마우스의 최소 침습 가로 대동맥 수축
Summary
기관 삽관과 인공 호흡기의 사용을 제거하면서 최소 침습 가로 대동맥 수축 (MTAC)는 일반 가로 대동맥 수축 (TAC)의 본질을 절약합니다. 그것은 특히 병진 연구에서 좌심실 과부하에 높은 처리량 연구를위한 매우 바람직한 방법으로 증명한다.
Abstract
최소 침습 가로 대동맥 수축 (MTAC)는 표준 오픈 가슴을 가로 대동맥 수축 (TAC)보다 마우스의 가로 대동맥의 수축을위한 더 바람직한 방법입니다. 횡 대동맥 협착이 좌심실 높은 압력을 유도하는 고기능 방법이지만 인한 기관 내 삽관과 인공 호흡기의 사용에 더 어렵고 긴 절차이다. TAC는 새로운 방법, MTAC로도 자주 덜 존속 없다, 둘 환기 설치와 갈비와 늑간 근육이나 기관 삽관의 절단을 필요로한다. 흉강에 액세스 할 수 개흉술에 반대 MTAC에서, 대동맥 궁은 앞쪽 목의 중간 선 절개를 통해 도달한다. 갑상선은 흉골 노치를 나타 내기 위해 다시 당겨진다. 흉골이어서 제 리브 수준까지 절단하고, 대동맥 궁는 결합 조직 및 흉선을 분리하는 것만으로 도달된다. 에서거기에, 봉합 아치를 감싸 및 스페이서와 연결 한 후 흉골 절단 및 피부 닫을 수 있습니다 할 수 있습니다. MTAC 좌심실 고혈압을 유도하는 매우 빠르고 덜 침습적 방법은 높은 처리량 연구 가능성을 가능하게한다. 수축의 성공은 대동맥의 흐름 속도를 결정하기 위해 고주파 트랜스 흉부 심장 초음파, 특히 컬러 도플러 및 펄스 파 도플러를 이용한 검증 좌우 될 수 있고 우측 경동맥 동맥 혈관의 치수 및 좌심실 기능 및 형태. 성공적인 수축은 또한 간질과 혈관 주위 섬유화와 심장 근육 세포의 비대와 같은 중요한 조직 병리학 적 변화를 트리거합니다. 여기서, MTAC의 과정 경동맥에서 얻어진 유량 변화가 심장 초음파, 총 형태학 및 심장 조직 학적 변화를 관찰 할 수있는 방법을 보여주는 설명한다.
Introduction
이 문서의 전체 목적은 쥐 대동맥 협착 (TAC)가 간단하고 편리한 수술을 생성하도록 변형 될 수있는 방법을 횡 보여주는 것이다. TAC는 제 1991 (1)에 도입되고 조작 게놈 2, 3, 4, 5, 6, 특히 소 동물에 좌심실과 심부전 비대증으로 이어지는 세포 및 분자 경로를 연구하는 분자 생물학을 활성화시켰다. 원하는 압력 과부하를 제조에서 효능에도 불구하고,이 기술은 궁극적 절차를 수행 및 낮은 생존율로 어려움에 의해 제한된다. TAC 전도성 외과 기관 내 삽관, 개흉술을 수행하고 폐 붕괴 일을 방지하기 위해 인공 호흡기를 사용할 수 있어야한다.
콘텐츠 "> 종종 간단하고 덜 침습적 방법이 요구된다. 결과적으로, 최소 침습 횡 대동맥 협착 (MTAC)는 3을 고안 하였다. 그 결과 (즉, 좌심실 비대)는 동일하지만, 절차는 상당히 더 적은 수의 장치를 포함 상기 동물에게 덜 손상. MTAC 90 % 이상, 더 생존율을 갖는 바람직한 방법으로 증명하고, 또한 기인 할 수 성공적인 수술 후 사망의 15 분 내지 25. 많지 않은 경우의 동작 시간을 갖는 엄청난 좌심실 과부하 및 신장 등 중요 장기에 혈액 공급의 심각한 감소의 결과 대동맥 궁의 조인 다구 수축.절차가 완료된 후, 초음파 검사는 밴딩 심장 형태와 기능의 성공 여부를 평가할 수있다. 고주파, 초음파 시스템은 직경을 측정하고, 좌우의 변화를 흐르게하는 데에 이용 될 수있다최대 유속 측정 대동맥 궁 수축을 시각화하고, 좌심실 벽 두께 및 기능적 파라미터 (7, 8)를 결정하기 위해, 경동맥 동맥. 안락사 후 장기도 헤 마톡 실린과 에오신 염색 Picrosirius 콜라겐 염색 조직 학적 연구를 위해 수집 될 수 후자 섬유증의 관찰에 특히 유용한.
