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Neuroscience

कोकीन का उपयोग विकार के एक चूहे मॉडल में क्यू जेट को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल

Published: June 18, 2018 doi: 10.3791/55864
Automatic Translation
*1,2,3, *1,4,5, 1,6, 1,6, 1,6, 1,6, 1,3,4
1Center for Addiction Research, University of Texas Medical Branch, 2Institute for Translational Sciences, University of Texas Medical Branch, 3Mitchell Center for Neurodegenerative Diseases, University of Texas Medical Branch, 4Department of Neurology, University of Texas Medical Branch, 5Department of Pathology, University of Texas Medical Branch, 6Department of Pharmacology and Toxicology, University of Texas Medical Branch
* These authors contributed equally

Summary

क्यू जेट दवा के साथ जुड़े संकेतों को संवेदनशीलता के रूप में धारणा है कि अनुभवों को तरस और संयमी मनुष्यों में पतन के लिए योगदान ले । क्यू जेट दवा से जुड़े cues की ओर ध्यान उन्मुखीकरण अभिविन्यास को मापने के द्वारा चूहों में मॉडलिंग की है कि आत्म प्रशासन और मजबूर संयम के बाद एक क्यू जेट परीक्षण में appetitive दृष्टिकोण व्यवहार में परिणाम.

Abstract

कोकीन का उपयोग विकार (जुगाली) दोहराव स्वयं प्रशासन के एक पथ के दौरान जो पहले तटस्थ उत्तेजनाओं प्रोत्साहन मूल्य हासिल । क्यू जेट, पहले दवा लेने के अनुभव के साथ जुड़े cues के लिए संवेदनशीलता, संयम के दौरान मानव लालसा में एक प्रमुख भूमिका निभाता है । क्यू जेट दवा संबद्ध cues कि दोनों नैदानिक और मानव अध्ययन में appetitive दृष्टिकोण व्यवहार के रूप में मापने योग्य है की ओर ध्यान उंमुखीकरण के रूप में मूल्यांकन किया जा सकता है । इस के साथ साथ स्वयं को प्रशिक्षित चूहों में क्यू जेट के एक आकलन का वर्णन कोकीन प्रशासन । कोकीन स्वयं प्रशासन असतत cues कि वातानुकूलित (यानी, घर प्रकाश, उत्तेजना प्रकाश, अर्क पंप लगता है) के रूप में कार्य की प्रस्तुति के साथ बनती है । संयम की अवधि के बाद, लीवर कोकीन स्वयं में प्रेस-प्रशासन असतत cues पहले कोकीन अर्क के साथ जोड़ा के साथ संदर्भ क्यू जेट के रूप में मापा जाता है । इस मॉडल के लिए क्यू जेट प्रक्रियाओं अंतर्निहित neurobiological तंत्र का पता लगाने के रूप में के रूप में अच्छी तरह से pharmacotherapies का आकलन करने के लिए उपयोगी है, और इसलिए और इसलिए, पलटा भेद्यता को संशोधित । मॉडल के लाभ अपनी अनुवाद प्रासंगिकता, और उसके चेहरे और पूर्वानुमान वैध शामिल हैं । मॉडल की प्राथमिक सीमा है कि क्यू जेट कार्य केवल अक्सर प्रदर्शन किया जा सकता है और केवल कम अवधि में इस्तेमाल किया जाना चाहिए (जैसे, 1 घंटे), अंयथा चूहों कोकीन उत्तेजना के साथ असतत cues के बाँधना बुझाने के लिए शुरू हो जाएगा । मॉडल किसी भी सकारात्मक मजबूत असतत cues के साथ युग्मित उत्तेजना के लिए बढ़ा है; हालांकि दुरुपयोग की दवाओं के लिए विशेष रूप से लागू है, इस मॉडल जैसे मोटापे, जहां स्वादिष्ट खाद्य पुरस्कार सकारात्मक मजबूत उत्तेजनाओं के रूप में कार्य कर सकते है के रूप में खेतों में भविष्य अनुप्रयोगों पकड़ सकता है ।

Introduction

कोकीन का उपयोग विकार (जुगाली) दोहराव स्वयं प्रशासन के एक पथ के दौरान जो पहले तटस्थ उत्तेजनाओं लाभ प्रोत्साहन मान1के बाद । क्यू जेट पहले दवा लेने के अनुभव के साथ जुड़े cues के लिए संवेदनशीलता है, और यह मानव तरस2,3,4,5में एक प्रमुख भूमिका निभाता है । जुगाली के लिए प्रगति के जोखिम, साथ ही संयम के दौरान पलटा, व्यक्तियों, जो दवा से जुड़े cues6,7के लिए उच्च संवेदनशीलता व्यक्त करने के लिए उच्च माना जाता है । दोनों पर्यावरण संदर्भों (जैसे, लोगों, इमारतों, संगीत शैलियों) और असतत दवा से जुड़े उत्तेजनाओं (जैसे, सामग्री) कोकीन इनाम के साथ जुड़े हो; इन संकेतों के संपर्क परिधीय शरीर क्रिया विज्ञान में परिवर्तन ट्रिगर कर सकते हैं (जैसे, हृदय गति, त्वचा का तापमान, और त्वचा प्रतिरोध), मस्तिष्क प्लास्टिक, और मस्तिष्क कार्यात्मक कनेक्टिविटी2,8,9 ,10. दूसरे शब्दों में, कोकीन के लिए फिर से जोखिम-जुड़े cues को अंग corticostriatal सर्किट सक्रिय वातानुकूलित शारीरिक और व्यक्तिपरक प्रतिक्रियाओं कि ड्राइव appetitive दृष्टिकोण (दवा मांग) का व्यवहार11,12 ,13,14,15.

क्यू जेट कार्यात्मक मस्तिष्क इमेजिंग विश्लेषण के साथ मापा16जुगाली के साथ विषयों में पलटा भेद्यता के पूर्वानुमान है । मूषक मॉडल में क्यू जेट माप पतन जोखिम के लिए एक किराए के उपाय के रूप में सेवा और अनुवाद अध्ययन के लिए शोषण किया जा सकता है । इस प्रकार, एक pharmacotherapy कि कुतर में क्यू जेट कम हो जाती है आगे एक पलटा मानव नैदानिक परीक्षणों में रोकथाम उपचार के रूप में किया जा सकता है । आवश्यक शोधों योग्यता और पूर्वानुमान वैधता के साथ नैदानिक मॉडल विशेष रूप से महत्वपूर्ण है क्योंकि वहां वर्तमान में कोई एफडीए जुगाली17के लिए pharmacotherapies अनुमोदित कर रहे हैं ।

कुतर स्वयं प्रशासन प्रक्रिया सोने के मानक, मानव दवा के लिए पूर्वानुमान वैधता के साथ अनुवाद मॉडल है-18 ले और गंभीर आणविक और शारीरिक जुगाली अंतर्निहित प्रक्रियाओं को समझने के लिए महत्वपूर्ण है । उत्तर-अलग व्यवहार, आणविक, और neurochemical प्रतिक्रिया-निर्भर कोकीन जोखिम के सापेक्ष प्रभाव में कोकीन परिणाम कीस्वतंत्र वितरण; उदाहरणके लिए, उत्तर-स्वतंत्र कोकीन डिलिवरी काफी उच्च मृत्यु दर उदाहरणदेते हैं । इसके अलावा, प्रतिक्रिया से संयम के neurochemical परिणामनिर्भर कोकीन आत्म प्रशासन प्रतिक्रिया से संयम द्वारा ट्रिगर उन से अलग हैं-स्वतंत्र कोकीन डिलिवरी20, 21. इस प्रकार, जुगाली मॉडल कोकीन की प्रतिक्रिया परनिर्भर प्रसव पर आधारित बेहतर शोधों मॉडल जब क्यू जेट और कार्रवाई के जुड़े तंत्र का आकलन कर रहे हैं ।

