सेरेब्रल पाल्सी के एक नवजात माउस मॉडल में मोटर परीक्षणों के एक बैटरी

Summary

Presented is a concise battery of mouse neonatal motor tests. Using these tests, neonatal motor deficits can be demonstrated in a variety of neonatal motor disorders. By having a standardized set of tests, results from different studies can be compared, allowing for better and accurate reporting between groups.

Abstract

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, standardized battery of neonatal mouse motor tests. These tests can validate injury or disease models, determine treatment efficacy and/or assess motor behaviors in new transgenic strains. This paper presents a series of neonatal motor tests to evaluate general motor function, including ambulation, hindlimb foot angle, surface righting, negative geotaxis, front- and hindlimb suspension, grasping reflex, four limb grip strength and cliff aversion. Mice between the ages of post-natal day 2 to 14 can be used. In addition, these tests can be used for a wide range of neurological and neuromuscular pathologies, including cerebral palsy, hypoxic-ischemic encephalopathy, traumatic brain injury, spinal cord injury, neurodegenerative diseases, and neuromuscular disorders. These tests can also be used to determine the effects of pharmacological agents, as well as other types of therapeutic interventions. In this paper, motor deficits were evaluated in a novel neonatal mouse model of cerebral palsy that combines hypoxia, ischemia and inflammation. Forty-eight hours after injury, five tests out of the nine showed significant motor deficits: ambulation, hindlimb angle, hindlimb suspension, four limb grip strength, and grasping reflex. These tests revealed weakness in the hindlimbs, as well as fine motor skills such as grasping, which are similar to the motor deficits seen in human cerebral palsy patients.

Introduction

बाल चिकित्सा चोट या बीमारी मूषक का उपयोग कर के नए मॉडल के विकास अक्सर दोनों चूहों और चूहों की अद्भुत क्षमता तेजी से न्यूरोलॉजिकल चोट से उबरने के लिए के कारण मुश्किल है। इसलिए, क्रम में किसी भी नए बाल रोग मॉडल, अच्छी तरह से सेलुलर और आणविक परिवर्तन की जांच के व्यवहार परिणामों के साथ हाथ में हाथ जाना चाहिए मान्य करने के लिए है। कई मायनों में, कार्यात्मक व्यवहार वसूली चिकित्सीय या translational प्रासंगिकता के मामले में अंतर्निहित सेलुलर परिवर्तन की तुलना में अधिक महत्वपूर्ण हो सकता है। शोधकर्ताओं वयस्क और नवजात शिशु में चोट के बारे में और अधिक जानने के रूप में, यह स्पष्ट है कि उनकी प्रतिक्रिया बहुत अलग हैं और दोनों के बीच extrapolated नहीं किया जा सकता। उदाहरण के लिए, नवजात चूहों तंत्रिका वृद्धि कारक, मस्तिष्क व्युत्पन्न neurotrophic कारक, neurotrophin -3 और glial सेल लाइन व्युत्पन्न neurotrophic कारक रीढ़ की हड्डी में चोट ^1,2 निम्नलिखित के विभिन्न स्तरों प्रदर्शित करते हैं। इसके अतिरिक्त, नवजात शिशुओं के बाद स्ट्रोक ^3, डी महत्वपूर्ण रक्त मस्तिष्क बाधा रिसावपरिधीय तंत्रिका चोट के बाद ⁴ cortical न्यूरॉन पुनर्व्यवस्था emonstrate, और रीढ़ की हड्डी में चोट है और हाइपोक्सिया-ischemia ^5,6 के बाद एक देरी या धीमा astrogliosis है। इसलिए, यह है कि translational बाल चिकित्सा अनुसंधान विकासात्मक बराबर मॉडल का उपयोग करें और उन मॉडलों दोनों सेलुलर / आणविक परिवर्तन और आयु उपयुक्त व्यवहार परीक्षण के लिए मूल्यांकन कर रहे हैं कि महत्वपूर्ण है।

1000 जीवित जन्म सालाना (एनआईएच): सेरेब्रल पाल्सी (सीपी) एक मोटर विकार 3 प्रभावित करता है। वाणिज्यिक पत्र के साथ बच्चे, लक्षण और सह रोगी की स्थिति की एक श्रृंखला प्रदर्शन रोग की गंभीरता पर निर्भर करता है। आंदोलन और समन्वय के साथ कठिनाई सबसे सामान्य लक्षण, मोटर विकासात्मक मील के पत्थर तक पहुँचने में देरी के साथ साथ कर रहे हैं। अन्य लक्षण असामान्य मांसपेशियों टोन (या तो वृद्धि या कमी), ठीक मोटर कौशल, कठिनाई घूमना, अत्यधिक drooling और निगलने, और भाषण देरी (एनआईएच) कम करना शामिल है। सीपी का मूल कारण माना जा रहा हैपूर्व या peripartum अवधि, या एक साल की प्रसवोत्तर अप करने के दौरान ऑक्सीजन और / या मस्तिष्क में रक्त प्रवाह की कमी है। इसके अलावा, सूजन अब सीपी के विकास में एक महत्वपूर्ण घटक माना जा रहा है।

सीपी मामलों के बहुमत निलय, periventricular leukomalacia (PVL) के रूप में जाना जाता है चारों ओर सफेद पदार्थ के नुकसान के साथ जुड़े रहे हैं। यह मस्तिष्क संबंधी बानगी पता चलता है कि प्रारंभिक अपमान सी.पी. के लिए अग्रणी मस्तिष्क के विकास की अवधि में जब oligodendrocytes अपमान करने के लिए सबसे कमजोर कर रहे हैं के दौरान होता है। 32 सप्ताह के गर्भ – एक मानव में तेजी से oligodendrocyte विकास की अवधि भी समय था जब oligodendrocytes चोट करने के लिए सबसे अतिसंवेदनशील होते हैं, 24 के बीच है। कृंतक में, बराबर अवधि प्रसवोत्तर दिन 2 है – 7 ^7, और जब सीपी इस मॉडल में प्रेरित किया जाता है।

कि परीक्षण यहाँ रेखांकित संचालन करने के लिए इस्तेमाल किया गया था सी.पी. के नवजात माउस मॉडल एक Inj बनाने के लिए सूजन के साथ हाइपोक्सिया और ischemia को जोड़ती हैury कि बेहतर mimics neurodegeneration मानव सीपी में देखा। यह मॉडल सीपी के अन्य पशु मॉडल में मनाया प्रमुख कमियों, जो अलग मोटर घाटे कि मानव सी.पी. रोगियों जैसा दिखता है, साथ ही अलग सफेद पदार्थ के नुकसान की कमी के कुछ पते। एक सहयोगी के एक ही मॉडल का उपयोग करके पिछले अध्ययनों से दिखा दिया है कि सूजन के अलावा सफेद पदार्थ नुकसान को बढ़ाता है, इस प्रकार बेहतर PVL सी.पी. ^{8 के} साथ बच्चों में देखा नकल की है। पिछले डेटा पर बिल्डिंग, इस पत्र के क्रम में पशु उम्र के रूप में मोटर व्यवहार में परिवर्तन का मूल्यांकन करने में नवजात मोटर परीक्षण के लिए एक व्यापक बैटरी प्रस्तुत करता है।

