Protocol
このプロトコルは、ローカルの人間研究倫理委員会のガイドラインに従っています。
1.準備
- それは、血液採取のような、他の処理と一致しないように、微小循環測定をスケジュールします。用語の新生児ではそれが最高の給餌後に行われます。これは、攪拌を防止し、測定を容易にします。
- 看護師や親がサポートしており、新生児個別発達ケアと評価プログラム12の原理を用いて、検査中に新生児を慰めるために出席することを確認してください。
注：測定は一人で行うことができますが、それは非常に二人目は、支援することを推奨します。一つは、カメラを保持し、他のコンピュータとソフトウェアを操作しながら、新生児に焦点を当てています。我々の経験では、これは、より高品質の画像と処置のより短い持続時間をもたらします。 - 新生児の許可の臨床症状は、配置した場合仰臥位での新生児。微小循環イメージングは腹臥位で実施することができるが、これはより多くのスキルと忍耐を必要とします。
- （ - 37.5摂氏36.5）早産児の体温が適切な範囲内にあることを確認します。
2.手順
- インキュベーターに沿ってデバイスをインストールしてください。インキュベーターは、右の高さであることを確認します。
- カメラの使い捨てキャップを入れてください。
- ゲル、油または生理食塩水は、プローブの先端に適用します。これは、プローブと皮膚との接触を滑らかにするのに役立ちます。
- 幼児上腕の腹内側側にカメラを置きます。フォーカス・アーティファクトを防止するために、プローブを皮膚に垂直であることを確認してください。これは、幼児の腕の再配置が必要な場合があります。
注意：上腕の腹内側側は皮膚の微小循環を測定するための主要な場所です。この場所は少し産毛の髪をしているため、アーティファクトが少ない傾向です。これは、最も簡単に到達します患者が仰臥位に位置する場合。 - 手順の長さの合計を最小にするために、最小限のアーティファクトで場所を検索しながら、焦点の最適な深さ（ 図3）を見つけることによって、時間を稼ぎます。
注意：焦点深度は、出生後の年齢ではなく、在胎週数に主に依存します。 80ミクロン - 人生の最初の週の焦点の平均深さは0です。 1〜200ミクロン- -生後4週齢（ 図2）以下では、皮膚の成熟のために、焦点深度が急速に80の平均値で増加します。出生時の160ミクロン - 用語生まれの新生児では、焦点の平均深さは80です。 - 運動アーチファクトを回避するために、プローブを安定させます。これを行うには、インキュベーターウィンドウと新生児の横に手首に肘を休ま。また、枕の新生児と一緒にプローブを配置します。
- カメラをさせることにより、圧力アーティファクトを避ける唯一の皮膚にわずかな接触を持っています。圧力アーティファクトは、rすることができます血管中または小血管内の良好な流れがある一方で大型船が非灌流している場合がある場合は、前後の流れを撮影中ecognized。また、流れのパターンが画面全体を通して同じである場合、圧力の遺物には注意してください。
- 5秒の最小持続時間を録音する動画。
- 成功キャプチャした後、上腕上の別の場所にカメラを移動。
注：これは、合計5にキャプチャすることをお勧めします - いくつかのアーティファクトが唯一の問題で映像が分析のため使用できないことを意味し、オフライン解析、で認識されるように、5つの異なる場所 - 3で10ビデオ。 - そっと小さなガーゼで皮膚からゲル、油または生理食塩水を除去します。
3.オフライン分析
- 分析を妨げる重大な動きがある場合は、ビデオをトリミング。 「ツール」セクションに移動し、ボタン「エディタ」を使用しています。分析の対象フレーム間隔を選択し、「クロップビデオ「B]をクリックしますutton。注意：動きは、フィールドビュー13の1/2以内であればビデオが許容されています。
- トリミングされたビデオを選択し、それを安定化させます。 「ツール」セクションに移動し、ボタン「分析」を使用しています。 「安定化」ボタンをクリックします。
注意：自動解析を実行する前に、すべての映画は安定化されなければなりません。 - 安定化されたビデオを選択します。セクション「分析」に移動し、「検出」ボタンをクリックします。オプション「毛細血管」と「船」が強調されていることを確認してください。
- 検出（ 図4）した後、完全な微小循環のレポートの「CNA」や「デ・バッカー」ボタンをクリックします。このレポートでは、最も使用される結果の総血管密度（TVD）のようなパラメータ、灌流血管密度（PVD）と灌流船舶（PPV）の割合が含まれています。