नीचे उल्लिखित प्रोटोकॉल में, कोकीन एक निवास के माध्यम से नसों में दिया है इंट्रा-jugular कैथेटर । हालांकि, मौखिक और साँस लेना मार्गों के माध्यम से स्व-प्रशासन दवा के लिए वैकल्पिक तरीकों विकसित किया गया है. महत्वपूर्ण बात, operant प्रतिक्रियाओं के माध्यम से, दवा, अनुरूप मनुष्यों के नियंत्रण के वितरण कुतर । इसलिए, दवाओं के बीच उच्च सामंजस्य कुतर और मनुष्यों द्वारा प्रशासित22है । इसके बाद के नैदानिक दवा स्वयं प्रशासन प्रक्रिया नीचे दबाव लीवर को रोजगार, दवा वितरण द्वारा प्रबलित, प्रतिक्रिया वाहन नियंत्रण से अधिक दरों को प्रेरित करने के लिए । दवा की मांग व्यवहार मूल रूप से "तटस्थ" cues बाँधना द्वारा प्रशिक्षित किया जाता है (जैसे, एक उत्तेजना प्रकाश या टोन और कोकीन आत्म प्रशासन होता है जिसमें प्रासंगिक वातावरण) कोकीन आधान के साथ; इन cues (समीक्षा के लिए: Cunningham और एनेस्टेसियो, २०१४23) मजबूत वातानुकूलित हो जाते हैं । कोकीन के बाद फिर से जोखिम-जुड़े cues कुतर में दवा की मांग व्यवहार ट्रिगर (यानी, पहले से सक्रिय लीवर पर दबाव के माध्यम से कोकीन देने के प्रयास) के रूप में के रूप में अच्छी तरह से तरस और पतन जुगाली विषयों में24, 25 , 26 , 27.

आम तौर पर, दवा की मांग व्यवहार के बाद से नैदानिक कुतर अध्ययन कोकीन स्वयं प्रशासन विलुप्त होने के प्रशिक्षण का उपयोग और दवा से जुड़े पर्यावरण के भीतर किए गए और / 30 , 31 , ३२. पहले सक्रिय लीवर पर प्रेस, दवा और/या क्यू डिलिवरी के अभाव में, आम तौर पर विलुप्त होने के बाद बहाली के उपाय का गठन३३,३४,३५। इसके विपरीत, क्यू जेट दवा की मांग व्यवहार पूर्व विलुप्त होने प्रशिक्षण28,३६,३७,३८,३९ के बिना मजबूर संयम के बाद मूल्यांकन किया जाता है .

परिणाम उपायों और प्रयोगात्मक चर सावधानी से चुना गया है और दवा की मांग और पतन की तरह व्यवहार के तंत्रिका जीव विज्ञान के विभिंन पहलुओं काटना के लिए मांय है, और यह अच्छी तरह से स्थापित है कि neuroadaptations के साथ मॉडलों के बीच अलग है और बिना विलुप्त प्रशिक्षण ४०,४१,४२,४३. इसके अलावा, एक शोधों के नजरिए से, कुतर विलुप्त होने प्रशिक्षण जुगाली के लिए नैदानिक सेटिंग्स में प्रतिबिंबित नहीं है के बाद से दवा से संबंधित cues मूड राज्यों, स्थानों, और लोगों को शामिल४४; इन संकेतों के अद्वितीय संयोजन की संभावना एक नैदानिक वातावरण में उपलब्ध नहीं हैं४५,४६,४७. इस प्रकार, कुतर मॉडल वर्णित इस स्पेसिफिकेशंस के रूप में कार्य करता है मानव हालत के लिए एक बेहतर समानांतर वर्तमान में उपलब्ध मॉडलों के कई ।

निंनलिखित चूहों के लिए एक मांय कोकीन स्वयं प्रशासन प्रशिक्षण, मजबूर संयम और क्यू जेट परीक्षण प्रोटोकॉल का वर्णन । संक्षेप में, चूहों अंतरराज्यीय jugular कैथेटर के साथ प्रत्यारोपित कर रहे हैं, खुद को प्रशिक्षित कोकीन या खारा ' के माध्यम से ' सक्रिय लीवर प्रेस, और कोकीन या खारा उत्तेजना की प्राप्ति असतत प्रकाश और ध्वनि cues जो वातानुकूलित के रूप में सेवा के साथ बनती है मजबूत । कोकीन स्वयं प्रशासन के 14 दिनों के बाद, चूहों मजबूर संयम के 30 दिनों के लिए अधीन है और एक बाद ६०-ंयूनतम क्यू जेट परीक्षण जिसमें लीवर दबाने मापा जाता है । क्यू जेट परीक्षण कोकीन पतन मानव में जोखिम के लिए एक किराए का उपाय है ।

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Protocol

सभी पशु जोड़तोड़ की देखभाल और प्रयोगशाला जानवरों (२०११) के उपयोग के लिए गाइड के अनुसार और संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति से अनुमोदन के साथ किया जाता है ।

1. पशु

  1. Acclimate पुरुष Sprague Dawley चूहों की उंर के लगभग 8-9 सप्ताह (250-260 ग्राम) एक कॉलोनी कमरे में सात दिनों की एक ंयूनतम के लिए 21-23 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखा और एक 12 एच लाइट पर 45-50% आर्द्रता-अंधेरे चक्र (पर रोशनी 6:00-18:00 एच) ।
  2. घर चूहों दो पिंजरे और अध्ययन भर में दैनिक संभाल । अध्ययन के सभी चरणों भर में घर पिंजरे में भोजन और पानी विज्ञापन libitum प्रदान करें ।
    नोट: खाद्य प्रतिबंध कोकीन इनाम४८, potentiates कोकीन-प्रेरित हरकत गतिविधि४९के saliency बढ़ जाती है, और बहाली५० के लिए एक तनाव के रूप में कार्य करता है और इस प्रकार भी क्यू जेट प्रभाव हो सकता है ।
  3. बेतरतीब ढंग से खारा या कोकीन उपचार समूहों के लिए चूहों को आवंटित ।