Protocol

नोट: सभी पशु सर्जरी मंदिर विश्वविद्यालय के Ular विभाग और IACUC नीतियों और प्रक्रियाओं के अनुसार प्रदर्शन किया गया। C57BL / 6 बांधों और sires चार्ल्स नदी प्रयोगशालाओं से खरीदे गए थे और एक 12 घंटा / प्रकाश अंधेरे चक्र (7:00 पर प्रकाश – 19:00) के साथ प्रजनन पिंजरों में रखे थे भोजन और पानी के लिए स्वतंत्र पहुँच के साथ। 10 पिल्ले – प्रजनन जोड़े 5 के बीच कूड़े के आकार का उत्पादन किया। 1. सेरेब्रल पाल्सी प्रेरण सर्जरी नोट: के रूप में पहले 8,9 वर्णित सेरेब्रल पाल्सी, प्रसवोत्तर दिन (पीएनडी) 6 माउस पिल्ले का उपयोग कर प्रेरित किया गया था (http://www.jove.com/video/1951/mouse-models-of-periventricular-leukomalacia)। बर्फ पर एक कांच का कटोरा में एक पिल्ला की जगह एक प्रयोगशाला के साथ पिल्ला की त्वचा की रक्षा के लिए पोंछे। पैर चुटकी और आंदोलन की कमी से उचित संवेदनाहारी विमान के लिए जाँच करें। शल्य चिकित्सा के लिए एक गद्देदार आइस पैक करने के लिए पिल्ला ले जाएँ। पिल्ला 70% इथेनॉल का उपयोग की त्वचा जीवाणुरहित। जब सूखे, एक # 11 बाँझ सर्जिकल bla का उपयोगडे और गर्दन में 1 सेमी चीरा बनाते हैं। एक त्रिविम सर्जिकल माइक्रोस्कोप का उपयोग करना, एक छोटे हुक के साथ सही आम मन्या धमनी को अलग और एक पोर्टेबल हाथ से आयोजित cauterizer का उपयोग कर दाग़ना। नेत्रहीन पुष्टि करते हैं कि धमनी occluded है। नकली सर्जरी दाग़ना बिना दृश्य और आम मन्या धमनी के अलगाव भी शामिल है। त्वचा और बंद का उपयोग कर सिवनी गोंद (एन-ब्यूटाइल cyanoacrylate) फिर से संगठित करना। सहज श्वास और सामान्य आंदोलन के लिए नजर रखने के लिए 30 मिनट के लिए एक 34 ओ सी हीटिंग पैड पर पिल्ला रखें। पिल्ला (s) वापसी 30 मिनट के लिए बांध के लिए। एक हीटिंग पैड या अन्य वार्मिंग डिवाइस एक हाइपोक्सिया चैम्बर 35 मिनट के लिए 6% ऑक्सीजन पर सेट के अंदर 34 ओ सी पर सेट पर पिल्ले रखें। आक्सीजन नाइट्रोजन की जगह है। बारीकी से लगातार चोट परिणाम के लिए चैम्बर ऑक्सीजन का स्तर और तापमान की निगरानी। हाइपोक्सिया कक्ष से पिल्ले निकालें और उन्हें हीटिंग पैड पर वापस जाएँ। Intraperitoneally lipopoly इंजेक्षनसैकराइड 1 माइक्रोग्राम / किलो पर बाँझ खारा में पतला और बांध को पिल्ला वापसी। शाम इंजेक्शन केवल खारा के इंजेक्शन कर रहे हैं। 2. नवजात मोटर टेस्ट नोट: पीएनडी 8, सीपी शामिल होने के बाद 48 घंटा, माउस पिल्ले neurobehavioral विकास के लिए परीक्षण कर रहे हैं। पिल्ले आदेश व्यवहार में दिन मतभेद के समय को खत्म करने में दोपहर से पहले एक 4 घंटा ब्लॉक के भीतर परीक्षण कर रहे हैं। पिल्ले एक समय शरीर की गर्मी और भूख / जुदाई मुद्दों के तेजी से नुकसान को रोकने के लिए में कोई अधिक से अधिक 15 मिनट के लिए बांध से हटा रहे हैं। इसके अलावा, पिल्ले परीक्षण के बीच में आराम करने के लिए इतना है कि अधिक से अधिक प्रयासों प्रत्येक परीक्षा पर हासिल हो जाएगा अनुमति दी जाती है। नवजात मोटर परीक्षण के आधार परीक्षण 10,11 की फॉक्स की बैटरी और फॉक्स का परीक्षण 12 के Wahlsten का रूपांतरण है, साथ ही दावत-एनएमडी और अन्य व्यवहार प्रकाशनों का उपयोग कर अनुकूलित है (जैसा कि प्रत्येक परीक्षा के लिए पाठ में नोट)। 21. फॉक्स के परीक्षणों के बल्लेबाज – परीक्षण की फॉक्स की बैटरी पीएनडी 2 के लिए उपयुक्त हैंY यहां उपस्थित शामिल हैं:, पलटा ठीक पलटा लोभी, नकारात्मक geotaxis और चार अंग पकड़ शक्ति (फॉक्स की बैटरी में खड़ी स्क्रीन टेस्ट कहा जाता है) (फॉक्स और Wahlsten की स्क्रीन पर चढ़ाई परीक्षण से संशोधित)। इधर, ambulation, सामने के अंग शक्ति, और hindlimb ताकत भी दिखावा और सी.पी. माउस पिल्ले के बीच कर्मकर्त्ता मोटर व्यवहार भेद करने के लिए परीक्षण कर रहे हैं। सीखने के कारण परीक्षण पर सुधार खत्म करने के लिए, परीक्षण 3 परीक्षण की एक अधिकतम जहां उल्लेख किया तक ही सीमित थे। अन्य सभी परीक्षण पशु प्रति केवल एक परीक्षण किया था। Ambulation (चित्रा 1) (एक चूहे प्रोटोकॉल 13 से अनुकूलित): नोट: – 5, पर जो बात चूहों चलने के लिए संक्रमण के लिए, 5 से शुरू – वर्ष 14 से 10 दिनों के रेंगने व्यवहार पीएनडी 0 के बीच माउस पिल्ला के शुरू में विकसित किया है। पीएनडी 8 में, ambulation परीक्षण इस संक्रमणकालीन समय पाठ्यक्रम का लाभ लेता है। Ambulation, तथापि, एक माउस के जीवनकाल के दौरान रन बनाए जा सकते हैं और किसी भी उम्र में निर्धारित किया जा सकता है।सीखने के लिए कोई संभावित वहाँ है, ambulation परीक्षण के रूप में प्रयोग के पाठ्यक्रम के माध्यम से जरूरत के रूप में कई बार दोहराया जा सकता है। एक स्पष्ट बाड़े में जगह चूहों जहां चूहों शीर्ष के रूप में अच्छी तरह से की ओर से दिखाई दे रहे हैं। पिल्ला प्रेरित करने के लिए चलने के लिए पिल्ला की पूंछ को छू द्वारा कोमल उकसाने का प्रयोग करें। 0 = कोई आंदोलन, 1 = विषम अंग आंदोलन के साथ रेंगने, 2 = धीमी रेंगने लेकिन सममित अंग आंदोलन, और 3 = तेजी से रेंगने / घूमना: 3 मिनट निम्नलिखित पैमाने का उपयोग के लिए ambulation स्कोर। नोट: यहाँ, सममित अंग आंदोलन वर्णन किया गया है, जहां hindpaws प्रत्येक चरण के दौरान frontpaws मिलते हैं, और अगले कदम के लिए हर कदम को सुचारू रूप से संक्रमण। एक माउस विषम अंग आंदोलन प्रदर्शित अनियमित पंजा नियुक्ति और एक कदम से अगले करने के लिए संक्रमण चिकनी नहीं कर रहे हैं। चित्रा से संक्रमण 1.