म्यूरीन वाम अवरोही धमनी (LAD) कोरोनरी धमनी Ligation: रोधगलन के लिए एक बेहतर और सरलीकृत मॉडल
Summary
We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).
Abstract
इस्कीमिक हृदय रोग (IHD), या तीव्र कोरोनरी सिंड्रोम (ACS), संयुक्त राज्य अमेरिका में मृत्यु के प्रमुख कारणों में से एक है। IHD दिल को कम रक्त की आपूर्ति की विशेषता है, के लिए ऑक्सीजन की कमी और हृदय की मांसपेशी के आगामी परिगलन में जिसके परिणामस्वरूप। एमआई मॉडल एक अल्पकालिक ischemia-reperfusion मॉडल और एक लंबे समय तक स्थायी बंधाव मॉडल के रूप में इसके उपयोग के लिए लोकप्रियता हासिल की है। नीचे, हम LAD की स्थायी बंधाव के लिए एक विश्वसनीय तरीका का वर्णन। साथ माउस जेनेटिक इंजीनियरिंग प्रौद्योगिकी और अधिक उन्नत होता जा रहा है, और गुणवत्ता murine शल्य चिकित्सा उपकरणों की एक बढ़ती हुई उपलब्धता के साथ, माउस एमआई सर्जरी के लिए एक लोकप्रिय मॉडल बन गया है। हमारे शल्य मॉडल माउस का तेजी से वसूली के लिए एक आसानी से उलटने संवेदनाहारी के उपयोग को शामिल किया गया; एक ट्रेकिआटमी को शामिल किए बिना एक न्यूनतम इनवेसिव अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण; और सीने में एक अतिरिक्त चीरा बनाने के बिना मूल थोरैकोटॉमी साइट के माध्यम से एक thoracentesis है, जैसा किकुछ अन्य तरीके से किया, प्रभावी रूप से छाती गुहा से अतिरिक्त रक्त और हवा निकालने के लिए। इस विधि अपेक्षाकृत अन्य तरीकों, जो नाटकीय रूप से शल्य चिकित्सा और बाद शल्य जटिलताओं और मृत्यु दर कम कर देता है और reproducibility को बेहतर बनाता है तुलना में कम आक्रामक है।
Introduction
कोरोनरी रोग, या एसीएस, सबसे अधिक प्रचलित हृदय घटना है और 2020 के 1 में रुग्णता और मृत्यु दर दुनिया भर का मुख्य कारण माना जाता है। एसीएस के कारण एक कोरोनरी atherosclerotic पट्टिका कि ब्लॉक या हृदय के ऊतकों 2 में रक्त का प्रवाह कम कर देता है का टूटना के कारण मायोकार्डियल घनास्त्रता की उपस्थिति है। इसलिए, इस तरह के रोधगलन (एमआई) 3, 4 के रूप में तीव्र myocardial ischemia की उपस्थिति के साथ संगत नैदानिक लक्षण, कर रहे हैं। एमआई cardiomyocytes के मास में एक नुकसान और रोग वेंट्रिकुलर remodeling के लिए एक प्रगति है, जो वेंट्रिकुलर में शिथिलता और दिल की विफलता 5, 6 को जन्म दे सकता हो जाती है।
IHD अध्ययन करने के लिए सबसे प्रभावी तरीकों में से एक एक पशु मॉडल में मानव रोधगलन नकल करने के लिए किया गया है। इस में LAD occluding द्वारा हासिल की हैचूहों। इस मॉडल का उपयोग, हम अध्ययन कैसे दिल IHD से उत्पन्न नुकसान से बचाया जा सकता है।
पिछले दशक में शोधकर्ताओं ने छोटे जानवरों को बड़े पशु मॉडल का उपयोग कर, चूहों को चूहों से पारी को शामिल करने से स्थानांतरित कर दिया है। छोटे माउस मॉडल उनके छोटे आकार सहित कई कारणों से,, बड़े कूड़े आकार, कम लागत बनाए रखने के लिए, और कम गर्भावधि, साथ ही ट्रांसजेनिक और जीन नॉकआउट मॉडल 7 की प्रशस्त उपलब्धता के लिए के लिए पसंद किया जा रहा है। हालांकि चूहों आकार में छोटे होते हैं, नई शल्य चिकित्सा उपकरणों विशेष रूप से उन लोगों के लिए बनाया गया इस विकास में और अधिक योगदान दिया। हमारे विधि इन नए शल्य चिकित्सा उपकरणों का इस्तेमाल करता है।
जबकि कई तरीके एक आक्रामक ट्रेकिआटमी लागू है, हम अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण के एक कम आक्रामक विधि का उपयोग करें। oropharynx की भूमि के ऊपर रोशनी का उपयोग करना, हम किसी भी चीरों बनाए बिना नली लगाना, टी के लिए एक सुरक्षित और कम दर्दनाक अनुभव प्रदानवह पशु। माउस तो एक वेंटीलेटर पर रखा गया है और पूरे प्रक्रिया के दौरान isoflurane पर रखा है। संज्ञाहरण की कम अवधि दवा द्वारा उत्पादित के कारण, यह केवल कुछ ही मिनट लगते पशु संवेदनाहारी से उबरने के लिए के लिए एक बार इसे बंद कर दिया गया है। हमारे शल्य मॉडल भी एक न्यूनतम इनवेसिव thoracentesis भी शामिल है। तनाव वातिलवक्ष: सावधान मूल थोरैकोटॉमी चीरा के माध्यम से छाती गुहा से रक्त और अतिरिक्त हवा को हटाने thoracentesis का उपयोग कर LAD बंधाव की एक आम पोस्ट ऑपरेटिव जटिलता को संबोधित किया गया है। इस विधि है, जो दो अतिरिक्त अन्य तरीकों एक thoracentesis-है झुकेंगे कम के बाद शल्य जटिलताओं के लिए ट्रेकिआटमी के लिए और एक अन्य में इस्तेमाल किया चीरों की आवश्यकता समाप्त और तेजी से मृत्यु दर में कमी आई है।