2. सर्जरी

  1. xylazine के ८.६ मिलीग्राम/किलो से युक्त एक कॉकटेल का उपयोग संज्ञाहरण के तहत प्लेस चूहा, acepromazine के १.५ मिलीग्राम/किग्रा, और ४३ ketamine के मिलीग्राम/बैक्टीरियोस्टेटिक खारा में निलंबित कर दिया । पुष्टि करें कि चूहे अपने पाँव चुटकी और मोटर सजगता और श्वसन की निगरानी द्वारा पर्याप्त anesthetized है । आंख सूखापन को रोकने के लिए सीधे आंखों के लिए नेत्र मरहम लागू करें ।
    नोट: यदि चूहे पर्याप्त नहीं है anesthetized यह पैर की अंगुली चुटकी के लिए एक मोटर प्रतिक्रिया प्रदर्शन करेंगे, और चूहे की श्वास दर तेजी से बढ़ सकता है ।
    1. चूहा संज्ञाहरण के तहत है, जबकि अपूतित तकनीक का उपयोग करना, एक प्रवेशनी के साथ एक वापस माउंट करने के लिए जुड़ा jugular नस में एक नसों कैथेटर प्रत्यारोपण । शल्य चिकित्सा आरोपण के बाद, चूहों 5-7 दिनों के लिए ठीक करने के लिए अनुमति दें 28,३६,३७,५१.
      नोट: मस्तिष्क कोकीन के स्तर में तेजी से बढ़ता में मानव परिणाम में कोकीन स्वयं प्रशासन के नसों में मार्ग५२,५३। इस प्रकार, अपने सबसे आम नैदानिक वेरिएंट में से एक में, चूहों एक इंट्रा-jugular कैथेटर के माध्यम से स्वयं कोकीन प्रशासन को प्रशिक्षित किया जाता है.
  2. हेपरिन सोडियम युक्त बैक्टीरियोस्टेटिक खारा के ०.१ मिलीलीटर (10 U/एमएल), streptokinase (०.६७ मिलीग्राम/एमएल), और ticarcillin disodium (६६.६७ मिलीग्राम/एमएल) के एक समाधान का उपयोग कर दैनिक flushes के साथ कैथेटर प्रत्यक्षता बनाए रखें । कैथेटर सर्जरी के बाद दिन निस्तब्धता शुरू और प्रत्येक दिन जारी स्व-प्रशासन सत्र के बाद ।
    1. समाधान के साथ एक सिरिंज भरें और वापस कनेक्ट करने के लिए फ्लश पॉलीथीन टयूबिंग के माध्यम से सिरिंज के लिए माउंट ।
    2. methohexital सोडियम के 10 मिलीग्राम/किलो की नसों में प्रशासन द्वारा प्रयोग के दौरान समय पर उचित कैथेटर समारोह की पुष्टि करें ।
      नोट: यह एक खुराक संक्षेप में केवल जब नसों के द्वारा प्रशासित पशु anesthetize करने के लिए पर्याप्त है ।

3. स्व-प्रशासन

  1. नीचे वर्णित के रूप में 4 अलग प्रोग्राम उत्पंन करने के लिए सॉफ्टवेयर प्रोग्रामिंग का प्रयोग करें ।
    1. कोड स्व के लिए एक निश्चित अनुपात (FR) 1 अनुसूची, यानी, पर प्रशासन के लिए दो कार्यक्रम जहां एक सक्रिय लीवर एक अर्क में परिणाम प्रेस । कार्यक्रम #1 के लिए, सक्रिय लीवर के रूप में छोड़ दिया लीवर कोड; कार्यक्रम #2 के लिए, सक्रिय लीवर के रूप में सही लीवर कोड । दोनों कार्यक्रमों के निर्माण के लिए १८०-लंबाई में मिन, और कोकीन उत्तेजना और असतत क्यू परिसर उद्धार निंनलिखित तरीके से:
      1. दोनों घर प्रकाश और सक्रिय लीवर के ऊपर उत्तेजना प्रकाश की एक साथ रोशनी एक सक्रिय लीवर प्रेस कारण है ।
      2. एक 1-s देरी के बाद, अर्क पंप 6-एस पर समाधान के ०.१ मिलीलीटर उद्धार है ।
      3. उत्तेजना प्रकाश 7-एस के बाद बंद है (अर्क पंप के रूप में एक ही समय में निष्क्रिय) ।
      4. घर प्रकाश के बाद बंद कर दिया है 27-s, पिछले 20 के साथ एक टाइम-आउट अवधि के दौरान जो सक्रिय लीवर प्रेस कोई निर्धारित परिणाम है, अभी तक ये अभी भी दर्ज कर रहे है का संकेत एस ।
      5. डेटा उत्पादन के लिए, अर्क, सक्रिय लीवर प्रेस, निष्क्रिय लीवर प्रेस, और पहले सक्रिय लीवर प्रेस को विलंबता इकट्ठा ।
    2. कोड स्वयं के लिए दो और प्रोग्राम एक FR5 अनुसूची पर प्रशासन, यानी, जहां पांच लीवर एक अर्क में परिणाम दबाता है । फिर, बाएं के रूप में सक्रिय लीवर के साथ एक कार्यक्रम बनाने के लिए, और सही के रूप में सक्रिय लीवर के साथ एक कार्यक्रम । दोनों कार्यक्रमों १८०-मिनट लंबाई में बनाओ, और निंनलिखित तरीके से मजबूत और असतत क्यू परिसर उद्धार:
      1. पांच सक्रिय लीवर प्रेस दोनों घर प्रकाश और सक्रिय लीवर के ऊपर उत्तेजना प्रकाश के एक साथ रोशनी का कारण है ।
      2. 3.1.1.5के माध्यम से 3.1.1.2 चरण दोहराएँ ।
  2. स्व-प्रशासन प्रशिक्षण
    1. कोकीन समाधान तैयार करें दैनिक बाँझ में ०.९% NaCl की एक खुराक के लिए ०.७५ मिलीग्राम/kg/0.1 मिलीलीटर ।
      नोट: प्रत्येक १८० मिनट स्वयं प्रशासन सत्र की अवधि में, चूहों कोकीन समाधान के लगभग 4-5 मिलीलीटर व्यवस्थापन, इस प्रकार अतिरिक्त में तैयार करने के लिए, लगभग 8 मिलीलीटर की आशंका/
    2. कैथेटर सिरिंज (10 मिलीलीटर) कोकीन या खारा समाधान के कम से 8 मिलीलीटर के साथ भरें । यह सुनिश्चित करने के बाद कि कोकीन/खारा घोल बह रहा है, अर्क पंप में सीरिंज डालें और पॉलीथीन टयूबिंग से कनेक्ट करने के लिए प्रत्येक स्वयं प्रशासन सत्र के शुरू में एक धातु वसंत पट्टा द्वारा । सावधानी से प्रत्येक अर्क पंप में सिरिंज समायोजित इस तरह के समाधान समान रूप से है और प्रत्येक कैथेटर को संलग्न करने से पहले पॉलीथीन टयूबिंग में वितरित पूरा किया ।
    3. चूहों को संबंधित मानक operant कंडीशनिंग कक्षों में रखें, जो प्रशंसकों के साथ हवादार, ध्वनि-क्षीण करने वाले कक्ष में स्थित हों । लगातार एक ही operant चैंबर में प्रत्येक चूहे की जगह, और सक्रिय लीवर सभी प्रयोगों भर में एक ही पक्ष पर रखें । छोड़ दिया और सही सक्रिय लीवर के बीच चूहों के Counterbalance असाइनमेंट ।
      नोट: प्रत्येक चैंबर एक गोली दो मुकर प्रतिक्रिया लीवर, प्रत्येक प्रतिक्रिया लीवर के ऊपर एक उत्तेजना प्रकाश, और लीवर विपरीत एक घर प्रकाश द्वारा पार्श्व संदूक के साथ सुसज्जित है । कोकीन/खारा सीरिंज एक 23g सुई से जुड़े रहे हैं (poking टयूबिंग से बचने के लिए दायर) पॉलीथीन टयूबिंग से जुड़ी एक धातु वसंत पट्टा जो प्रत्येक चूहे कैथेटर से जोड़ता है और एक तरल कुंडा पर संचालित है के अंदर रहता है । सीरिंज कक्ष के निकट स्थित अर्क पंपों में रखा जाता है ।
    4. ट्रेन चूहों लीवर के लिए प्रेस कोकीन सुई लेनी (०.७५ मिलीग्राम/किलो/0.1 एमएल अर्क) या खारा सुई लेनी (०.१ एमएल) दैनिक १८० मिनट के दौरान स्थापित तरीकों28,३६,३७,५१का उपयोग कर सत्र ।
      नोट: यह प्रशिक्षण बस operant चैंबर में चूहे रखकर किया जाता है और यह लीवर प्रेस करने की अनुमति; सक्रिय लीवर दबाने असतत क्यू जटिल और कोकीन अर्क की प्राप्ति में परिणाम होगा, जबकि निष्क्रिय लीवर दबाने कोई अनुसूचित परिणाम भालू ।
      1. एक 6-s अवधि से अधिक सक्रिय लीवर और उत्तेजना प्रकाश की रोशनी के साथ एक साथ युग्मित सक्रिय लीवर और अर्की पंप के सक्रियकरण के ऊपर एक कोकीन या खारा अर्क के वितरण में एक्टिव लिवर परिणाम पर पूरा अनुसूची (यह असतत है क्यू जटिल कोकीन वितरण के साथ युग्मित); निष्क्रिय लीवर प्रेस कोई अनुसूचित परिणाम का उत्पादन । बाद मजबूत (कोकीन) प्रसव, उत्तेजना प्रकाश के रूप में के रूप में अच्छी तरह से अर्क पंप निष्क्रिय कर रहे हैं; हाउस लाइट पर एक अतिरिक्त 20-s के लिए एक समयबाह्य अवधि के दौरान जो लीवर प्रेस कोई निर्धारित परिणाम है इंगित करने के लिए रहता है ।
        नोट: यह कैसे सेट करने के लिए का वर्णन चरणों में पाया जाता है 3.1.1.1-3.1.1.4
    5. १८०-मिन सत्र के पूरा होने पर, अपने operant कंडीशनिंग चैंबर से प्रत्येक चूहे को हटाने और अपने कैथेटर (चरण २.२) फ्लश । ध्यान से सत्रों के बीच कक्षों को साफ, एक ७०% इथेनॉल समाधान के साथ प्रत्येक सतह पोंछते ।
      नोट: स्व-प्रशासन सत्र के दौरान कोकीन प्राप्त करने वाले चूहों को चैंबर से निकालना मुश्किल हो सकता है और अधिक आक्रामक होने की संभावना है. अपने तार से प्रत्येक चूहे को डिस्कनेक्ट करने के लिए धीमी गति से, सावधान गति का प्रयोग करें ।
    6. लगातार तीन दिनों के लिए प्रति सत्र अर्की की कुल संख्या में 10% से कम परिवर्तनशीलता के साथ सात सुई लेनी/एच के एक मापदंड को प्राप्त करने के बाद एक FR5 अनुसूची करने के लिए सुदृढीकरण और प्रगति के एक FR1 अनुसूची पर चूहों को प्रशिक्षित । स्व-प्रशासन सत्र जारी रखें जब तक चूहों को आत्म-प्रशासन प्रशिक्षण के कुल 14 दिनों तक पहुंच गया है ।
      नोट: यह operant सीखने का एक संस्करण है; कुछ प्रोटोकॉल चूहों है पसंद करने के लिए प्रयोग की पूरी तरह भर में FR1 पर रहते हैं । FR1 से FR5 तय अनुपात अनुसूची में परिवर्तन सुई लेनी की संख्या को प्रभावित नहीं करते एक पशु स्व-election५४,५५. हालांकि, निश्चित अनुपात आकार में वृद्धि चूहे में प्रतिक्रिया की स्थिरता सुनिश्चित करने में मदद करता है, और इनाम५६की saliency वृद्धि हो सकती है । इसके अतिरिक्त, अगर मजबूर संयम के दौरान एक इलाज वांछित है, चूहों छद्म बेतरतीब ढंग से प्राप्त करने पर उपचार समूहों को सौंपा जाना चाहिए (सत्र प्रति अर्की की कुल संख्या में 10% से कम परिवर्तनशीलता लगातार 3 दिनों की एक ंयूनतम के लिए) FR5 अनुसूची । इसके अतिरिक्त, खारा चूहों FR1 से FR5 के लिए प्रगति नहीं करेगा, के रूप में खारा के saliency के लिए FR1 से FR5 प्रगति के लिए आवश्यक स्थिरता प्राप्त करने के लिए पर्याप्त नहीं है ।