चलना रेंगने क्रॉलिंग के दौरान (ए) hindpaw, साथ ही सिर और पूंछ देख द्वारा प्रतिष्ठित किया जा सकता है।, पूरे वापस पंजा, एड़ी को पैर की उंगलियों से, जमीन, के रूप से चिह्नित छू लेती है जब ambulating (*)। एक वयस्क चलने पैटर्न देखा जाता है जब केवल पैर की उंगलियों और के सामने के हिस्से hindpaw जमीन को छूने (एड़ी ऊपर उठाया है, द्वारा [**] deonoted)। (बी) के सिर और एक रेंगने माउस की पूंछ जमीन के लिए कम है। सिर चलने के लिए रेंगने से संक्रमण के दौरान वृद्धि करने के लिए शुरू होता है। संक्रमण पूरा हो गया है जब दोनों के सिर और पूंछ बुलंद कर रहे हैं और केवल hindpaw के सामने जमीन को छू लेती है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। Hindlimb फुट कोण (चित्रा 2) नोट: वहाँ समझौता ज्ञापनों के रूप में hindlimb मुद्रा में एक स्पष्ट विकासात्मक परिवर्तन हैई घूमना, जहां hindlimbs शरीर के तहत तैनात हैं जब चलने और hindlimbs के बीच कोण कोण रेंगने में देखा की तुलना में कम है रेंगने से परिपक्व होती है। हालांकि hindlimb पैर कोण समय के साथ बदलता है, अलग अलग चोट या बीमारियों के साथ ही उम्र के माउस पिल्ले तुलना में किया जा सकता है। ambulation टेस्ट (3.1) के लिए इसी प्रकार, वहाँ सीखने के लिए कोई संभावित है। इस प्रकार, hindlimb पैर कोण परीक्षण के रूप में प्रयोग के पाठ्यक्रम के माध्यम से जरूरत के रूप में कई बार दोहराया जा सकता है। या तो एक स्पष्ट खुले मैदान बॉक्स या एक संलग्न क्षेत्र में, नीचे या ऊपर, क्रमशः से एक वीडियो कैमरा माउंट, पिल्ला रिकॉर्ड करने के रूप में यह मैदान के चारों ओर घूमती है। पिल्ला प्रेरित करने के लिए चलने के लिए पिल्ला की पूंछ को छू द्वारा कोमल उकसाने का प्रयोग करें। दो मिनट के लिए रिकॉर्ड। वीडियो रिकॉर्डिंग का उपयोग करना, एड़ी / पिंडली सबसे लंबे समय तक (मध्य) पैर के अंगूठे की टिप करने के अंत से एक रेखा खींचने से पिल्ले के पैर कोण को मापने। केवल माप ले जब पिल्ला एक पूरा प्रगति प्रदर्शन कर रहा हैएक सीधी रेखा में और दोनों पैर जमीन पर फ्लैट हैं। माप लेने नहीं है, जबकि पिल्ला स्थिर है या जब पिल्ला बदल रहा है। पैर कोणों से तीन से पांच सेटों उपाय और एक पिल्ला का परीक्षण के लिए औसत कोण की गणना। चित्रा 2. hindlimb फुट कोण चाल असामान्यताएं का निर्धारण किया जा सकता है। पैर कोण बीच (सबसे लंबे समय तक) अंकों के माध्यम से मध्य एड़ी से एक रेखा खींचने से मापा जा सकता है। घायल पशुओं को अधिक से अधिक पैर कोण है जब सामान्य (प्रतिनिधि परिणाम देखें, फुट कोण) की तुलना में। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। सतह को ठीक (चित्रा 3): ध्यान दें: ठीक पलटा के लिए मोटर की क्षमता है एक माउस पिल्ला एक लापरवाह स्थिति से अपने पैरों पर फ्लिप करने के लिए सक्षम हो। मूषक में प्रदर्शित करने के ठीक पलटा के लिए औसत उम्र पीएनडी 1 से एक सीमा के साथ पीएनडी 5 -। 10 से 15 के रूप में यह परीक्षण एक पलटा है, वहाँ कोई सीखने घटक है और यह प्रयोग अवधि के दौरान दोहराया जा सकता है। उनकी पीठ पर पिल्ले एक सूती चादर या बेंच पैड पर रखें और 5 सेकंड के लिए स्थिति में पकड़। पिल्ले जारी है और समय के लिए यह पिल्ला लेता प्रवण स्थिति में लौटने के लिए, साथ ही ठीक करने की दिशा (बाएं या दाएं) रिकॉर्ड है। यदि आवश्यक हो तो एक मिनट की एक कुल, प्रत्येक परीक्षण के लिए दिया जाता है। तीन परीक्षणों की कुल के लिए दोहराएँ। चित्रा 3. सतह को ठीक। इस परीक्षा में ट्रंक नियंत्रण की आवश्यकता है और आसनीय असंतुलन के लिए परीक्षण कर सकते हैं। मानव सी.पी. रोगियों को उनके मूल में घाटा हो सकता है।e.com/files/ftp_upload/53569/53569fig3large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। नकारात्मक Geotaxis (चित्रा 4) नोट: नकारात्मक geotaxis पलटा के लिए औसत उम्र मूषक में प्रदर्शित करने के पीएनडी 3 से एक सीमा के साथ पीएनडी 7 – 15 15 नकारात्मक geotaxis परीक्षण युवा चूहों में मोटर समन्वय का आकलन है।। चूहे एक ढलान नीचे का सामना करना पड़ रखा जाता है और गुरुत्वाकर्षण के vestibular संकेतों की वजह से, पिल्ले ढलान का सामना करने के लिए बारी है। प्रतिक्रिया प्रोत्साहन के लिए, या टैक्सियों, एक सहज व्यवहार है। उसके सिर के एक 45 ओ इच्छा पर नीचे की ओर इशारा करते हुए के साथ पिल्ला रखें और 5 सेकंड के लिए पकड़। पिल्ला जारी है और समय और दिशा पिल्ला ऊपर की ओर का सामना करने के लिए बदल जाता है रिकॉर्ड है। कुल परीक्षण के समय 2 मिनट है। तीन परीक्षणों की कुल के लिए दोहराएँ। चूहों कि झुकाना नीचे गिर जाते हैं या चालू करने के लिए असफल हो सकता है, या तो फिर से परीक्षण का सफाया कर दिया है, या एक शून्य अंक दिया। ध्यान दें: यह निर्णय है lपरीक्षक को ईएफटी, के रूप में कभी कभी पिल्ले नीचे झुकाना तंद्रा बजाय कमजोरी