注意：別の方法として、ビデオを手動で分析するオフラインでエクスポートすることができます。このオプションは、セクション「ツール」に記載されています。セオプション 'エクスポート」をLECTと「AVAのエクスポート」ボタンをクリックします。
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Representative Results
まだ図1および図2の代表的な高品質MIビデオの画像。これらの例は、生後1日齢（図1）および 28日目（図2）との間の同じ乳児の皮膚の厚さの差を示します。 1日目に、明るい照明、マイクロ血管や人工物の最小限の存在に十分な焦点があります。 28日目にそれが原因で、より厚い皮膚に微細血管や工芸品を中心との間の適切なバランスを見つけることはより困難です。安定性、持続時間と圧力の工芸品は、これらの静止画像で判断できないことに注意してください。これは、画像の取得中またはオフラインで分析する前に注意すべきです。
図1。 早産児のMI 24週妊娠期間、1日目。経皮M24週の妊娠期間で生まれた乳児の私。乳児の出生後の年齢は1日です。焦点の使用深さは40μmである。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図2。 早産児24週妊娠期間のMI、24週の妊娠期間で生まれた乳児の28日目経皮MI。乳児の出生後の年齢は28日間です。焦点の使用深さは160μmである。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
図3.違いがフォーカスDですepth。まったく同じ面積のこれらの2つの画像は、十分な焦点深度の重要性を強調しています。不適切なフォーカス（左）は、適切なフォーカス（右）と比較して、血管の可視性の損失をもたらす。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
自動オフライン分析の図4.結果。この図は、自動オフライン解析の結果を示す。 この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。
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Discussion
本稿では、我々は説明し、早産新生児における経皮微小循環イメージングのためのアプローチを示しています。再現性と新しい技術を学習時間と労働集約的性質：このメソッドの可視化の研究者が研究の最大の課題のうちの2つを克服するのに役立ちます。この技術は、非侵襲的に早産児における末梢微小循環の有益な情報を提供することができます。シリアル測定は、臨床医が治療的介入の効果を評価することができます。微小循環は、酸素輸送チェーンの最後のステップが発生する領域です。観察研究は、微小循環の経時劣化や細菌感染14の存在との関係を実証しました。周辺の微小循環の悪化は、早産児における敗血症の最初の兆候の1つであるので、それは一般的に、末梢の微小循環が開発を予測できると仮定されています敗血症。
画像の品質は、主にオペレータのスキルに依存します。最新のカメラ装置は、より良い技術仕様およびハードウェアを提供していますが、これは二次的な重要性はまだです。オペレータは適切に微小循環イメージングの訓練を受けなければなりません。彼らは、2006年15で、アムステルダムで開催された円卓会議の勧告にマッシーら 13によって開発された品質基準を理解する必要があります。これらの6つの基準（照明、継続時間、フォーカス、コンテンツ、安定性、圧力）は、高品質で信頼できるデータの基礎となっています。経験の浅いオペレータは頻繁に圧力アーティファクト16を発生する認識に失敗する可能性があります。これらの品質基準および勧告は、成人の舌下MI測定のために起草されており、直接早産児における皮膚MI測定に推定することはできないことに注意してください。持続時間とコンテンツの品質基準達成することが困難です。
また、それは非常に2つの演算子で測定を行い、出席するために看護師や親を尋ねることをお勧めします。カメラは、ソフトウェアを操作する必要があり、乳児の幸福を考慮しなければならない、圧力アーティファクトを回避する必要があり、着実に保持されなければなりません。幼児が多くを動かす場合は特に、これは、1つの演算子のためのあまりです。それは、一人がカメラを処理し、測定の面積と他の人に焦点を当ててソフトウェアを操作し、乳児のバイタルサインをチェック有することが良いです。当然のことながら、MIの技術的な側面に加えて、（危篤）早産新生児を扱うの経験は、オペレータのために不可欠です。
