يقدم هذا البحث طريقة لقياس المتكرر للتهوية ونشاط العضلات التنفسية في التصرف بحرية الضموري نموذج الفأر التصلب الجانبي (ALS) في جميع أنحاء تطور المرض مع تخطيط التحجم كامل الجسم والكهربائي عن طريق جهاز القياس عن بعد زرعها.
يتطلب اشتراك JoVE لعرض هذا المحتوى. تسجيل الدخول أو ابدأ نسخة تجريبية مجانية
مقالة منهجية
القياس المتكرر التنفسي آخر العضلات والتهوية في نماذج الماوس من مرض عصبي عضلي
* These authors contributed equally
في هذه المقالة
ملخص
الملخص
عضلات الجهاز التنفسي التبعي تساعد على الحفاظ على التهوية عند اختلال وظائف الحجاب الحاجز. يصف بروتوكول التالية طريقة لقياسات المتكررة على مدى أسابيع أو أشهر من النشاط العضلي التنفسي الإكسسوارات بينما قياس في وقت واحد التهوية في الماوس غير تخدير، يتصرف بحرية. وتتضمن هذه التقنية زرع الجراحية جهاز إرسال لاسلكي والإدراج من القطب يؤدي في مختلف الأضلاع وشبه المنحرفة العضلات لقياس النشاط كهربية هذه العضلات الشهيق. يتم قياس التهوية تخطيط التحجم كامل الجسم، ويتم تقييمه حركة الحيوان عن طريق الفيديو ومتزامنة مع النشاط كهربية. وتعرض قياسات لنشاط العضلات والتهوية في نموذج الفأر من التصلب الجانبي لإظهار كيف أن هذا أداة يمكن استخدامها لمعرفة كيف التنفسي تغييرات نشاط العضلات مع مرور الوقت، وتقييم تأثير النشاط العضلي على التهوية. الأساليب المذكورة يمكن éasily تكييفها لقياس نشاط العضلات الأخرى أو لتقييم الإكسسوارات نشاط العضلات التنفسية في نماذج الماوس إضافية من المرض أو الإصابة.
المقدمة
عضلات الجهاز التنفسي الإكسسوارات (الأسلحة) زيادة التهوية خلال فترات ارتفاع الطلب (على سبيل المثال، ممارسة الرياضة) وتساعد على الحفاظ على التهوية عند الشبهة وظيفة الحجاب الحاجز بعد الإصابة أو المرض 1 و 2. وعلى الرغم من التغيرات في وظيفة الحجاب الحاجز قد تم وصفها بشكل جيد في التصلب الجانبي (ALS) من المرضى الضموري ونماذج الماوس 3، 4، 5، 6، لا يعرف الكثير الكثير عن نشاط أو وظيفة السلاح في ALS. ومع ذلك، اقترحت إحدى الدراسات أن المرضى ALS ا....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
البروتوكول
تمت الموافقة على الإجراءات التجريبية من قبل لجنة سينسيناتي للأطفال مستشفى المركز الطبي المؤسسي رعاية الحيوان واستخدام وأجريت وفقا لدليل المعاهد الوطنية للصحة للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.
1. الاستعداد للالقياس زراعة جهاز جراحة
- وضعت على معدات الحماية الشخصية (أي يدعك، ويغطي الحذاء، ثوب، الشعر الصافي، وقناع، والقفازات الجراحية).
ملاحظة: هذه الجراحة يتطلب حقل معقمة. - تشغيل الحاضنة (التي تسيطر عليها أجهزة حاضنة مرطب / وفيات....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
النتائج
تم استخدام بروتوكول صفها لزرع جهاز القياس عن بعد وتسجيل مختلف الأضلاع وشبه المنحرفة EMG، WBP، والفيديو على فأرة الحاسوب SOD1 (G93A) ALS نموذج. تم تحديد الفترات التي يكون الحيوان غير نشط (على سبيل المثال، لا يتحرك) باستخدام تسجيل الفيديو، وأكد من عدم وجود نشاط متعلق الحركة في تتبع WBP (الشكل 3A). وتشمل فترات الخاملة الوقت الذي يقضيه في REM أو غير REM من النوم، فضلا عن الوقت الذي يقضيه مستيقظا ولكن لا يزال (الشكل 3A).......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المناقشة
الإجراء تظاهر هنا يسمح للموسع (بعد زرع الجراحية الأولية للمرسل) قياس نشاط العضلات التنفسية والتهوية على مدى عدة أشهر في نفس الحيوان. هذه التقنية لديها العديد من المزايا أكثر من التقنيات EMG القياسية في الفئران تخدير: 1) التجارب تتطلب عددا أقل من الفئران وتوفر القدرة على تسجيل البيانات من نفس الموقع في ماوس واحدة عبر مراحل المرض (بدلا من استخدام الفئران متعددة في مراحل المرض المختلفة)؛ 2) ويمكن إجراء تحليل البيانات مع الاختبارات الإحصائية أكثر قوة (أي استخدام تدابير المتكر.......