4. मजबूर संयम

  1. 30 दिनों के लिए मजबूर संयम में चूहों प्लेस; कि, चूहों को स्वयं के अवसर के साथ नहीं प्रदान करते हैं, कोकीन या खारा 30 दिनों की अवधि के लिए प्रशासन । महत्वपूर्ण बात, इस अवधि के दौरान चूहों operant मंडलों को वापस नहीं (स्वयं के पिछले संदर्भ-प्रशासन) । हालांकि, दैनिक हैंडलिंग और वजन के लिए घर पिंजरों से चूहों को दूर, सामांय स्वास्थ्य के एक उपाय के रूप में ।
    नोट: मजबूर संयम की अवधि बदला जा सकता है, लेकिन यह एक अवधि है कि छत और फर्श प्रभाव से बचने के लिए पर्याप्त है का चयन करने के लिए महत्वपूर्ण है । कारक जब मजबूर संयम अवधि की अवधि को चुनने के जानकार हो कुतर तनाव, उंर, स्वयं प्रशासन सत्र की लंबाई और अवधि, दवा, दवा खुराक और अर्क अवधि, और पशु के सेक्स शामिल हैं ।

5. कोकीन क्यू जेट

  1. FR1 शेड्यूल पर क्यू जेट कार्य के लिए दो सॉफ़्टवेयर प्रोग्राम को कोड करें; सक्रिय लीवर के रूप में छोड़ दिया लीवर के साथ एक कार्यक्रम, और सक्रिय लीवर के रूप में सही लीवर के साथ एक । प्रत्येक कार्यक्रम का निर्माण करने के लिए ६०-मिनट के लिए डेटा दबाने लीवर इकट्ठा और असतत क्यू परिसर के रूप में नीचे वर्णित उद्धार ।
    1. दोहराएं चरण 3.1.1.1-3.1.1.4
    2. डेटा उत्पादन के लिए, क्यू प्रस्तुतियों इकट्ठा (पहले सुई लेनी के रूप में जाना जाता है), पहले से सक्रिय लीवर प्रेस, निष्क्रिय लीवर प्रेस, और पहले लीवर प्रेस को विलंबता ।
  2. कोकीन क्यू जेट परीक्षण सत्र
    1. एक ६०-ंयूनतम operant परीक्षण सत्र में मजबूर संयम के 30 दिन पर क्यू जेट का आकलन करें । तेजी से decapitation और मस्तिष्क फसल की सुविधा के लिए चूहों का चौंका शुरू बार । महत्वपूर्ण बात, क्यू जेट परीक्षण के लिए, अर्क पंप में सिरिंज इतनी जगह नहीं है कि अर्क पंप की आवाज एक श्रवण क्यू के रूप में कार्य करता है, लेकिन कोई कोकीन सुदृढीकरण दिया जाता है ।
      नोट: क्यू जेट को मजबूर संयम के दिन 30 के अलावा अंय दिनों पर मूल्यांकन किया जा सकता है, लेकिन तथ्य यह है कि कोकीन-युग्मित cues के लिए जवाबदेही समय३४ ध्यान में रखा जाना चाहिए जब क्यू जेट परीक्षण के लिए तारीख को चुनने के साथ बदलता है ।
    2. प्रत्येक चूहे को स्वयं-प्रशासन कक्ष में रखें जिसमें वह दैनिक स्व-प्रशासन सत्रों के दौरान अपने प्रवेशनी को प्रशिक्षित और तार किया गया था । लीवर कि पहले दिया कोकीन या खारा पर प्रेस अब केवल असतत क्यू परिसर (यानी, उत्तेजना प्रकाश और घर प्रबुद्ध हैं, और अर्क पंप सक्रिय है) एक FR1 अनुसूची (यानी, एक पर प्रसव के द्वारा प्रबलित रहे हैं) असतत क्यू परिसर सक्रिय लीवर प्रेस प्रति प्रस्तुत है); गणना क्यू प्रस्तुतियों और पहले सक्रिय लीवर प्रेस १ ६०-ंयूनतम सत्र के दौरान, और भी निष्क्रिय लीवर प्रेस की संख्या रिकॉर्ड । हालांकि, स्वयं के साथ के रूप में प्रशासन, निष्क्रिय लीवर प्रेस कोई अनुसूचित परिणाम उपज ।
      नोट: एक अतिरिक्त नियंत्रण के लिए विकल्प को पहले से सक्रिय है और निष्क्रिय निर्धारित परिणाम (यानी, कोई असतत क्यू जटिल मजबूत) के अभाव में लीवर प्रेस रिकॉर्ड है ।
    3. क्यू जेट परीक्षण सत्र के पूरा होने पर, तुरंत euthanize चूहों operant कंडीशनिंग चैंबर और असतत क्यू परिसर के लिए फिर से जैव रासायनिक प्रभाव पर कब्जा करने के लिए ।