Protocol
Representative Results
Discussion
록맨 연구팀은 심장에 압력 과부하를 연구하는 방법으로 대동맥 밴딩을위한 첫 번째 방법을 고안했다. 이 활성화 연구는 고혈압과 심장 장애 1의 세포 및 분자 결과를 발견하기 시작합니다. 개선 된 방법, 침습적 횡 대동맥 협착 (MTAC)은 종래의 횡 대동맥 협착 (9)의 단점없이 좌심실 압력 과부하 및 심부전의 유도에 대한 의무, 시간에 따른 방법을 제공한다. TAC?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 베보 2100 초음파 시스템의 제공을 위해 홍콩 폴리 테크닉 대학교의 생명 과학 (ULS)의 대학 연구 시설을 인정하고 싶습니다. 교육 및 촉진을위한 생명 공학, 홍콩 폴리 테크닉 대학의 학제 부문에서 박사 Chunyi 원 총리 특별 감사. 이 작품은 홍콩 정부 RGC 부여 GRF 17127215, 764812 빌리 KC 차우에 HKU6이 / CRF는 / 11G에 의해 지원되었다.
Materials
| 1 inch 30 Gauge Needles | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 305128 | Curved as in the procedure and Figure 1 |
| 27 Gauge Needle | BD, Franklin Lakes, NJ 07417, USA. | 301629 | Make blunt and smooth for spacer |
| 6/0 Dafilon | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0933066 | |
| 6/0 Silkam | B. Braun, 34212 Melsungen, Hessen, Germany. | C0762067 | |
| Sterile gloves | A.R. Medicom, Inc (Asia), Hong Kong. | ||
| Cotton Applicator | Mannings, Quarry Bay, Hong Kong. | Local Shopping Center | |
| Delapitory Cream | Veet (Hong Kong), Kwun Tong, Kowloon, Hong Kong | Local Shopping Center | |
| Lexer-Baby Scissor | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 14078-10 | |
| Curved Iris Forcep | FST, British Columbia V7H 0A6, Canada. | 11065-07 | |
| Micro Olsen-Hegar Needle Holder | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | 501989 | |
| Stereo Micrioscope | WPI, Sarasota, FL 34240, USA. | PZMIII-BS | |
| GenTeal Gel | Novartis, East Hanover, NJ 07936, USA. | Local Pharmacy | |
| Heating Pad | Kent Scientific Corporation, Torrington, CT 06790, USA. | DCT-20 | |
| Surgical tape | Laboratory Animal Unit | ||
| Ketamine and Xylazine | Laboratory Animal Unit | ||
| Betadine | Laboratory Animal Unit | ||
| Buprenorphine | Laboratory Animal Unit |
References
- Rockman, H. A., et al. Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).
- de Almeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. Transverse aortic constriction in mice. J Vis Exp. (38), (2010).
- Hu, P., et al. Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 285 (3), H1261-H1269 (2003).
- Shimizu, I., et al. Excessive cardiac insulin signaling exacerbates systolic dysfunction induced by pressure overload in rodents. J Clin Invest. 120 (5), 1506-1514 (2010).
- Tarnavski, O. Mouse surgical models in cardiovascular research. Methods Mol Biol. 573, 115-137 (2009).
- Zhang, X., et al. A modified murine model for the study of reverse cardiac remodelling. Exp Clin Cardiol. 18 (2), e115-e117 (2013).
- Hartley, C. J., et al. Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy. Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).
- Scherrer-Crosbie, M., Thibault, H. B. Echocardiography in translational research: of mice and men. J Am Soc Echocardiogr. 21 (10), 1083-1092 (2008).
- Faerber, G., et al. Induction of heart failure by minimally invasive aortic constriction in mice: reduced peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator levels and mitochondrial dysfunction. J Thorac Cardiovasc Surg. 141 (2), 492-500 (2011).
- Li, L., et al. Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging. J Vis Exp. (112), (2016).