की वजह से रोल करेंगे। एक बार निर्णय पिल्ले कि नीचे झुकाना गिर स्कोर करने के लिए कैसे पर किया जाता है, यह तरीकों में ध्यान दिया जाना चाहिए और सभी विषयों के परीक्षण के दौरान अनुरूप होना चाहिए। चित्रा 4. नकारात्मक Geotaxis। मोटर और vestibular इनपुट माउस एक ढलान पर अपने रुख को समझते हैं और चारों ओर मोड़ करने के लिए आवश्यक है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। मोर्चा के अंग सस्पेंशन (चित्रा 5) 16; से 17, 18 से अनुकूलित: नोट: मोर्चा के अंग निलंबन हाथ और पंजा ताकत सहित पिल्ले, के forelimb शक्ति परीक्षण। टीअपने टेस्ट पीएनडी 10 से 15 की तुलना में छोटी पिल्ले के लिए अनुशंसित नहीं है। पिल्ले एक तार एक स्थिर वस्तु भर में अनुभूत समझ और दोनों forepaws के साथ तार पर लटका करने की अनुमति है। परीक्षण क्षेत्र एक गद्देदार ड्रॉप क्षेत्र खत्म हो गया है। परीक्षण सही / बाईं ओर ताकत अंतर का पता लगा सकते हैं। सीखने और नकारात्मक सुदृढीकरण के अभाव में वृद्धि हुई गैर भागीदारी के लिए नेतृत्व कर सकते हैं। तुरंत गिरने जब जारी या जब तार पर रखा विफलता काबू करने के लिए चूहे गैर भागीदारी के संकेत हैं। शरीर द्वारा मजबूती से पिल्ले पकड़ो और दोनों forepaws के साथ तार काबू करने के लिए उन्हें सक्षम। पिल्ला रिलीज। एक टाइमर या स्टॉपवॉच का प्रयोग, कुल समय गिर करने के लिए रिकॉर्ड है, साथ ही पंजा कमजोरी। नोट: पंजा कमजोरी अगर एक पिल्ला लगातार नहीं बल्कि एक ही समय में दोनों पंजे के साथ तार से रिहा अलावा अन्य से पहले एक पंजा के साथ तार से गिर जाता है चुना गया है। तीन बार की कुल के लिए परीक्षण दोहराएँ। <p class="jove_content" fo:keep-together.within-पेज = "1"> चित्रा 5. मोर्चा के अंग सस्पेंशन। यह निलंबन परीक्षण मांसपेशियों की थकान जब तक आगे के हाथ में तनाव का कारण बनता है। इस दृष्टिकोण के साथ, आगे के हाथ में आधारभूत शक्ति स्थापित कर रहे हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। Hindlimb निलंबन (चित्रा 6): नोट: इस निलंबन परीक्षण hindlimb ताकत निर्धारित करता है। यह एक परीक्षण नवजात शिशुओं के लिए विशेष रूप से डिजाइन है और शुरू में पीएनडी 2 के बीच जानवरों पर प्रयोग किया गया था – 12 19,20, लेकिन पीएनडी 14. इस परीक्षा में सही / छोड़ दिया hindlimb ताकत मतभेद के रूप में अच्छी तरह से neuromuscular समारोह का पता लगाने कर सकते हैं अप करने के लिए चूहों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है। एक मानक 50 मिलीलीटर शंक्वाकार इस्तेमाल किया, प्रयोगशाला पोंछे के साथ गद्देदार है। सामने के अंग निलंबन परीक्षण के लिए इसी प्रकार, इस परीक्षण सीखा जा सकता है, विशेष रूप से पापसीई वहाँ गिरने के लिए कोई नकारात्मक परिणाम है। इस प्रकार, गैर भागीदारी में वृद्धि हुई है के रूप में जारी या जब ट्यूब के किनारे पर रखा गया है, का उल्लेख किया जा सकता है रहने के लिए विफलता के रूप में के रूप में जल्द ही गिरने चूहों द्वारा देखा। एक 50 मिलीलीटर शंक्वाकार का प्रयोग, जगह पिल्ला धीरे ट्यूब में नीचे का सामना अपने पिछले पैरों रिम ​​पर लटका दिया साथ। पिल्ला रिलीज। hindlimb आसन का निरीक्षण करें। निम्नलिखित मानदंडों के अनुसार आसन स्कोर। नोट: 4 के स्कोर उठाया पूंछ के साथ सामान्य hindlimb जुदाई इंगित करता है; 3 के स्कोर का मतलब कमजोरी स्पष्ट है और hindlimbs करीब एक साथ हैं, लेकिन वे शायद ही कभी एक दूसरे को स्पर्श; 2 के स्कोर को इंगित करता है hindlimbs एक दूसरे को और अक्सर दिल को छू लेने के करीब हैं; 1 के स्कोर से पता चलता है एक कमजोरी स्पष्ट है और hindlimbs पूंछ उठाया के साथ एक स्थिति में लगा हुआ लगभग हमेशा से रहे हैं; 0 के स्कोर पूंछ को कम कर दिया है या समय के किसी भी अवधि के लिए ट्यूब पर पकड़ के लिए विफलता के साथ hindlimbs की लगातार clasping इंगित करता है। गणना यदि आवश्यक हो तो खींचती है। एक पुल qual हैवर्गीकृत जब पिल्ला शंक्वाकार ट्यूब के किनारे पर निलंबित कर दिया है, जबकि इसकी hindlimbs का उपयोग कर अपने शरीर को उठाने के लिए प्रयास करता है। एक टाइमर या स्टॉपवॉच का प्रयोग, विलंबता गिर करने के लिए रिकॉर्ड है। तीन प्रतियों में पूरे परीक्षण दोहराएँ। चित्रा 6 hindlimb सस्पेंशन। (ए)। इस निलंबन परीक्षण मांसपेशियों की थकान जब तक hindlimbs में तनाव का कारण बनता है। Hindlimbs में आधारभूत शक्ति और मुद्रा की स्थापना कर रहे हैं। (बी)। स्कोरिंग। नोट संभव आसन स्कोर का प्रदर्शन प्रतिनिधि चूहों ऊपर की संख्या। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। पकड़ शक्ति (चित्रा 7): ध्यान दें: इस परीक्षा में पंजा रों की जांच करेंगेएक ही समय में सभी चार पंजे के trength। एक 16 x 18 शीसे रेशा स्क्रीन तार किया जाता है। औसत आयु एक कृंतक एक क्षैतिज स्क्रीन काबू करने के लिए सक्षम होने के लिए पीएनडी 5 से एक सीमा के साथ पीएनडी 8 – 15 15 फॉक्स पीएनडी 2 से चार अंग क्षैतिज स्क्रीन टेस्ट के लिए इस्तेमाल किया -।। 