6. डेटा संग्रह, संगठन, और विश्लेषण

  1. तीन पारंपरिक श्रेणियों में डेटा को तोड़ें: सामांय स्वास्थ्य, स्वयं प्रशासन, और क्यू जेट ।
    1. प्रयोग के दौरान सामांय स्वास्थ्य (जैसे, पशु वजन, फर हालत) की निगरानी, और पशु चिकित्सा देखभाल के साथ पशुओं को उपलब्ध कराने, यदि आवश्यक हो, या अध्ययन से हटाने अगर लीवर दबाव स्वास्थ्य से प्रभावित दिखाई देता है ।
    2. सेल्फ एडमिनिस्ट्रेशन के 14 दिनों के दौरान सेल्फ एडमिनिस्ट्रेशन डाटा कलेक्ट करें । एक ख़राब, दो पूंछ टी परीक्षण का उपयोग करने के लिए कोकीन और खारा स्वयं सुई लेनी, सक्रिय लीवर प्रेस, निष्क्रिय लीवर प्रेस, और पहले सक्रिय लीवर प्रेस के लिए विलंबता की कुल संख्या के लिए प्रशासन समूहों के बीच सांख्यिकीय मतभेद निर्धारित करते हैं ।
      नोट: स्वयं प्रशासन डेटा की जरूरत है पहले विश्लेषण करने के लिए मजबूर संयम अगर एक इच्छाओं को क्यू जेट पर मजबूर संयम के दौरान एक इलाज के प्रभाव का अध्ययन (ताकि समूहों सुई लेनी की एक बराबर औसत संख्या हो सकती है, साथ ही साथ सक्रिय और निष्क्रिय लीवर प्रेस) । यदि एक दो द्वारा दो डिजाइन (कोकीन ± उपचार, खारा ± उपचार) चुना है, एक दो तरह के उपयुक्त पोस्ट हॉक विश्लेषण के साथ ANOVA इस डेटा का विश्लेषण किया जाना चाहिए ।
    3. क्यू रिएक्टिव डेटा के लिए इकट्ठा और क्यू प्रस्तुतियों की कुल संख्या के लिए विश्लेषण, पहले सक्रिय लीवर प्रेस, निष्क्रिय लीवर प्रेस, और पहले लीवर प्रेस को विलंबता । इसके अलावा एक ख़राब, दो पूंछ टी परीक्षण के साथ इस डेटा का विश्लेषण करने के लिए पशुओं के बीच अंतर निर्धारित करने के लिए स्वयं कोकीन प्रशासन और उन स्वयं खारा प्रशासन ।
      नोट: फिर से, अगर एक दो-द्वारा-दो डिजाइन चुना है (कोकीन ± उपचार, खारा ± उपचार), एक दो तरह ANOVA उपयुक्त पोस्ट हॉक विश्लेषण के साथ इस डेटा का विश्लेषण किया जाना चाहिए ।

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Representative Results

एक कोकीन स्वयं प्रशासन और संयम प्रयोग के परिणाम एक पहले से प्रकाशित अध्ययन५७ से एक क्यू जेट परीक्षण के बाद चित्रा 1में दिखाया गया है । स्टडी टाइमलाइन को फिगर 1aमें दर्शाया गया है ।

चूहों व्यक्तिगत संक्रमण FR1 से FR5 के रूप में वे मानदंडों को पूरा. कोकीन-प्रशासन समूह में operant कंडीशनिंग आय के रूप में, चूहों धीरे सुई लेनी की संख्या में वृद्धि जब तक वे एक पठार (आंकड़ा 1b) तक पहुंचने । निष्क्रिय लीवर प्रेस दोनों कोकीन-प्रशासन और खारा प्रशासन समूहों में लगातार कम रहते हैं; निष्क्रिय लीवर में अंतर प्रेस प्रेरणा या स्वास्थ्य में परिवर्तन का सुझाव देते हैं । खारा स्वयं प्रशासन कि खारा में एक नियंत्रण के रूप में कार्य करता है मजबूत नहीं है; इस प्रकार, लीवर प्रेस और सुई लेनी दिन 1 से दिन 14 तक नहीं बढ़ा (चित्र नहीं) । अगर सक्रिय लीवर कोकीन में प्रेस-1 दिन और 14 दिन के बीच समूह गिरावट प्रशासन, कैथेटर की संभावना प्रत्यक्षता खो दिया है (यह भी कदम -8 में वर्णित विधि द्वारा सबूत), और इस जानवर के अध्ययन से हटा दिया जाना चाहिए । ऐसे पशु जो सांख्यिकीय outliers हैं (जैसे डिक्सन के Q परीक्षण का उपयोग करके गणना की जाती है) को भी अध्ययन से हटा देना चाहिए ।

कई उत्पादन उपायों कोकीन क्यू जेट परीक्षण से इकट्ठा कर रहे हैं । उदाहरण के लिए, चित्रा 1C पहले सक्रिय लीवर पर लीवर प्रेस की संख्या को दर्शाया गया है । चूहों जो पहले स्वयं प्रशासित कोकीन पहले सक्रिय लीवर अधिक चूहों जो स्वयं खारा प्रशासित से अधिक प्रेस चाहिए । और, अगर एक इलाज कोकीन क्यू जेट क्षीणन में प्रभावी है, वहां भी पहले की संख्या में एक महत्वपूर्ण कमी हो जाना चाहिए-सक्रिय चूहों जो कोकीन मिला और चूहों जो कोकीन प्राप्त की तुलना में उपचार में प्रेस और वाहन (चित्र नहीं) ।

