मानव प्लैक्टिअल फिजियोलॉजी के एकीकृत अध्ययनों के लिए 4-पोत नमूनाकरण दृष्टिकोण<em> विवो में</em
Summary
हम टर्म में विवो में मानव प्लेगल फिजियोलॉजी का अध्ययन करने के लिए एक विस्तृत विधि प्रस्तुत करते हैं। विधि मात्रा रक्त के प्रवाह के अल्ट्रासाउंड माप और नाल के ऊतक नमूने के साथ नाल के मातृ और भ्रूण के पक्षों पर आवक और जावक वाहिकाओं से रक्त का नमूना जोड़ती है।
Abstract
जब भी गर्भाशय में रहता है, मानव पालेशांता अनुसंधान के लिए बेहद दुर्गम है । इसलिए विवो में मानव प्लैक्टिअल फिजियोलॉजी की वर्तमान समझ पशु चिकित्सा अध्ययनों पर आधारित है, भद्दा शरीर रचना विज्ञान, हेमोडायमिक्स और गर्भावस्था की अवधि में प्रजातियों के बीच उच्च विविधता के बावजूद। मानव प्लेसेन्टा अध्ययन के विशाल बहुमत पूर्व विवो छिड़काव के अध्ययन या इन विट्रो ट्रॉफ़ोबलास्ट अध्ययन में हैं। हालांकि इन विट्रो अध्ययन और जानवरों के मॉडल में आवश्यक हैं, ऐसे अध्ययनों से विवो में मानव प्लेसेन्टा के परिणामों का एक्सट्रपलेशन अनिश्चित है। हम शब्दावली में विवो में मानव प्लेसेंटा फिजियोलॉजी का अध्ययन करना चाहते थे, और विधि का विस्तृत प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते थे। योजनाबद्ध सिजेरियन सेक्शन के दौरान गर्भाशय की चीरा से पहले गर्भाशय नस को अंतराल पहुंचने का शोषण, हम नाल के मातृ एवं भ्रूण के पक्ष में आवक और जावक वाहिकाओं से रक्त के नमूने एकत्र करते हैं। जब संयोजन संयोजनमात्रा के रक्त के प्रवाह माप के साथ रक्त के नमूनों से सेंटीमीटर माप, हम बेदाग और भ्रूण की तेज मात्रा का आकलन करने में सक्षम हैं और किसी भी यौगिक को छोड़ने में सक्षम हैं। इसके अलावा, एक ही माता-गर्भ के जोड़े से नाक के ऊतक के नमूनों में ट्रांसपोर्टर घनत्व और गतिविधि और वीओओ में नाल के कार्यों के अन्य पहलुओं का मापन प्रदान किया जा सकता है । 4-पोत नमूना पद्धति के इस एकीकृत उपयोग के माध्यम से हम सामान्य और रोगजनक गर्भधारण दोनों में, विवो में नाल पोषक तत्व हस्तांतरण और चयापचय के कुछ मौजूदा अवधारणाओं को परीक्षण करने में सक्षम हैं। इसके अलावा, इस पद्धति ने मॅट्रिक संचलन को नाल द्वारा स्रावित पदार्थों की पहचान को सक्षम किया है, जो कि नासिकाय दोष के बायोमार्कर की तलाश में महत्वपूर्ण योगदान हो सकता है।
Introduction
नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ़ हेल्थ, यूएसए के अनुसार, प्लेसेंटा मानव शरीर 1 , 2 , 3 में सबसे कम समझ वाला अंग है। चल रहे गर्भावस्था पर अनैतिक जोखिमों को लागू किए बिना विवो में मानव प्लेसेन्टा का उपयोग करना और अध्ययन करना मुश्किल है। इसलिए मानव में नाज़ुक फ़ंक्शन का अध्ययन काफी हद तक इन विट्रो और पूर्व विवो मॉडल पर आधारित है। पिछला परिवहन और चयापचय के विवो के अध्ययन में पिछले 4 , 5 , 6 में जानवरों का प्रदर्शन किया गया है। हालांकि, जैसा कि मृदा संरचना और कार्य प्रजातियों के बीच काफी भिन्न होते हैं, जानवरों से मनुष्यों के परिणामों के एक्सट्रपलेशन को सावधानी के साथ किया जाना चाहिए। विवो अध्ययन में केवल कुछ छोटे इंसानों ने सामान्य शारीरिक विज्ञान के तहत प्लेकेन्ट और भ्रूण को तेज करने और परिवहन की जांच की हैअल परिस्थितियों, और कोई भी कई यौगिकों 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 के एकीकृत हस्तांतरण का पता लगाया है। ये मौलिक अध्ययन यह दर्शाते हैं कि मानव प्लेसेन्टा के विवो अध्ययन में संभव है और वे कई प्रयोजनों की सेवा कर सकते हैं। सबसे पहले, इन विट्रो , पूर्व विवो और पशु अध्ययनों से प्राप्त निर्विवाद कार्यों की वर्तमान अवधारणाओं को मानव सेटिंग में परीक्षण किया जा सकता है और इस प्रकार मानव प्लेसेंटा में उपन्यास और अधिक विशिष्ट अंतर्दृष्टि प्रदान की जा सकती है। दूसरा, भ्रष्ट भ्रूण विकास, प्रीक्लंपियासिया, मातृ मधुमेह, मेटाबोलिक सिंड्रोम और अन्य मातृ-विकार विकृतियों के साथ जुड़े बेकार के प्लेसेंटा के गुणों की विशेषता बेहतर हो सकती है। तीसरा, विवो अध्ययन में मानव नैदान विकसित करने का अवसर प्रदान करता हैपेट और फलनात्मक उपकरण के भविष्य के उपकरण।
