace, E. J., Mark, S. P. S. Carbon nanotube self-assembly with lipids and detergent: a molecular dynamics study. Nanotechnology. 20, 045101 (2009).
  62. George, R. B. Chest medicine: essentials of pulmonary and critical care medicine. Lippincott Williams & Wilkins. , (2005).
  63. Monteiro-Riviere, N. A., Nemanich, R. J., Inman, A. O., Wang, Y. Y., Riviere, J. E. Multi-walled carbon nanotube interactions with human epidermal keratinocytes. Toxicol. Lett. 155, 377-384 (2005).
  64. Shvedova, A., et al. Exposure to carbon nanotube material: assessment of nanotube cytotoxicity using human keratinocyte cells. J. Toxicol. Env. Heal. A. 66, 1909-1926 (2003).
  65. Jia, G., et al. Cytotoxicity of carbon nanomaterials: single-wall nanotube, multi-wall nanotube, and fullerene. Environ. Sci. Technol. 39, 1378-1383 (2005).
  66. Sato, Y., et al. Influence of length on cytotoxicity of multi-walled carbon nanotubes against human acute monocytic leukemia cell line THP-1 in vitro and subcutaneous tissue of rats in vivo. Mol. BioSyst. 1, 176-182 (2005).
  67. Bottini, M., et al. Multi-walled carbon nanotubes induce T lymphocyte apoptosis. Toxicol. Lett. 160, 121-126 (2006).
  68. Cui, D., Tian, F., Ozkan, C. S., Wang, M., Gao, H. Effect of single wall carbon nanotubes on human HEK293 cells. Toxicol. Lett. 155, 73-85 (2005).
  69. Huang, T., Toraya, H., Blanton, T., Wu, Y. X-ray powder diffraction analysis of silver behenate, a possible low-angle diffraction standard. J. Appl. Crystallogr. 26, 180-184 (1993).
  70. Bokobza, L., Zhang, J. Raman spectroscopic characterization of multiwall carbon nanotubes and of composites. Express Polym. Lett. 6, 601-608 (2012).
  71. Zhao, Q., Wagner, H. D. Raman spectroscopy of carbon-nanotube-based composites. Philos. Trans. R. Soc. London, Ser. A -Math. Phys. Eng. Sci. 362, 2407-2424 (2004).
  72. Douroumis, D., Fatouros, D. G., Bouropoulos, N., Papagelis, K., Tasis, D. Colloidal stability of carbon nanotubes in an aqueous dispersion of phospholipid. Int. J. Nanomed. 2, 761-766 (2007).
  73. Worthington, R. J., Melander, C. Combination approaches to combat multidrug-resistant bacteria. Trends Biotechnol. 31, 177-184 (2013).

Play Video

Cite This Article
Patil-Sen, Y., Sadeghpour, A., Rappolt, M., Kulkarni, C. V. Facile Preparation of Internally Self-assembled Lipid Particles Stabilized by Carbon Nanotubes. J. Vis. Exp. (108), e53489, doi:10.3791/53489 (2016).

View Video