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
الإفصاحات
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
شكر وتقدير
وقدم الدعم لهذا العمل من قبل جائزة القيم مستشفى المركز الطبي في سينسيناتي للأطفال لSAC ومنحة تدريب المعاهد الوطنية للصحة (T32NS007453) لVNJ
....الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
المواد
| الاسم | الشركة | رقم فهرسي | التعليقات |
|---|---|---|---|
| B6.Cg-Tg (SOD1 * G93A) 1 مختبر غور / جي | جاكسون | 4435 | |
| غرفة تحجم | بوكسكو منتجات الجهاز التنفسي / علوم البيانات الدولية | 601-1425-001 | |
| مستقبلات القياس عن بعد (نموذج RPC-1) | علوم البيانات الدولية | 272-6001-001 | |
| مضخة تدفق التحيز (نموذج BFL0500) | علوم البيانات الدولية | 601-2201-001 | |
| ACQ-7000 USB | Data Sciences International | PNM-P3P-7002XS | |
| Dataquest A.R.T. مصفوفة تبادل البيانات | الدولية لعلوم البيانات | 271-0117-001 | |
| نظام تحليل Ponemah | علوم البيانات الدولية | PNM-POST-CFG | |
| برنامج تجميع منصة وظائف الأعضاء Ponemah v5.20 | علوم البيانات الدولية | PNM-P3P-520 | |
| حزمة تحليل تخطيط تحجم التنفس الكامل غير المقيدة Ponemah v5.20 | International | PNM-URP100W | |
| تكوين Ponemah نظام | برمجيات علوم البيانات الدولية | PNM-P3P-CFG | |
| وحدة التحليل (URP) | علوم البيانات الدولية | PNM-URP100W | |
| Amplifier | Data Sciences International | 13-7715-59 | |
| علوم بيانات لوحة المزامنة | الدولية | 271-0401-001 | |
| علوم بيانات الكابلات المتزامنة | الدولية | 274-0030-001 | |
| محول ضغط الطاقة بوكسكو | لعلوم البيانات الدولية | 600-1114-001 | |
| علوم بيانات مقياس التدفق | الدولية | 600-1260-001 | |
| المغناطيس والراديو المدرجة في مجموعة | المبتدئين F20-EETعلوم البيانات الدولية | 276-0400-001 | |
| محور P1363 كاميرا فيديو | Data Sciences International | 275-0201-001 | |
| Terg-A-Zyme | Fisher Scientific | 50-821-785 | منظفات الإنزيم |
| Actril | Minntech Corporation | 78337-000 | |
| مجهر تشريح ستيريو معقم كيميائي (موديل MEB126) | Leica | 10-450-508 | |
| مرطب مضاعف / حاضنة رضع | OHMEDA Ohio Care Plus | 6600-0506-803 | |
| TL11M2-F20-EET أجهزة الإرسال | علوم البيانات الدولية | 270-0124-001 | |
| Dumont # 2 ملقط استئصال الصفيحة الفقرية - أطراف قياسية / مستقيمة / 12 سم (x2) | الأدوات العلمية الدقيقة | 11223-20 | لمناولة الأسلاك ملقط |
| استئصال الصفيحة الفقرية Dumont # 2 - أطراف قياسية / مستقيمة / 12 سم (x2) | الأدوات العلمية الدقيقة | 11223-20 | للجراحة |
| ملقط نمط ضيق - مسنن / منحني / 12 سم | أدوات علمية دقيقة | 17003-12 | |
| مقص زنبركي - قطع متين / مستقيم / حاد / 12.5 سم / 6 مم | علمية دقيقة متطورة | 15124-12 | |
| مقص فصل الأنسجة - مستقيم / حاد حاد / 11.5 سم | أدوات علمية دقيقة | 14072-10 | |
| مقص فاين - مقص متين / منحني / حاد حاد / 9 سم ؛ | الأدوات العلمية الدقيقة | 14058-11 | لقطع الأسلاك وقص المسامير |
| مقبض مشرط # 3 | أدوات الدقة العالمية | 500236 | |
| شفرة مشرط | الأدوات العلمية الدقيقة | 10010-00 | لتحضير أغطية الرصاص خياطة |
| Polysorb مضفرة قابلة للامتصاص | Coviden | D4G1532X | للف يؤدي جهاز الإرسال |
| Gluture ؛ | شركة Zoetis | 6606-65-1 | مادة لاصقة سيانواكريليت |
| 3 مل طرف حقنة - | 118030055 | ||
| 25 جم إبرة (x2) | Becton Dickinson and Co. | 305-145 | |
| أدوات تطبيق قطنية ذات رؤوس | هنري شاين لصحة | 100-9175 | |
| مجموعة ماكينة قص الشعر من Andis | Andis | 049-06-0271 | ماكينة حلاقة كهربائية تباع في Target |
| Isoflurane | Henry Schein Animal Health | 29404 | Anesthetic |
| كحول الأيزوبروبيل 70٪ | أولوية الرعاية 1 | MS070PC | |
| ديرماكلور 2٪ مقشر طبي (كلوروهيكسيدين 2٪) | بتلر شاين | 55482 | |
| دموع اصطناعية | هنري شاين صحة | 48272 | زيوت التشحيم مرهم البصريات |
| فراغ الشحوم | داو كورنينج كوربوريشن | 1597418 | |
| بطانية مياه | JorVet | JOR784BN |
المراجع
- Johnson, R. A., Mitchell, G. S. Common mechanisms of compensatory respiratory plasticity in spinal neurological disorders. Respir Physiol Neurobiol. 189 (2), 419-428 (2013).
- Sieck, G. C., Gransee, H. M. Respiratory Muscles: Structure, Function & Regulation.....
الوصول مقيد. يرجى تسجيل الدخول أو بدء فترة تجريبية لعرض هذا المحتوى.
إعادة الطباعة والأذونات