इस पृष्ठभूमि पर हम का उद्देश्य विवो में मानव प्लैन्टैंटल फ़ंक्शन की जांच के लिए शारीरिक डेटा का एक व्यापक संग्रह स्थापित करना है । एक योजनाबद्ध सिजेरियन अनुभाग के दौरान, हम गर्भनाशक नसों के अंतराल तक पहुंच का फायदा उठाने के लिए नाल के मातृ और भ्रूण के पक्षों (4-पोत नमूना विधि) पर आने वाले और बाहर जाने वाले जहाजों से रक्त के नमूनों को एकत्रित करने के लिए उपयोग करते हैं। इन नमूनों पोषक तत्वों और अन्य पदार्थों 14 की बनती धमनीशिरापरक एकाग्रता अंतर की गणना करने के लिए उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, हम अल्ट्रासाउंड द्वारा प्लेसेंटा के दोनों तरफ मात्रा के प्रवाह को मापते हैं। नतीजतन, किसी भी यौगिक के नाक और भ्रूण ग्रहण किया जा सकता है। इसके अलावा, मृदा और भ्रूण परिसंचरणों के लिए नाल द्वारा जारी किए गए पदार्थ 15 , 16 , 17 को निर्धारित करना संभव है। जब गठबंधन करेंमां और बच्चे के नैदानिक मापदंडों के साथ घ, और नाल और अन्य प्रासंगिक ऊतकों का विश्लेषण करती है, इस पद्धति में एक ही मां-भ्रूण जोड़े में विवो में नाक के कार्यों के कई पहलुओं को एकीकृत करने की रोमांचक संभावनाएं हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
प्लेसेंटा 4-पोत नमूना पद्धति तीन मुख्य प्रयोजनों के लिए प्रासंगिक है। सबसे पहले, यह अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि मादक पक्ष पर नाल द्वारा विशिष्ट पदार्थ कैसे उठाए जाते हैं और संभवतया…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
सबसे पहले, हम इस परियोजना में भाग लेने वाली माताओं का ईमानदारी से धन्यवाद करते हैं। इसके बाद, हम सभी कर्मियों को स्वीकार करते हैं जो नमूनाकरण प्रक्रिया को सहायता और सहायता प्रदान करते हैं, एनेस्थिसियोलॉजिस्ट, नर्स एनेस्थिसियोलॉजिस्ट और सर्जिकल नर्सों। परियोजना दक्षिण-पूर्वी नॉर्वे क्षेत्रीय स्वास्थ्य प्राधिकरण और महिला स्वास्थ्य, ओस्लो विश्वविद्यालय पर नॉर्वेजियन सलाहकार इकाई और ओस्लो विश्वविद्यालय अस्पताल द्वारा प्रदान किए गए स्थानीय वित्त पोषण से धन के बिना संभव नहीं होगा।
Materials
| Maternal body composition | |||
| Impedance scale | Tanita | or similar | |
| Ultrasound measurements | |||
| Sequoia 512 ultrasound machine | Acuson | equipped with a curved transducer with colour and pulsewave Doppler (frequency bandwidth 2-6 MHz) | |
| Blood samples | |||
| Arerial cannula | BD Medical | 682245 | or similar |
| 20cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle | Termo | SS-20ES | or similar. 3 needed. |
| 10cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle | Termo | SS-10ES | or similar. 9 needed. |
| 5cc 6% Luer Syringe without Needle | Termo | SS-05S1 | or similar. 2 needed. |
| Arterial blood gas syringe | Radiometer Medical | or similar. 4 needed. | |
| Sterile winged needle connected to flexible tubing, 21 gauge | Greiner Bio-One | 450081 | (intended for single use).3 needed. |
| Vacutainer tube 6 mL EDTA | Greiner Bio-One | 456043 | or similar. Label with sample site. 10 needed. |
| Vacutainer tube 5 ml LH Lithium Heparin Separator | Greiner Bio-One | 456305 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Vacutainer tube 6 mL Serum Clot Activator | Greiner Bio-One | 456089 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Vacutainer tube 3 ml 9NC Coagulation sodium citrate 3,2% | Greiner Bio-One | 454334 | or similar. Label with sample site. 5 needed. |
| Cryogenic vials, 2.0 mL | Corning | 430488 | or similar. Label with sample site, serum/type of plasma and ID. 90 needed. |
| Marked trays to transport the syringes | to transport the blood samples in the operation theatre | ||
| Rocker | for gentle mixing of the samples | ||
| Ice | in styrofoam box | ||
| Liquid nitrogen | in appropriate container | ||
| Placenta samples | |||
| Metal tray | |||
| Ice | in styrofoam box | ||
| Calibrated scale | |||
| Metal ruler | |||
| 1 M Phosphate buffered saline | Sigma | D1408 | or similar. Dilute 10 M to 1M before use |
| RNA stabilization solution | Sigma | R0901-500ML | or similar |
| Optimal Cutting Temperature (O.C.T.) compound | vwr | 361603E | or similar |
| Cryogenic vials, 2.0 mL | Corning | 430488 | or similar. Label with sample site. content and ID. 10 needed. |
| Centrifuge tubes, conical bottom 50 mL | Greiner Bio-One | 227,285 | or similar. Label with "RNA later", sample site and ID. 2 needed. |
| Liquid nitrogen | in appropriate container | ||
| Fetal body composition | |||
| Calibrated scale | |||
| Measuring tape |
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