अंय माप पहले लीवर प्रेस (चित्रा 1 डी), निष्क्रिय लीवर प्रेस की संख्या, और क्यू प्रस्तुतियों की संख्या को विलंबता शामिल हैं । पहले लीवर प्रेस को विलंबता में परिवर्तन मनाया जा सकता है; पहले लीवर प्रेस करने के लिए एक वृद्धि हुई विलंबता सुझाव है कि पशु शारीरिक रूप से बीमार है या कि वहां कोकीन के लिए प्रेरणा की कमी है हो सकता है । हरकत व्यवहार के लिए उपयुक्त नियंत्रण, जैसे Rotarod या खुला क्षेत्र कार्य, शारीरिक बीमारी और प्रेरणा में परिवर्तन के बीच अंतर करने के लिए नियोजित किया जाना चाहिए ।

हालांकि एक अनुमान है कि क्यू प्रस्तुति की संख्या पहले सक्रिय लीवर प्रेस की संख्या में परिलक्षित होना चाहिए सकता है, यह अक्सर मामला नहीं है । अक्सर पहले से सक्रिय लीवर प्रेस बहुत क्यू प्रस्तुतियों से अधिक हैं । चूहों अक्सर दिखाने के perseverative पहले सक्रिय लीवर मध्यांतर अवधि के दौरान दबाने, जाहिरा तौर पर एक विफलता की उंमीद कोकीन उत्तेजना प्राप्त करने के लिए जवाब में ।

Figure 1
चित्र 1. प्रयोगात्मक समयरेखा और प्रतिनिधि स्वयं प्रशासन और क्यू जेट परिणाम । यह आंकड़ा मिलर एट अल., २०१६५७से संशोधित किया गया है । (A) प्रायोगिक समयरेखा के रूप में प्रोटोकॉल वर्गों 3, 4, 5 में वर्णित है । (ख) औसत दैनिक सक्रिय लीवर प्रेस, निष्क्रिय लीवर प्रेस, और सुई लेनी ± SEM स्वयं के लिए प्रशासन प्रशिक्षण; स्व-प्रशासन सत्र लगातार 14 दिनों के लिए प्रत्येक दिन १८०-ंयूनतम थे । कोकीन शुरू में सुदृढीकरण के एक FR1 अनुसूची पर जब तक बैठक की कसौटी पर दिया गया था, तो एक FR5 अनुसूची शुरू की गई थी । (ग) औसत लीवर पहले सक्रिय लीवर प्रेस ± SEM के लिए ६०-ंयूनतम क्यू जेट परीक्षण; एक ख़राब, दो पूंछ टी परीक्षण कोकीन और खारा स्वयं के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर से पता चलता है चूहों प्रशासन (टी (30) = १४.८२, * * p < 0.0001) । (घ) ६०-ंयूनतम क्यू जेट परीक्षण के लिए पहले लीवर प्रेस ± SEM के लिए औसत विलंबता; एक ख़राब, दो पूंछ टी परीक्षण कोकीन और खारा स्वयं-चूहों प्रशासन (टी (29) = ०.२७५८, पी = ०.७८४७) के बीच कोई महत्वपूर्ण अंतर से पता चलता है । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

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Discussion

दवा-युग्मित cues और इन cues के जवाब में शारीरिक परिवर्तन के लिए जोखिम16 पतन,11,16 और कोकीन क्यू जेट परीक्षण के साथ जुड़े रहे है आकस्मिक प्रस्तुत कोकीन-युग्मित cues में दवा के अभाव; इस प्रकार, दवा पहले से सक्रिय लीवर प्रेस के रूप में व्यवहार की मांग पलटा भेद्यता का एक उपाय के रूप में कार्य करता है । क्यू जेट प्रोटोकॉल यहां वर्णित एक नैदानिक साधन है जिसके द्वारा पतन-संशोधित pharmacotherapies परीक्षण किया जा सकता है, और आनुवंशिक और पर्यावरणीय कारकों है कि पतन के जोखिम में योगदान की जांच की जा सकती है । यह दवा की मांग व्यवहार है कि मानव दवा लेने और पतन के कई गुणों के साथ संरेखित करता है के लिए एक operant कार्य है, और कई प्रकाशनों कुंजी दवा खुराक और वितरण मापदंडों के रूप में अच्छी तरह के रूप में अपनाया उचित नियंत्रण का सामना वैधता स्थापित करने के लिए अनुकूलित किया है और शोधों की भविष्यवाणी शक्ति28,३६,३७,३९,५१. यह मॉडल हाल ही में मिलर एट अलद्वारा एक अध्ययन में प्रकाशित किया गया है । एक peroxisome proliferator के उपयोग की जांच-सक्रिय रिसेप्टर गामा (एक pharmacotherapeutic के रूप में PPARγ एगोनिस्ट कोकीन क्यू जेट५७क्षीण करना । इस अध्ययन से पता चला कि pioglitazone (एक PPARγ एगोनिस्ट) कोकीन के लिए जवाबदेही में कमी आई-कोकीन स्वयं प्रशासन से मजबूर संयम निंनलिखित युग्मित cues । के बाद से pioglitazone एफडीए मंजूरी दे दी है, मिलर एट अल। अध्ययन एक दो हाथ, डबल अंधा, यादृच्छिक, placebo-नियंत्रित पायलट नैदानिक परीक्षण कोकीन क्यू जेट दमन, impulsivity, और जोखिम भरा निर्णय लेने में PPARγ agonism की प्रभावशीलता की जांच करने के लिए प्रेरित किया । Schmitz एट अलद्वारा कुतर गए मॉडल की शोधों की योग्यता और पूर्वानुमान वैधता का समर्थन किया गया है । इस पायलट अध्ययन में कोकीन पर निर्भर pioglitazone के साथ इलाज विषयों पर प्रकाशन५८ कम आत्म के लिए एक उपचार एक्स समय संपर्क का प्रदर्शन के रूप में संक्षिप्त पदार्थ तरस पैमाने और एक दृश्य अनुरूप पैमाने से मापा के रूप में सूचना तड़प तड़पती५८. इस प्रकार, pioglitazone जुगाली के लिए एक पतन की रोकथाम उपचार, मिलर एट अलके साथ संगत के रूप में वादा दिखाता है । नैदानिक डेटा ।

संयम recapitulates जीर्ण मानव कोकीन स्वयं-आंतरायिक लघु के साथ प्रशासन के दौरान इस चूहे कोकीन क्यू जेट परीक्षण (जैसे, 21 घंटे) और लंबे समय (जैसे, 30 दिन) संयम अवधि, समानांतर बनाने की क्षमता प्रदान मनुष्यों और कुतर मॉडलों के बीच डेटासेट । हालांकि, इस प्रोटोकॉल और अधिक व्यापक विलुप्त होने-बहाली मॉडल जो दवा लेने के लिए समय उपाय या एक विलुप्त होने की प्रक्रिया के बाद की मांग और (आम तौर पर) एक संयम अवधि३३,३४,३५ से अलग है ,५९. हालांकि विलुप्त होने-बहाली मॉडल पूर्वानुमान वैधता३३रखती है, यह भी उल्लेखनीय सीमाएं हैं । सबसे पहले, विलुप्त होने की प्रक्रिया पुनः के साथ आय-खारा और कोकीन आत्म उजागर-स्वयं के लिए समूहों प्रशासन दवा सुदृढीकरण६० जो शायद ही कभी मनुष्य में recapitulated है दवा से संबंधित cues के अभाव में व्यवस्थापन संदर्भ मूड राज्यों, स्थानों, और लोग४४-cues जो आसानी से एक नैदानिक सेटिंग४५,४६,४७में नकल नहीं किया जा सकता शामिल हैं । दूसरा, बहाली की प्रक्रिया के दौरान, चूहों एक मंजिल प्रभाव है कि एक को रोकता है हस्तक्षेप के प्रभाव का पता लगाने की क्षमता को दबाने के लिए दवा की मांग व्यवहार३३-एक मुद्दा है कि हटाने से हल हो गई है बनाने के जवाब के कम स्तर का प्रदर्शन लुप्त हो रही प्रशिक्षण के बाद से विलुप्त प्रतिक्रिया कम हो जाती है । कुछ तर्क हो सकता है कि ६०-मिन क्यू जेट परीक्षण सत्र ऊपर वर्णित एक विलुप्त सत्र के रूप में सेवा कर सकता है । हालांकि, तथ्य यह है कि प्रोटोकॉल गैर दवा सुदृढीकरण भी शामिल है, परीक्षण सत्र दोहराया नहीं है, और चूहों के बाद स्वयं प्रशासन के लिए प्रेरणा बनाए रखने के क्यू जेट परीक्षण के बाद पता चलता है कि इस परीक्षण डिजाइन विलुप्त होने के लिए प्रेरित नहीं करता है ३६.