21 10 इस परीक्षा में मानक क्षैतिज से संशोधित किया गया है आवरण जांच; यहाँ स्क्रीन सभी चार अंगों 21 के लोभी को चुनौती देने के लिए खड़ी की स्थिति के लिए एक क्षैतिज, धीरे-धीरे से घुमाया जा रहा है; कोर्टी एस 16 से अनुकूलित। जब 180 डिग्री करने के लिए उलटा माउस जाल स्क्रीन पर रखती हैं, तो विलंबता गिर करने के लिए रिकॉर्ड है। इसके अलावा, शरीर के वजन पर ध्यान दें। एक फांसी आवेग के रूप में गणना की जा सकती [गिर करने के लिए वजन (छ) x विलंबता (एसईसी)] बल गुरुत्वाकर्षण का विरोध करने की जरूरत को दर्शाती है। तार की जाली के एक टुकड़े का उपयोग, स्क्रीन पर पिल्ला जगह है। पिल्ला लगभग 5 सेकेंड के लिए इस माहौल को समायोजित करने की अनुमति दें। 180 डिग्री के लिए धीरे-धीरे स्क्रीन पलटना। अनुमानित angl रिकॉर्डस्क्रीन के ई जब पिल्ला बंद हो जाता है। तीन परीक्षणों की कुल के लिए दोहराएँ और परीक्षणों के औसत। चित्रा 7. पकड़ शक्ति। चूहे गुरुत्वाकर्षण बल बढ़ने के कारण सभी चार अंगों में मांसपेशियों में तनाव को बनाए रखने के लिए आवश्यक हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। लोभी पलटा (8 चित्रा) नोट: लोभी पलटा आमतौर पर कृन्तकों में पीएनडी 7 बजे पीएनडी 3 से एक सीमा के साथ प्रकट होता है – 15 से 15 प्रत्येक पंजा व्यक्तिगत रूप से परीक्षण किया जाता है, इस प्रकार के परीक्षण के सामने या hindlimb मुद्दों, और साथ ही sidedness मुद्दों प्रकट कर सकते हैं।। यह एक पलटा है, इस परीक्षण जब तक पलटा प्रकट होता है दोहराया जा सकता है। यह सीखने की संभावना नहीं है। एक महत्वपूर्ण चेतावनी के रूप में, इस परीक्षण लोभी शक्ति, केवल क्षमता भेद नहीं करता है, और उम्र के 15 दिन से पहले परीक्षण किया जाना चाहिए जब किशोर चूहों प्रतिक्रिया डर के कारण काबू करने के लिए शुरू करते हैं। अपनी गर्दन के कूड़ा, जिस तरह से एक माउस पिल्ला बांध द्वारा किया जाता है के लिए इसी तरह से माउस पकड़ो। इस पकड़ पिल्ला सहज निश्चल और आराम बनने के लिए, परीक्षण में आसानी के लिए अनुमति देने के लिए कारण बनता है। स्ट्रोक कुंद साथ पिल्ला के प्रत्येक पंजा, एक रेजर ब्लेड की ओर गोल। व्यक्तिगत रूप से प्रत्येक पंजा टेस्ट और उपस्थिति या लोभी के अभाव रिकॉर्ड और पंजा प्रति 1 अंक के साथ जो माउस grasps से स्कोर। नोट: सही पंजा वरीयता के लिए स्कोरिंग, सही पंजा वरीयता के लिए 100% है – – बाईं पंजा वरीयता के लिए -100%, दोनों पंजे के लिए 50% लोभी, और लोभी कोई पंजे के लिए 0%। x 100% – समीकरण इन नंबरों निर्धारित करने के लिए [/ (सही पंजा पंजा + वाम + दोनों पंजे) (बाएं पंजा पंजा सही)] है। /53569/53569fig8.jpg "/> 8 चित्रा लोभी पलटा। क्योंकि नवजात चूहों एक मजबूत डर प्रतिक्रिया की जरूरत नहीं है, इस परीक्षण सख्ती तल / पाल्मर पलटा निर्धारित करता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। क्लिफ घृणा (9 चित्रा): नोट: क्लिफ घृणा परीक्षण सजगता, साथ ही शक्ति और समन्वय भूलभुलैया और पीएनडी 1-14 22 से पिल्ले परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। एक फ्लैट ऊंचा कगार साथ एक पूर्व सुगंधित बॉक्स (जहां 5 चूहों की एक न्यूनतम अनुमति दी गई है एक बॉक्स स्वतंत्र रूप से घूमने के लिए) का इस्तेमाल किया जाता है और पिल्ला केवल उनके forepaws और उनके थूथन किनारे पर तैनात की अंकों के साथ रखा गया है। स्कोरिंग कुल समय यह चट्टान से दूर कर देते हैं और अपने पंजे और थूथन किनारे से दूर स्थानांतरित करने के लिए पिल्ला लेता है की गणना के द्वारा किया जाता है। कोई जवाब 30 सेकंड के बाद देखा जाता है, तो परीक्षण समाप्त होता है।पिल्ला धार बंद हो जाता है, तो एक भी अतिरिक्त परीक्षण किया जा सकता है। एक तरफ देखने का उपयोग करना, पूर्व सुगंधित बॉक्स के किनारे पर पिल्ला जगह है, यकीन है कि forepaws, अंक और थूथन किनारे पर ही हिस्से हैं बना रही है। पिल्ला रिलीज और टाइमर शुरू। एक बार दोनों थूथन और पंजे किनारे से हटा दिया गया है, बंद करो टाइमर और रिकार्ड समय। 3 परीक्षण की कुल के लिए परीक्षण दोहराएँ। पिल्ला चट्टान से दूर 30 सेकंड के भीतर कदम नहीं करता है, तो कोई अंक दिया जाता है। नोट: दृढ़ संकल्प है कि क्या पिल्ला बनाम बिगड़ा परीक्षक के विवेक पर छोड़ दिया है एक गैर-भागी है। चट्टान की ऊंचाई पिल्ला की उम्र पिल्ला की सुरक्षा को आश्वस्त करने के लिए समायोजित किया जा सकता है। एक छोटे ऊंचाई अधिक से अधिक ऊंचाई का अनुकरण करने के लिए एक काला "मंजिल" के साथ प्रयोग किया जा सकता है। Figurई 9. क्लिफ घृणा। Vestibular असंतुलन चट्टान से बचने के परीक्षण का उपयोग कर मापा जाता है। इधर, पिल्ला आँखें अभी भी बंद हो जाती हैं तो डर ड्राइविंग कारक चट्टान के किनारे से दूर बारी करने के लिए नहीं है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। 3. सांख्यिकीय महत्व एक सांख्यिकीय सॉफ्टवेयर का उपयोग करना परिणामों का विश्लेषण। मतलब (SEM) का मतलब ± मानक त्रुटि के रूप में डेटा व्यक्त करें। टेस्ट पैरामीट्रिक कर रहे हैं और इस प्रकार, टी परीक्षण का विश्लेषण करती है का उपयोग कर डेटा की जांच। नोट: प्रयोगों लिंग भेद के लिए परीक्षण करने के लिए तैयार नहीं थे। मतभेद सांख्यिकीय महत्वपूर्ण जब पी <0.05 माना जाता है।

