Vi presenterer en orthotopic aorta transplantasjon modell ved hjelp av ermet teknikk i mus. Det er en svært rask anastomose metode, som kan brukes i studier av vaskulær sykdom.
Orthotopic aorta transplantasjon ved hjelp av ermet teknikken reduserer skader aorta med failure rate av bare 10-20%. Tid til å anastomose aorta i mus med metoden ermet var kort og enkelt snitt 20 min, tillater studier av iso/allo grafts. Følgende artikkel beskriver aorta transplantasjon fremgangsmåten brukes i vårt laboratorium. Mus var anesthetized med en blanding av 1,5% volumet isoflurane og 100% oksygen gjennom en ansiktsmaske. Foreløpig segmentet av aorta mellom den nyre arteries og dens bifurkasjonen ble skilt fra vena cava, fritt forberedt og clampedat de proksimale og distale segmentene med en enkelt silke Sutur. Før fjerning av aorta, ble en saltvannsoppløsning som inneholder heparin injisert i den underlegne vena cava. Deretter aorta ble kuttet mellom klemmer og en saltvann heparin-oppløsningen ble brukt til å tømme lumen. Ermet teknikken med monofilament suturer ble brukt for å transplantere abdominal aorta i orthotopic posisjon.
Som påpekt i en tidligere studie, er stor oppmerksomhet betalt til murine aorta transplantasjon modeller som tillater diskriminering mellom bestemte vaskulær svar forårsaket av graftet selv og visse systemiske faktorer forbundet med et arteriogenic miljø 1 , 2 , 3. den viktigste faktoren som spiller en avgjørende rolle her er tilgjengeligheten av knockout og transgene mus. Deres engasjement i slik modell tilbyr muligheten til å identifisere og bestemme nye patofysiologiske veier knyttet til utviklingen av degenerative vaskulær sykdom, som åreforkalkning og aneurisme formasjon4, 5.
Det er verdt å merke seg at under pode en iboende iskemi/reperfusion skade fartøyene ment for transplantasjon kan vises. Derfor kan ikke forekomsten av problemer med pode integritet eller en uventet inflammatorisk reaksjon i postoperativ perioden være utelukket muligens utelukker patofysiologiske endringer i degenerative vascular sykdommer3 ,4,5,6,7. Ermet anastomose er alternativ i ende-metoden for arteriell anastomose av fartøy med en diameter på mindre enn en millimeter og har vært brukt med hell i nyre og kardiale transplantasjon i rotter som senere ble tilpasset til aorta transplantasjon i mus ved Dambrin et al. 8 , 9 , 10 , 11.
Aorta skade ved hjelp av ermet transplantasjon teknikken er minimert med en svært lav teknisk svikt rente, på grunn av det varer bare 20 minutter i gjennomsnitt. Våre tidligere resultater har vist gode funksjonelle og strukturelle egenskapene for en isograft i vivo etter transplantasjon bruker ermet teknikk1. Dambrin et al. beskrive etter en kort læringskurve suksessraten var over 78%10. Komplikasjoner som blodpropp er sjeldne, for eksempel Engelbrecht et al. ikke observerer trombose ved hjelp av ermet teknikk i nyre transplantasjon i rotte8.
Murine aorta transplantasjon modellen med ermet forekomst er en rask og enkel verktøyet å studere iso/allograft reaksjoner hos transplanterte fartøyet. Denne videoen viser aorta transplantasjon prosedyren i vårt laboratorium. Transplantasjon modellen kan være nyttig i å definere underliggende patologisk mekanismer for vaskulær degenerativ sykdom og kan bidra til videre evaluering av molekylære og farmakologiske intervensjoner12.
Før denne studien var ulike andre transplantasjon modeller i mus grundig analysert3,,6,,7,,10,,13,,14. Modell av aorta transplantasjon bruke ermet teknikken med modifikasjoner av Dambrin et al. ble valgt som det passer våre kriterier og viste en høy pålitelighet av ermet anastomose i forhold til konvensjonelle ende-til-ende Sutur metoder 1 , 10.
Denne teknikken er gunstig på mange måter med kryss-klemme tid betraktelig redusert minimere skader aorta under operasjonen. En lav forekomst av tromboser ble observert i tillegg til å unngå en potensiell feil i fartøyet kaliber mellom donor- og mottaker. Observasjonene ovenfor gjør denne teknikken velegnet for å undersøke vaskulær sykdom i aorta transplantasjoner hos mus.
I en oppfølgingsstudie der en ultralyd ble utført 8 uker etter transplantasjon, ble ingen vesentlige endringer oppdaget. Dette bekreftet forutsetninger at skade aorta under operasjonen vil være minimal1.
Pode prosedyren presenteres i denne artikkelen garanterer ingen verdifall både i pode integritet og dens funksjon. Derfor kan det konkluderes at denne eksperimentelle transplantasjon modellen kan tjene som et verdifullt verktøy for fremtidige molekylære og farmakologiske undersøkelser av degenerative fartøyet sykdom i genmodifiserte mus.
Vi tror at det video guiden kan fungere som undervisningsmateriell illustrerer bruken av denne enkle arterio-arteriell modellen og at det vil bidra til videre fruktbar debatt mange viktige saker i vaskulær patologi. Denne svært rask anastomose metoden kan brukes til å studere vaskulær sykdom i genmodifiserte mus. Det kan også brukes som en endring i aneurisme modellen kombinert med transplantasjon.
Det er kritiske punkter under prosedyren. Plassering av suture selv er det viktigste trinnet. Kirurgen må ta for å unngå eventuelle torsjon aortabuen ved riktig justering av giver og mottaker. Klemmer fjernes nøye etter inspeksjon av anastomose. Distale klemmen skal alltid være utgitt første resulterer i lavtrykk holder veggene sammen før proksimale høytrykks siden utgivelsen. Konsekvensen av ikke følge sekvensen av utgivelsen ville være blødning.
The authors have nothing to disclose.
Vi vil gjerne takke Roma Wieczorek og Peter Kurdybacha for deres utmerkede redigering assistanse og Leon Decker og Uli Heuter for deres utmerket kundestøtte.
Halsey Needle Holder | Fine Science Tools | 12001-13 | |
Dumont #5-45 Forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
Dumont #5 Forceps – | Fine Science Tools | 11254-20 | |
Lexer-Baby Scissors | Fine Science Tools | 14079-10 | |
Castroviejo Micro Needle Holder | Fine Science Tools | 12060-01 | |
Vannas Scissors | Aesculap, Germany | Typ OC498R | |
Castroviejo Suture Forceps | Geuder, Germany | 19015 | |
6-0 silk black (Silk) | Deknatel, Research Triangle Park NC, USA | 18020-60- FST | |
11-0 monofilament (Ethilon) | Ethicon, Norderstedt, Germany | EH7438G | |
3-0 polyglycolic acid suture (Serafit) | Serag-Wiessner, Naila, Germany | 60203214 | |
Isofluorane | Any genericon | ||
Heparin | Any genericon | ||
0.9% saline | Any genericon | ||
Buprenorphine | Any genericon | ||
Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
Microscop | Zeiss | Opmi MDO/S5 | |
Vaporiser | Eickemeyer | TEC3 | |
Ultrasound | Vevo, Canada | 770,2100 |