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्रयोगशालाओं में एमआई मॉडल की एक बढ़ती हुई उपयोग के साथ, वर्णित प्रक्रिया जबकि उनके ऑपरेशन के बाद दर्द और तकलीफ को कम करने चूहों की क्षमता और जीवित रहने की दर बढ़ाना चाहती है। यह प्रोटोकॉल LAD बंधाव प्रक?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This model was developed with the support of the National Institute of General Medical Sciences (NIGMS)/the National Institute of Health (NIH) grant 1P20GM103652 (Project# 3) (to MRA) and the American Heart Association (AHA) Grant-in-Aid 14GRNT20460291 (to MRA); the Brazilian government grant CAPES (to KR and FR); and a Brown University LINK award (to IM). We also acknowledge the outstanding technical support from our veterinarians and animal facility staff.
Materials
| High-Intensity Light Source | Harvard Apparatus | 72-0215 | |
| SurgiSuite Operating Platform | Kent Scientific Corporation | SurgiSuite | Uses a rechargeable, battery-operated far infrared warming pad. Charge overnight before surgery. |
| SurgiSuite LED Lighting Kit | Kent Scientific Corporation | SURGI-5003 | |
| Hot Bead Sterilizer | Fine Science Tools | 18000-45 | Preheating takes 15-20 minutes. Instruments take 20 seconds to sterilize. |
| Small Rodent Anesthesia System | VetEquip Inc. | 901810 | |
| Isofluorane | Piramal Enterprises | 66794-017-10 | |
| Buprenorphine | Rhode Island Hospital Pharmacy | NDC 12496-0757-1, 12496-0757-5 | |
| Surgical Loupes | Roboz | RS-6687 | |
| Small Rodent Ventilator | Harvard Apparatus | 73-0043 | |
| Lubricating Drops | Thermo Fisher Scientific | 19-898-350 | |
| Electric Razor | Kent Scientific Corporation | CL 9990-1201 | |
| Hair Removal Cream | Nair | ||
| Medical Tape | Thermo Fisher Scientific | 18-999-380 | |
| Betadine | Thermo Fisher Scientific | 19-027136 | |
| 70% Isopropanol Wipes | Thermo Fisher Scientific | 22-363-750 | |
| Surgical Drapes | Braintree | SP-TS | |
| Surgical Gloves | Thermo Fisher Scientific | 18999102D | |
| 5-0 Polypropylene Sutures | Ethicon | 8630G | |
| 8-0 Nylon Sutures | Fine Science Tools | 12051-08 | |
| Platinum-Cured Tubing | Harvard Apparatus | 72-1042 | 0.3 mm inside diameter x 0.6 mm outside diameter |
| 0.9% Saline | Thermo Fisher Scientific | 19-310-207 | |
| 4-0 Polypropylene Sutures | Ethicon | 8631G | |
| 1 CC Syringe with 25-Gauge Needle | Thermo Fisher Scientific | 14-826-100 | |
| Scissors | Kent Scientific Corporation | INSS600225 | |
| Forceps | Kent Scientific Corporation | INS700100 | |
| Cotton Swabs | Thermo Fisher Scientific | 23-400-118 | |
| IV Catheter, 20-Gauge | Thermo Fisher Scientific | NC9892181 | |
| Retractor | Kent Scientific Corporation | INS 750369 | |
| Forceps | Fine Science Tools | 11003-12 | |
| Dissecting Forceps, Straight | Kent Scientific Corporation | INS 700101 | |
| Dissecting Forceps, Curved | Kent Scientific Corporation | INS 700103 | |
| Hemostatic Forceps, Straight | Kent Scientific Corporation | INS 750451 | |
| Hemostatic Forceps, Curved | Kent Scientific Corporation | INS 750452 | |
| Tissue Forceps | Kent Scientific Corporation | INS 700131 | |
| Needle Holder | Kent Scientific Corporation | INS 600109 | |
| Scissors | Kent Scientific Corporation | INS 600225 |
References
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