Representative Results

चूहे प्रत्येक समय बिंदु के लिए अलग चूहों का उपयोग P7 (24 घंटा के बाद सर्जरी) P13 के लिए (सर्जरी के बाद 1 सप्ताह) से जांच की गई तो यह है कि एक परीक्षण के प्रतिमान सीखने के लिए एक confounding चर नहीं था। P8, प्रतिनिधि परिणाम के रूप में चयनित किया गया था के रूप में चूहों इस समय बिंदु पर सबसे बड़ा घाटा दिखाया। चलने के लिए रेंगने से संक्रमण सी.पी. नवजात चूहों में देरी हो रही है मानव सी.पी. रोगियों चाल असामान्यताएं है, पैर के अंगूठे चलने से एक scissored चाल को लेकर। इस सी.पी. मॉडल प्रदर्शित करता है मनुष्य के लिए इसी तरह के घाटे चाल के रूप में, ambulation मूल्यांकन किया गया था। चूहे एक सीधे चलने के दौरान चाल समरूपता और अंग-पंजा आंदोलन पर रन बनाए थे। सीपी 1.083 ±: 48 घंटा के बाद सर्जरी (पीएनडी 8) में, सीपी चूहों कम सममित अंग आंदोलन और एक "रेंगने" के रूप में उनके समकक्षों की तुलना में दिखावा चाल (औसत ambulation स्कोर था0.6337, एन =, दिखावा 1.639 ± .4859 बनाम 12 एन = 9; पी <0.05, चित्रा 10)। एक सप्ताह तक दोनों सी.पी. और शाम चूहों (डेटा) नहीं दिखाया चलने को संक्रमित कर दिया है। चित्रा 10 सी.पी. माउस पिल्ले शम्स के रूप में रूप में अच्छी तरह ambulate नहीं करते। शाम चूहों (काली पट्टी) 1.639 ± .4859 (एन = 9), उनकी चल विकास अर्थ विषम अंग आंदोलन और धीमी गति से रेंगने के बीच गिर जाता का एक मतलब स्कोर है। सीपी चूहों (ग्रे पट्टी), 1.083 ± .6337 (एन = 12) के एक औसत प्राप्त उनके ambulation जिसका अर्थ है कम विकसित की है और विषम अंग आंदोलन हो जाते हैं। डेटा ± SEM के मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं; * पी <0.05 है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। हिनdlimb फुट कोण सीपी में वृद्धि हुई है ambulation के अलावा, hindlimb पैर कोण मूल्यांकन किया गया था। एन = सी.पी. 77.48 ± 9.848, 9, बनाम दिखावा 54.54 ±: औसत कोण, आठ दिन पुरानी दिखावा माउस पिल्ले को अपने hindpaws एचआईएल चूहों, जो hindpaws splayed है जब एक सीधी रेखा (चित्रा 2 में चलने की तुलना में आगे का सामना करना पड़ के साथ चलना 8.043, एन = 11; पी <0.0001, चित्रा 11)। इस वृद्धि कोण, चाल अस्थिरता के साथ संबद्ध है कि में पिल्ले के क्रम में उनकी चाल को स्थिर और संतुलन और समन्वय के साथ सहायता करने में उनके पीछे पंजे के कोण बढ़ाने की जरूरत है। चित्रा 11. सी.पी. माउस पिल्ले टेढ़ा उनकी hindpaws जब घूमना। सी.पी. चूहों (काली सलाखों), 77.48 ± 8.043 (एन = 11) के अपने hindlimbs के बीच एक औसत कोण है, जबकि शाम चूहों (ग्रे ख एआरएस) 54.54 ± 9.848 (के एक औसत कोण एन = 9)। डेटा ± SEM के मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं; **** पी <0.0001 है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। सीपी चूहे घाटे नहीं दिखा जब सतह को ठीक सतह ठीक टेस्ट (Heyrman एट अल।, 2013) के रूप में कुछ सी.पी. रोगियों ट्रंक नियंत्रण बिगड़ा है शामिल किया गया था। इसके अतिरिक्त, vestibular प्रणाली को ठीक करने के लिए जरूरत का पता लगाने के लिए आवश्यक है और वहाँ कुछ सी.पी. रोगियों 23 में vestibular घाटे हैं। सीपी चूहों महत्वपूर्ण घाटा नहीं दिखा जब के रूप में दिखावा नियंत्रण की तुलना में ठीक (डेटा) नहीं दिखाया। सीपी चूहे नकारात्मक Geotaxis परीक्षण में शाम के रूप में एक ही प्रदर्शन टी "के लिए: रखने together.within-पेज =" 1 "> नकारात्मक geotaxis युवा पिल्ले में मोटर समन्वय परीक्षण करने के लिए प्रयोग किया जाता है एक sloped सतह पर उतार का सामना करना पड़ जगह होने से चूहों चुनौती दी है देरी या ओरिएंट कठिन घाटे का संकेत मिलता है की विफलता।। समन्वय, संतुलन, या vestibular इनपुट में। जब नकारात्मक geotaxis (डेटा) नहीं दिखाया शाम चूहों की तुलना में साथ चुनौती दी सी.पी. चूहों कोई घाटा दिखा। इसके अतिरिक्त, सीपी चूहों एक प्राथमिकता एक अन्य बनाम एक पक्ष की ओर जब फिर से orienting बारी करने के लिए नहीं दिखा था । मोर्चा के अंग निलंबन परीक्षण 10 दिनों की तुलना में बड़े चूहों के लिए उपयुक्त है सीपी रोगियों को ऐसे लोभी के रूप में ठीक मोटर कौशल, में मांसपेशियों टोन और घाटे में कमी आई है। इस माउस मॉडल में कमजोरी का परीक्षण करने के लिए, हम एक सामने अंग निलंबन परीक्षण का इस्तेमाल किया। इसके अलावा, इस मॉडल का उपयोग करता एकतरफा इस्कीमिक चोट और तरफा सत्ता इस निलंबन परीक्षण का उपयोग निर्धारित किया जा सकता है। यह परीक्षण10 दिनों में 15 से अधिक पुराने चूहों के लिए बेहतर है। 8 दिन की उम्र में, चोट के बाद दो दिनों, वहाँ सी.पी. और शाम चूहों के बीच कोई महत्वपूर्ण मतभेद थे (डेटा) नहीं दिखाया। Hindlimb शक्ति सी.पी. चूहे में कमी आई है मानव सी.पी. रोगियों को अक्सर मोटर नियंत्रण और शक्ति की कमी के कारण ब्रेसिज़ या सहायक चलने उपकरणों की जरूरत है। आदेश में मनुष्य के लिए कृंतक सी.पी. मॉडल की तुलना करने के लिए, hindlimb ताकत hindlimb निलंबन परीक्षण का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया था। जब एक शंक्वाकार ट्यूब की ओर से निलंबित कर दिया, सीपी चूहों, hindlimb कमजोरी से पता चला है के रूप में स्कोर फांसी में कमी द्वारा प्रदर्शन (hindlimb फांसी स्कोर: सीपी 3.468 ± .5561, एन = 13, बनाम दिखावा 3.891 ± .1329, एन = 13; पी < 0.05, चित्रा 12)। कोई फर्क नहीं hindlimb निलंबन समय में मनाया गया (डेटा) नहीं दिखाया। इस प्रकार, मानव सी.पी. रोगियों के लिए भी इसी तरह, सीपी चूहों hindl का प्रदर्शनआई एम बी (पैर) कमजोरी। चित्रा 12. शाम चूहों थोड़ा लेकिन सीपी चूहों की तुलना में उनकी hindlimbs में काफी मजबूत कर रहे हैं। 3.891 ± .1329 के एक औसत स्कोर पर फांसी (एन = 13), शाम चूहों (काली पट्टी) अधिक hindlimb जुदाई, और इसलिए एक मजबूत hindlimb रुख दिखाने के लिए, जब 3.468 ± .5561 (एन = 13) के एक औसत स्कोर के साथ फांसी सी.पी. चूहों (ग्रे पट्टी) की तुलना में एक ट्यूब के किनारे पर लटका। डेटा ± SEM के मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं; * पी <0.05 है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। पकड़ शक्ति कम हो जाती है निम्नलिखित CP चोट सभी चार पंजे के साथ लोभी में एक कृंतक के लिए महत्वपूर्ण हैचढ़ाई और असमान सतहों के पार चल रहा है के मामले। पकड़ महत्वपूर्ण निरंतर ताकत, बल्कि निपुणता या रैखिक बल से, मुख्य रूप से अंकों में की आवश्यकता है और 24 पंजे। चूहे एक औंधा तार जाल स्क्रीन पर अपने शरीर के वजन धारण करने के लिए आवश्यक थे। सीपी चूहों अपनी पकड़ बनाए रखने में सक्षम नहीं थे और इन चूहों काफी कम कोण पर गिर गया (चार अंग औसत कोण: सीपी 75.627 ± 24.48, एन = 11, बनाम दिखावा 96.57 ± 10.836, एन = 9; पी <0.05, चित्रा 13)। इस डेटा से पता चलता सी.पी. चूहों में पकड़ शक्ति में उल्लेखनीय कमी है कि वहाँ। चित्रा 13. सी.पी. चूहे शम्स की तुलना में कमजोर पकड़ शाम चूहों (काली पट्टी) 96.57 ± 10.836 के एक औसत उल्टे कोण को समझ सकते हैं। (एन = 9)। सीपी चूहों (ग्रे पट्टी) केवल 75.627 ± 24.48 (एन = 11) की एक औंधा कोण तक पहुँच सकते हैं। डेटा ± SEM के मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं; * पी है0; 0.05। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। लोभी पलटा घाटे सी.पी. चूहे में स्पष्ट कर रहे हैं सकल मोटर घाटे के साथ-साथ, ठीक मोटर आंदोलनों भी सी.पी. रोगियों 25,26 में प्रभावित कर रहे हैं। मानव में लोभी पलटा जन्म के समय मौजूद है और लगभग 5 गायब हो जाता है – 6 महीने। हालांकि, इस तरह अतिरंजित वेग या लोभी की ताकत, काबू करने के लिए विफलता, या उम्र के 6 महीने के बाद लोभी पलटा के पुन: उभरने के रूप में लोभी पलटा में परिवर्तन, सभी तंत्रिका तंत्र को नुकसान का संकेत मिलता है। सीपी मॉडल में लोभी तुलना करने के लिए, कर्मकर्त्ता लोभी घाटे निर्धारित किया गया है। चोट के बाद 48 घंटा में सी.पी. चूहों पलटा लोभी में कमी का प्रदर्शन (औसत पंजे समझा48 घंटा में: सी.पी. 2.429 ± .9376, एन = 14, बनाम दिखावा 3.214 ± .8018, एन = 14; पी <0.05, चित्रा 14A)। forepaws में सही पंजा वरीयता में एक मामूली है, लेकिन महत्वपूर्ण नहीं वृद्धि हुई थी (डेटा) नहीं दिखाया। वहाँ (एन = दिखावा 17.86 ± 54.09 बनाम सीपी 75.0 ± 42.74, 14,, एन = 14; पी <0.005, चित्रा 14B) hindpaws में एक महत्वपूर्ण सही पंजा वरीयता था। नहीं, कोई उल्लेखनीय पंजा वरीयता के साथ;: एक सप्ताह चोट के बाद, सीपी चूहों लोभी घाटे (पी <0.05, चित्रा 14C = सी.पी. 2.75 ± 1.035, एन 8, दिखावा 3.80 ± .6325 बनाम, एन = 10 पंजे 1 सप्ताह कम से समझा) दिखाने । चित्रा 14. सी.पी. चूहे लोभी घाटा, hindpaws में घायल मस्तिष्क क्षेत्र को contralateral है। (ए) 48 घंटा के बाद चोट (पीएनडी 8), सीपी चूहों (ग्रे पट्टी), के साथ एक छड़ी काबू औसत पर, दिखावा एनिमा से कम पंजेरास (काली पट्टी)। (बी) सी.पी. चूहों (ग्रे पट्टी) सही hindpaw (चोट के contralateral) के रूप में बाएं hindpaw (चोट के ipsilateral) का उपयोग करने के लिए विरोध के साथ लोभी के लिए एक प्राथमिकता प्रदर्शित करते हैं। शाम चूहों (काली पट्टी) इस अधिकार का पंजा वरीयता प्रदर्शित नहीं करते। (- / [सही पंजा + बायाँ पंजा + दोनों पंजे] * 100 [छोड़ दिया पंजा सही पंजा]) (सी) के एक सप्ताह के बाद चोट, सीपी चूहों (ग्रे पट्टी) अभी भी घाटे लोभी दिखाने की तुलना में। सही पंजा वरीयता के रूप में गणना की जाती है शम्स (काली पट्टी)। डेटा ± SEM के मतलब के रूप में व्यक्त कर रहे हैं; *, पी <0.05 है ** पी <0.005 है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें। सीपी चूहे क्लिफ से बचने के दौरान किनारे से दूर बारी चट्टान से बचने के परीक्षण चूहों अवा बारी करने के निहित डर पर निर्भर करता हैसुरक्षा की दिशा में एक खड़ी चट्टान और सिर से Y। हालांकि कुछ सी.पी. रोगियों vestibular कठिनाइयों, साथ ही बिगड़ा मोटर नियंत्रण है, सी.पी. चूहों इस परीक्षण पर कोई घाटा नहीं दिखा था।

