रेटिना रोगों के मूल्यांकन के लिए मात्रात्मक बुध्न Autofluorescence
Summary
The retinal pigment epithelium (RPE) supports the sensory retina through recycling visual cycle byproducts, which accumulate as lipofuscin. These products are autofluorescent and can be qualitatively imaged in vivo. Here, we describe a method to quantitatively image RPE lipofuscin using confocal scanning laser ophthalmoscopy.
Abstract
The retinal pigment epithelium (RPE) is juxtaposed to the overlying sensory retina, and supports the function of the visual system. Among the tasks performed by the RPE are phagocytosis and processing of outer photoreceptor segments through lysosome-derived organelles. These degradation products, stored and referred to as lipofuscin granules, are composed partially of bisretinoids, which have broad fluorescence absorption and emission spectra that can be detected clinically as fundus autofluorescence with confocal scanning laser ophthalmoscopy (cSLO). Lipofuscin accumulation is associated with increasing age, but is also found in various patterns in both acquired and inherited degenerative diseases of the retina. Thus, studying its pattern of accumulation and correlating such patterns with changes in the overlying sensory retina are essential to understanding the pathophysiology and progression of retinal disease. Here, we describe a technique employed by our lab and others that uses cSLO in order to quantify the level of RPE lipofuscin in both healthy and diseased eyes.
Introduction
रेटिना वर्णक उपकला (RPE) कई प्रक्रियाओं के माध्यम से 1 संवेदी रेटिना के समारोह का समर्थन करता है। उम्र से संबंधित धब्बेदार अध: पतन (एएमडी) औद्योगिक देशों में असाध्य अंधापन का सबसे महत्वपूर्ण कारण है और RPE में परिवर्तन, वर्णक की हानि, समारोह और शोष के नुकसान सहित द्वारा होती है। एएमडी में और सामान्य उम्र बढ़ने में, RPE फ्लोरोसेंट, lysosome व्युत्पन्न फैगोसाइटोसयुक्त फोटोरिसेप्टर टुकड़े, लिपोफ्यूसिन कणिकाओं के रूप में भेजा युक्त अंगों जम जाता है। RPE लिपोफ्यूसिन का संचय ऑक्सीडेटिव शिथिलता 1 इंगित करने के लिए लगा दिया गया है, लेकिन हाल के अध्ययनों से पता चला है कि RPE आकृति विज्ञान उच्च स्तरों लिपोफ्यूसिन 2 के साथ वृद्ध आँखों में सामान्य बनी हुई है। एएमडी और एएमडी प्रगति के लिए हालांकि, लिपोफ्यूसिन वितरण की असामान्य पैटर्न, लिपोफ्यूसिन की विशेष नुकसान में, दस्तावेज हैं मार्कर, दोनों histologically और नैदानिक 3,4
दोषपूर्ण प्रक्रियाRPE लिपोफ्यूसिन का गाना भी कुछ विरासत में मिला रेटिना degenerations में होते दिखाया गया है। Stargardt रोग (STGD) से पीड़ित मरीजों को एक कम उम्र में RPE में लिपोफ्यूसिन संचित, अंततः दृष्टि हानि एएमडी 5 में देखा है कि इसी तरह का विकास। इन निष्कर्षों को सुझाव दिया है कि लिपोफ्यूसिन संचय ही विषाक्त हो सकता है और ड्राइव RPE शिथिलता 6.7 सकता है। हालांकि, एक विस्तृत इमेजिंग समय के साथ STGD के साथ विषयों के अध्ययन की पुष्टि नहीं था कि फोकल लिपोफ्यूसिन संचय बाद RPE 8 घटाने के लिए नेतृत्व किया। इसलिए, हालांकि लिपोफ्यूसिन असामान्यताएं रेटिना degenerations के लिए मार्करों हैं, लिपोफ्यूसिन के प्रत्यक्ष विषाक्तता के लिए एक भूमिका अप्रमाणित बनी हुई है।
RPE रेटिना के सबसे पीछे सेल परत है, लेकिन आंख का बुध्न से फ्लोरोसेंट संकेत के बहुमत उत्पन्न करता है। जनरेशन और autofluorescence (वायुसेना) का पता लगाने के RPE से निकाली गई confocal स्कैनिंग लेजर ophthalmoscopy (cSLO) है, जो छठी के लिए अनुमति देता है का उपयोग किया जा सकता हैबुध्न वायुसेना के स्थानिक वितरण की sualization। कुछ रेटिना degenerations निदान और इन स्थितियों की निगरानी में बुध्न वायुसेना के विशिष्ट पैटर्न, और वायुसेना इमेजिंग एड्स प्रदर्शित करता है। हालांकि मानक वायुसेना इमेजिंग चिकित्सकीय महत्वपूर्ण है, मात्रात्मक वायुसेना (Qaf) RPE स्वास्थ्य का आकलन करने का एक महत्वपूर्ण साधन बन गया है। हम और दूसरों को एक मानकीकृत दृष्टिकोण है कि मज़बूती से विशिष्ट रेटिना स्थानों पर 9 Qaf स्तर निर्धारित कर सकते हैं विकसित किया है। Qaf निदान में संभावित अनुप्रयोगों और रेटिना की स्थिति की निगरानी है, और भी रोग का निदान और जोखिम स्तरीकरण में उपयोगिता हो सकती है। इसके अलावा, Qaf के नैदानिक क्षमताओं को भी कुछ रेटिनल विकारों 10-12 के लिए वर्णित किया गया है। यहाँ, हम हमारी तकनीक स्वस्थ और रोगग्रस्त आंखों के मूल्यांकन में अपने आवेदन के एक दृश्य प्रदर्शन के साथ प्रदर्शन करने के लिए कदम वार विवरण प्रदान करते हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
असामान्य RPE लिपोफ्यूसिन वितरण, चाहे वृद्धि या कमी, रेटिना की बीमारी का एक संवेदनशील मार्कर है और आम तौर पर संवेदी रेटिना समारोह के नुकसान के साथ जुड़ा हुआ है। यहाँ, हम RPE लिपोफ्यूसिन के मूल्यांकन के लिए Qaf …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम अपने सहयोगियों, फ्रेंकोइस Delori, टॉमस बर्क, और टोबियास Duncker को धन्यवाद देना चाहूंगा।
अनुसंधान का समर्थन: एनआईएच / नै R01 EY015520 (आरटीएस, जेपीजी), और अनुसंधान से अप्रतिबंधित निधियों दृष्टिहीनता (RTB) को रोकने के।
Materials
| Spectralis HRA + OCT | Heidelberg Engineering | n/a | |
| 0.5% tropicamide ophthalmic solution | n/a | n/a | Any brand can be used |
| 2.5% phenylephrine ophthalmic solution | n/a | n/a | Any brand can be used |
| Internal fluorescent reference | Heidelberg Engineering | n/a | |
| IGOR Pro software | WaveMetrics | n/a |
References
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