एक अतिरिक्त मुद्दा यह है कि अपेक्षाकृत कम आत्म प्रशासन सत्र लंबाई कार्यरत (१८०-ंयूनतम) के बाद स्वयं प्रशासन को सुदृढ़ करने के लिए पर्याप्त है । हालांकि, साहित्य से पता चलता है कि यह आहार लगातार चूहे कोकीन की एक स्थिर पैटर्न में परिणाम स्वयं प्रशासन३७,३९,५१,५७,६१, कम परिवर्तनशीलता प्रदान जानवरों के बीच जो प्रयोगकर्ता के बाद आत्म प्रशासन उपचार समूहों में विषयों तरह की अनुमति देता है, अगर वांछित28,३९,५१,५७। हालांकि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि कम अवधि और कम सत्र लंबाई प्रक्रिया पूरी तरह से मानव आत्म प्रशासन दोहराऊंगा नहीं करता है, जहां आम तौर पर बिंग जैसे पैटर्न कोकीन-निर्भर विषयों६२में उभरने । फिर भी, यदि सतत स्वयं प्रशासन ने कुतर मॉडलों में अनुमति दी है तो मृत्यु दर अत्यंत उच्च६३है.

अतिरिक्त चर पर विचार के लिए कोकीन खुराक और अर्की दर व्यक्तिपरक इनाम प्रतिक्रिया के इन प्रभाव संवेदीकरण के बाद से कर रहे हैं । सुई लेनी की तेजी से गति कोकीन की मजबूत प्रभाव के लिए संवेदीकरण वृद्धि, जबकि धीमी गति यह६४कमी. खुराक के बाद से कोकीन स्वयं प्रशासन के लिए निर्भरता वक्र एक औंधा यू आकार और खुराक है प्रति घंटा५५सुई लेनी की संख्या को प्रभावित; ऊपर प्रोटोकॉल एक खुराक जो खुराक के शिखर के पास आता है का उपयोग करता है-दोनों अल्पकालिक उपयोग और दीर्घकालिक उपयोग प्रक्रियाओं६१ में प्रतिक्रिया वक्र ताकि सुई लेनी की संख्या में बदलाव का पता लगाने के लिए । प्रतिसंतुलन लीवर एक और महत्वपूर्ण नियंत्रण है ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि चूहे दूसरे के ऊपर एक लीवर के लिए प्राथमिकता न दिखाएं ।

आंकड़ा 1 के प्रतिनिधि परिणाम पुरुष, Sprague Dawley चूहों से डेटा दिखाने के । ऐतिहासिक, इन अध्ययनों क्योंकि कोकीन स्वयं के अधिग्रहण पर मद है चक्र प्रभाव के पुरुष चूहों को प्रतिबंधित किया गया है प्रशासन६५ और विलुप्त/ एक जैविक चर के रूप में सेक्स के बाद से अब NIH के लिए अनिवार्य है वित्त पोषित अध्ययन, यह मद चरण और मिश्रित सेक्स अध्ययन में सेक्स मतभेदों के लिए परीक्षण की निगरानी करने के लिए अनिवार्य हो गया है और, जैसे, सांख्यिकीय शक्ति सभी प्रयोगात्मक समूहों के लिए विचार किया जाना चाहिए । एक और नोट पर, इस तरह के Sprague Dawley के रूप में एक नस्लीय चूहे तनाव का उपयोग करते हैं, कि यह आनुवंशिक विविधता और अधिक मानव आबादी के लिए तुलनीय प्रदान करता है में लाभकारी है-हालांकि यहां तक कि मूषक उपभेदों पूरी तरह से नहीं हो सकता है दोहराऊंगा विविध आनुवंशिक प्रभाव सोचा आबाद के व्यसनी मनुष्यों में व्यवहार की तरह६७। अंत में, प्रारंभिक कोकीन जोखिम की आयु एक महत्वपूर्ण विचार है । चूहों में, किशोरावस्था के दौरान कोकीन के लिए जोखिम एक वातानुकूलित जगह वरीयता है कि विलुप्त होने परीक्षणों की एक बड़ी संख्या में६८बुझाने की आवश्यकता में, सुझाव है कि किशोर चूहा कोकीन की अधिक दृढ़ता की मांग को दर्शाता है व्यवहार. इस प्रकार, जंम के पूर्व और जल्दी जन्मोत्तर कोकीन के लिए जोखिम की संभावना कोकीन क्यू जेट बदल जाएगा ।

क्योंकि विलुप्त होने क्यू जेट परीक्षण का लक्ष्य नहीं है, एक सीमा है कि इस कार्य का समय पर या लंबी अवधि के मूल्यांकन नहीं किया जा सकता है, या फिर पशु कोकीन (प्राथमिक) असतत क्यू परिसर के साथ मजबूत की बांधना बुझाने होगा ( कंडीशन्ड मजबूत) । इस प्रकार, ध्यान जब प्रयोग डिजाइन करने के लिए सुनिश्चित करें कि इस विलुप्त होने नहीं होता है लिया जाना चाहिए । हालांकि, इस कार्य का एक लाभ यह है कि कोकीन-युग्मित cues के लिए जोखिम से प्रेरित सटीक जैव रासायनिक परिवर्तन इस कार्यविधि का उपयोग करके आविर्भाव किया जा सकता है । इस कार्य के लिए एक दूसरी सीमा है कि यह केवल सकारात्मक मजबूत करने के लिए काम करता है, हालांकि इस दुरुपयोग की दवाओं के लिए कई मॉडलों के लिए आम एक सीमा है । प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम कैथेटर प्रत्यक्षता (चरण २.२), स्वयं के अधिग्रहण प्रशासन (कदम ३.२), उपचार समूहों में चूहों के उचित वितरण, कि सुई लेनी और की संख्या के लिए सांख्यिकीय समकक्ष हैं, का रखरखाव शामिल लीवर प्रेस (कदम 3.2.6), और उचित सॉफ्टवेयर भर प्रोग्रामिंग सुनिश्चित करने के लिए कि असतत cues प्रस्तुत कर रहे है और स्वयं के दौरान कोकीन उत्तेजना-प्रशासन प्रशिक्षण और क्यू जेट परीक्षण के साथ जोड़ा (कदम ३.१, ५.१) । अंय पतन भेद्यता मॉडल के साथ के रूप में, यह संयम की एक उचित लंबाई को प्राप्त करने के लिए अनिवार्य है क्यू जेट परीक्षण३३,३४ (चरण 4) के दौरान जवाब देने पर फर्श और छत प्रभाव से बचने के लिए । सबसे अधिक संभावना जटिलताओं इस प्रक्रिया के साथ मुठभेड़ करने के लिए कर रहे हैं 1) स्वयं के अधिग्रहण को रोकने के कैथेटर प्रत्यक्षता की हानि-प्रशासन, 2) आत्म प्रशासन प्रशिक्षण के बाद उपचार समूहों में कुतर के अनुचित वितरण और क्यू करने के लिए पहले एक प्रकार 1 या प्रकार 2 त्रुटि के कारण जेट परीक्षण, और 3) अपर्याप्त संयम समूहों के बीच प्रतिक्रिया में अंतर निर्धारित करने के लिए । ये स्वयं के दैनिक आकलन के द्वारा हल किया जा सकता प्रशासन प्रदर्शन, नियमित कैथेटर flushes, स्वयं के लिए संतुलन प्रशासन के प्रदर्शन के बाद हॉक विश्लेषण समूह पोस्ट करने के लिए काम, और पायलट परीक्षण उचित संयम का निर्धारण कुतर तनाव, आयु, स्व-प्रशासन सत्र की लंबाई और अवधि, दवा, दवा की खुराक, दवा अर्क अवधि, और सेक्स के लिए अवधि ।