Discussion

अगर वहाँ और मानव और कृंतक के बीच उस व्यवहार का प्रदर्शन किया परीक्षण मानव लक्षण के लिए प्रत्यक्ष प्रासंगिकता है सेलुलर और आणविक प्रतिक्रिया के बीच ओवरलैप है मानव रोगों का अध्ययन करने के लिए पशु मॉडल का उपयोग केवल प्रासंगिक है। बाल रोग पढ़ाई के साथ प्रमुख मुद्दों में से एक यह है कि कई शोधकर्ताओं वयस्क मूषक का उपयोग विकास में अंतर यह है कि रोग की प्रक्रिया के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है पर विचार किए बिना, मॉडल, साथ ही वयस्क कृंतक व्यवहार मूल्यांकन बनाने के लिए है। इन मुद्दों की वजह से, यह महत्वपूर्ण है कि बाल रोग उपयोग पर अनुसंधान न केवल उचित समायोजित विकासात्मक समय अंक (जैसे, मानव सीएनएस 28 में विकास – 32 सप्ताह एक प्रसवोत्तर दिन 2 के बराबर है – 7 दिन कृंतक) ^7, लेकिन यह भी उचित व्यवहार परीक्षण मोटर, संवेदी या कर्मकर्त्ता विकासात्मक व्यवहार की जांच करेंगे। इस प्रकार, के रूप में प्रत्येक नए नवजात रोग मॉडल विकसित किया है, यह कड़ाई कि सेलुलर आश्वस्त करने के लिए परीक्षण किया जाना चाहिएऔर व्यवहार प्रतिक्रियाओं कृंतक और मानव के बीच सबसे उपयुक्त अनुवाद डेटा प्रदान करेगा।