その非侵襲的なキャラクターにもかかわらず、MIはまだ潜在的な負担やリスクを運びます。インキュベーター、これにより体温があまり低下していることを防止するために、最小限に測定時間を制限します。常にカメラに使い捨て保護キャップを適用測定の前に。このキャップの機能は2つあります。それは、プローブ先端の潜在的な温暖化から皮膚を保護し、それが細菌の送信を防止するための人工バリアとして機能します。また、MI機器は定期的に消毒する必要があります。
また、皮膚にゲルまたはオイルのほんの少しの量を適用して、静かに測定した後、それを削除します。悪用した場合、油および治療光線療法の組み合わせは、皮膚に壊滅的な影響を持つことができます。ほとんどの乳児はほとんどの測定値に反応しなかったが、心肺不安定性は排除できません。これは私たちが親や看護師がサポートしている幼児を持つことをお勧めする理由です。
データ収集の後、ビデオのオフライン解析は、標準化された方法で実行されるべきです。市販のソフトウェアは自動的にガイドライン15に従って、MIのビデオを分析することが可能です。手分析は、3つのステップを含みます。まず、コントラスト強調は、pすることができます最適なコントラストを得るためにプライ。第二に、ビデオを安定化する必要があります。このステップでは、測定時の安定性の重要性をもたらすでしょう。わずかなドリフトのための分析のためのビデオを使用できなくすることができます。第三に、船が描かれなければならないと流れが分類されなければなりません。この最後のステップは貧しいインターオブザーバ17の変動性の高いリスクを伴うことに注意してください。手動オフライン分析では、そのため、訓練を受けた研究者が行ってください。アウトカム指標を報告するための2つの方法があります。毛細血管網分析（CNA）の従来の方法は、測定された表面積（mm / mm 2）とで割った血管の全長を反映します。あるいは、デバッカースコア（DBS）を消費するより少ない時間を使用することができます。このスコアでは、3等距離水平および3等間隔の縦線が画面に描画されます。血管密度は、行（N / mm）との合計の長さで割っラインを横切る血管の数として計算することができます。
_contentは ">微小循環の研究分野には欠点がある。微小循環の不均一性が行う基準値を確立するために複雑である。そのため、研究のほとんどは、グループ間の観察研究や比較されている。微小循環動画のかなり複雑な評価と主観的な人間の干渉再現性が悪い（ヴァンデンバーグ、2015年17）の可能性が増加します。これは、ビデオを得る方法が標準化されていることが重要です。近い将来のために、技術的な進歩は、皮膚MIの研究を改善します。例では、微小血管の比較的主観的な人間の評価を交換し、それによってインターオブザーバーの変動を除外します映像、のコンピュータ解析を自動化されています。研究のこの分野を標準化するための良い例では、直列に正確に同じ場所で微小循環を測定する無線撮像センサの使用です。これは、皮膚のMIを行います少ないオペレータに依存します。
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Disclosures
著者らは、開示することは何もありません。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cytocam | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Other well known handheld microscopes to visualize the microcirculation are MicroScan (Microvision Medical) using SDF technique or the CytoScan (CytoMetrics) using OPS technique |
| Disposable Lens Cover | Glycocheck | http://www.glycocheck.com/lenscovers.php | |
| CCTools | Braedius | http://www.braedius.com/magnoliaPublic/braedius/products.html | Another well known offline analysis programme is AVA (Microvision medical). |
References
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