यह प्रक्रिया चूहों६९सहित कई चूहे, और किसी भी मॉडल है जो असतत cues (वातानुकूलित मजबूत) के साथ एक प्राथमिक पुरस्कृत मजबूत के बांधना शामिल है, के लिए बढ़ा है । वैकल्पिक प्राथमिक प्रमुख अंय दवा कक्षाएं, उच्च वसा वाले भोजन, और अंय स्वादिष्ट पुरस्कार६९,७०शामिल हैं । अंत में, इस मॉडल के शोधों प्रासंगिकता आगे लेने के एक एफडीए को मंजूरी दे दी है चूहों में परीक्षण के लिए मानव विषयों जुगाली जो कम कोकीन तरस के परिणामस्वरूप के हस्तक्षेप के द्वारा प्रदर्शित किया गया है । इस प्रकार, कोकीन क्यू जेट परीक्षण कोकीन स्वयं प्रशासन और संयम के बाद एक अनुवाद कुतर मॉडल के रूप में वादा रखती है ।

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Disclosures

लेखकों के हित का खुलासा करने का कोई टकराव नहीं है.

Acknowledgments

सभी व्यवहार परीक्षण यूनिवर्सिटी ऑफ टेक्सास मेडिकल ब्रांच (UTMB) में कुतर कर वीवो असेसमेंट (रिवा) कोर, डॉ केली Dineley द्वारा निर्देशित और व्यसन अनुसंधान के लिए केंद्र के भीतर स्थित, डॉ कॅथ्रीन Cunningham द्वारा निर्देशित किया गया था । इस काम के लिए समर्थन पीटर एफ McManus चैरिटेबल ट्रस्ट, राष्ट्रीय पर्यावरण स्वास्थ्य विज्ञान केंद्र के पर्यावरण विषविज्ञान के लिए UTMB (T32ES007254)में संस्थान, UTMB (UL1TR001439) में अनुवाद विज्ञान के लिए संस्थान से आया है, मिशेल Neurodegenerative रोगों के लिए केंद्र, और UTMB में लत अनुसंधान के लिए केंद्र (DA007287, DA070087, और पायलट अध्ययन कोष) ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Equipment
Catheter Tubing: 0.50mm ID x 0.94mm OD x 0.2mm width Fisher Scientific, Hampton, NH, USA 11-189-15A 1/experiment
Cue Light Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA ENV-229M 2/operant chamber
Guide Cannulae (22 gauge, pedestal size-8mm, cut length 11 mm, 5 mm above the pedestal) Plastics One, Roanoke, VA, USA 8IC313G5UPXC 1/rat
House Light Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA ENV-227M 1/operant chamber
Infusion Pump Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA PHM-100 1/operant chamber
Levers Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA ENV-110M 2/operant chamber
Liquid Swivels Instech, Plymouth Meeting, PA, USA 375/22 1/operant chamber
MED-PC Package with Infusion Pump Software Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA SOF-735 (infusions software SOF-700RA-10 version 1.04) 1
Metal Spring Leash Plastics One, Roanoke, VA, USA C313CS/SPC 1/operant chamber
Needle (23g, 1 in) Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ, USA 305193 1/operant chamber
Nitex Mesh (6/6 woven mesh sheet, 12"x12", 500 microns thick, 38% Open Area) Amazon, Seattle, WA, USA CMN-0500-C, B000FMUNE6 ~1 sheet/100 rats
PCI Interface Package Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA DIG-700P2-R2, MED-SYST-16 1/16 operant chambers
Power Supply for Interface Modules Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA SG-6510D 1/16 operant chambers
Sound-attenuating Cubicle Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA ENV-018V 1/operant chamber
Syringes, 10 mL Luer-Lok™ tip Fisher Scientific, Hampton, NH, USA 14-827-52 1 case/experiment (1/operant chamber)
Tygon Tubing for flushes: 0.51mmID x 1.52mm OD 0.51mm width x 152.4m length Fisher Scientific, Hampton, NH, USA 14-170-15B 1/experiment
Chemicals
Acepromazine (10mg/mL) Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA 003845 ~0.5mg/rat*
Acraweld Repair Resin Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA 1013959 1/experiment
Altalube (ophthalmic ointment) Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA 6050059 1/experiment
Cocaine NIDA North Bethesda, MD, USA N/A ~350mgs/rat for whole experiment*; requires DEA License
Heparin (10,000 USP units/10 mL) Sagent Pharmaceuticals, Schaumburg, IL, USA NDC 25021-400-10 1/experiment (~21 units/rat*)
Jet Liquid Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA 1256401 1/experiment
Ketamine (100mg/mL, 10mL) Henry Schein (Dental), Melville, NY, USA 1049007 ~15mg/rat*; requieres DEA license
Methohexital Sodium (Brevital®, 500 mg/50 mL) Patterson Dental, Saint Paul, MN, USA 043-5461 1/experiment; requires DEA License
Saline (0.9%, USP) Baxter, Deerfield, IL, USA 2B1307 1 case/experiment
Streptokinase from β-hemolytic Streptococcus (Lancefield Group C) ≥3,000 units/mg Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA S3134-250KU 1 vial/experiment (~1.5mg/rat/experiment*)
Ticarcillin Disodium Salt Fisher Scientific, Hampton, NH, USA 50-213-695 ~4 vials/exeriment or purchase the 25g vial cat.# 50-489-093 (~150mg/rat/experiment*)
Xylazine (100mg/mL) Henry Schein (Animal Health), Melville, NY, USA 033198 ~3mg/rat*
*Assumes rat age is that described in the protocol, rats self-administer for 14 days, and flushes occur for 21 days.

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Dimet, A. L., Cisneros, I. E., Fox, R. G., Stutz, S. J., Anastasio, N. C., Cunningham, K. A., Dineley, K. T. A Protocol for Measuring Cue Reactivity in a Rat Model of Cocaine Use Disorder. J. Vis. Exp. (136), e55864, doi:10.3791/55864 (2018).

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