सेरेब्रल पाल्सी एक मोटर विकार है, जो वयस्कता में जारी रहती है। मस्तिष्क पक्षाघात आज उपलब्ध मॉडलों में से कई के साथ एक समस्या यह है repeatable, मानकीकृत मोटर परीक्षण है कि घाटे के बाल चिकित्सा रोगियों में देखा के साथ संबंध स्थापित कर सकते हैं की कमी है। इस नए मॉडल है, जो एक नवजात माउस में हाइपोक्सिया, ischemia और सूजन को जोड़ती में, मोटर व्यवहार नवजात चूहों के लिए विशिष्ट परीक्षणों के एक बैटरी का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया था। आदेश आत्मीयता कम होती है और मात्रात्मक रिपोर्टिंग बढ़ाने के लिए, कई परीक्षणों के बहुत विशिष्ट है, लेकिन आसान उपायों को मानकीकृत किया जा सकता है कि मूल्यांकन करने के लिए शामिल करने के लिए संशोधित किया गया है। इसके अलावा, सामने और hindlimb मूल्यांकन अलग से प्रदर्शन किया जा सकता है, और बाएँ / सही मतभेद निर्धारित किया जा सकता है। परीक्षण के इस बैटरी की उम्र के दो सप्ताह तक नवजात चूहों के लिए विशिष्ट है।

इस सी.पी. मॉडल को दर्शाता हैविकास की सजगता में घाटा (ambulation, hindlimb पैर कोण) चलने में कठिनाई होती है, साथ ही अंग-विशिष्ट कमजोरी (चार अंग निलंबन, hindlimb निलंबन), और (पलटा लोभी)। हालांकि इस अध्ययन में केवल एक ही timepoint जांच की गई थी, इन घाटों समय के साथ लगाया जा सकता है।

वहाँ इस तरह के परीक्षणों की फॉक्स की बैटरी या विकासात्मक मील के पत्थर ¹⁵ के Heyser के आकलन के रूप में परीक्षण के अन्य बैटरी है कि नवजात शिशु पर इस्तेमाल किया जा सकता है, कर रहे हैं। हालांकि, इन परीक्षणों वयस्क, जिसका प्रतिक्रियाएं क्योंकि नवजात शिशु अभी भी विकसित कर रहा है ही नहीं हो सकता करने के लिए नवजात शिशु की तुलना करें। फॉक्स की बैटरी और Heyser के Assement परीक्षण नहीं बल्कि उद्देश्य डेटा (कोण, आसन ताकत के आधार पर, आदि) से डाइकोटोमस (हाँ या नहीं) के आकलन के साथ अवलोकन व्यक्तिपरक जानकारी पर भरोसा करते हैं। इन परीक्षणों के subjectiveness की वजह से, कई वैज्ञानिकों, ढाल लिया है जोड़ा, या हटा दिया मापदंड है, इस प्रकार उनके परिणाम दूसरों के लिए और सीमित करने के लिए अतुलनीय बनाकिसी विशेष बीमारी या विकार के लिए एक आधारभूत घाटे की स्थापना के संदर्भ में डेटा की उपयोगिता हैैं। मानकीकृत मोटर परीक्षण है कि गुणात्मक और विशेष रूप से नवजात शिशुओं का परीक्षण करने के लिए तैयार कर रहे हैं की एक सेट की स्थापना करके, व्यक्तिगत अनुसंधान समूहों से परिणाम सही और मज़बूती की सूचना दी और तुलना की जा सकती।

Materials

C57BL/6 mice	Charles River Laboratories	STRAIN CODE: 027	C57BL/6NCrl is the exact strain we use
Anesthesia Dish, PYREX™ Crystallizing Dish	Corning Life Sciences Glass	3140125	Capacity: 25.03 oz. (740mL); Dia. x H: 4.92 x 2.55 in. (125 x 65mm). However, any small round glass container will work. A 2 cup capacity pyrex food storage bowl with flat bottom will also work and is much cheaper (Pyrex model number: 6017399).
Covered lead ring	Fisher Scientific	S90139C	Lead ring for stablizing flasks in a water bath. It is used inside the anesthesia dish.
Scalpel Blade #11	World Precision Instrucments, Inc.	500240
Small Vessel Cauterizer	Fine Science Tools	18000-00
Micro Hook	Fine Science Tools	10064-14
Vetbond Suture Glue	3M	1469SB	n-butyl cyanoacrylate adhesive
Lipopolysaccharide	Sigma Life Science	L4391	Lipopolysaccaride from e.coli 0111:B4, gamma irradiated
12×12 inch opaque box	Acrylic Display Manufacturing: A division of Piasa Plastics	C4022	Colored Acrylic 5-Sided Cube, 3/16" Colored Acrylic, 12"W x 12"D x 12"H;  http://www.acrylicdisplaymfg.com/html/cubes_19.html
Camera/camcorder	JVC	GC-PX100BUS	Any camcorder that works well in low light and can be imported and edited. We use the JVC GC-PX100 Full HD Everio Camcorder.
Covidien Tendersorb™ Underpads	Kendall Healthcare Products Co	7174
WypAll L40	Kimberly-Clark Professional	5600	Any surface with moderate grip will do
Surface at 45 degree incline			We use a cardboard box.
Thin wire from a pipe cleaner	Creatology	M10314420	Any pipe cleaner from any craft store will work.
50mL conical tube	Falcon	352070
Fiberglass Screen Wire	New York Wire  www.lowes.com	14436	Any supplier can be used as long as their screen is 16×16 or 18×16
Razor blade	Fisherbrand	12-640	A wooden stick applicator or wooden part of a cotton-tipped swab will also work.
OPTIX 24-in x 4-ft x 0.22-in Clear Acrylic Sheet to make Clear Acrylic Walkway	PLASKOLITE INC	1AG2196A	Clear acrylic (1/8" thick) with sides and a top to limit exploration. We bought a sheet of acrylic from a local hardware store and had them cut it to size. (2) 2"x2"; (3) 2"x 18"; (1) 2"x15.5"; (1) 2"x3". Using clear tape, tape all sides together, with the 15.5" piece on top. Tape the 3" piece to the end of the 15.5" piece to create a flap/entryway for the mice. Alternatively, part or all of the walkway can be glued together, and only taping on the top pieces. This design will allow for the walkway to be opened for easy cleaning.
Protractor	Westscott	ACM14371